中风患者的心理康复措施探讨

目的:探讨中风患者的心理康复措施及其效果。方法:将我院2009年6月至2010年6月收治的120例中风的患者,随机分为观察组和对照组,每组60例,对照组采用神经内科常规护理,观察组在对照组的基础上采用心理康复护理,比较比较两组患者护理前后的焦虑、抑郁评分。结果:两组患者护理前均存在不同程度的焦虑、抑郁现象,护理后观察组的焦虑、抑郁的改善程度显著优于对照组,P<0.05。结论:心理康复护理措施有利于减轻中风患者的负性情绪。     

急性胰腺炎时骨髓和循环内皮祖细胞的变化研究

Objective To investigate changes in number of endothelial progenitor cells(EPCs)from bone marrow and circulation in mice with acute pancreatitis.Methods BALB/c mice were assigned randomly to saline group and cerulein group.Animals were sacrificed at 12, 24 and 48 hours after injection.Bone marrow and circulating EPCs were detected by flow cyzometric analysis.Plasma VEGF, TNF-α and ET-1 were determined by enzyme-linked immunosorbent assay.The expression of VEGF in the pancreas was assessed by Western blotting.Apoptosis in situ was detected by TUNEL.Results The amounts of EPCs in bone marrow and circulation increased remarkably after cerulein injection(P < 0.05), also the levels of plasma VEGF TNF-α and ET-1(P < 0.05), the EPCs levels in bone marrow and circulation seen in the study closely mirrors the levels of VEGF detected in the circulation(r = 0.77, 0.67 individually).VEGF expression in pancreas was up-regulated after 12 h of cerulein injection compared with that of control group.Apoptosis of endothelial cells also increased in the cerulein group.Conclusion EPCs were mobilized by acute pancreatitis, which may be due to the mobilizing effect of increased levels of VEGF, EPCs may participate in the repair process of injured endothelium induced by acute pancreatitis.     

siRNA沉默树突状细胞恒定链以增强其抗肿瘤免疫效果

背景：利用基因修饰树突状细胞（DCs）增强抗肿瘤免疫反应已成为一种有效的策略。RNA干扰（RNAi）能够通过转录后的基因沉默机制特异地降解靶RNA。在本研究中,我们应用DCs恒定链（Ii）特异的小干扰RNA（siRNA）转染DCs后,观察其抗肿瘤效果。 方法：通过WesternBlot验证siRNA沉默效果;利用CCK-8试剂盒检测Ii siRNA转染DCs后其刺激淋巴细胞增殖的能力。此外,通过非放射性cytotox 96® 细胞杀伤检测试剂盒检测被激活细胞的体外杀伤效果。成瘤时间和肿瘤的大小被用作评价Ii siRNA转染DCs体内抗肿瘤效果的可靠指标。为了探讨Ii siRNA转染DCs抗肿瘤的机制,我们还进行了流式细胞仪的检测。 结果：DCs转染Ii siRNA后,其Ii的表达被明显抑制。体外细胞杀伤实验发现,Ii siRNA处理组的T细胞杀伤活力显著增高(P<0.05 )。此外,我们还发现,无论在小鼠接种肿瘤之前还是在接种肿瘤之后给小鼠免疫共转染Ii siRNA和内源性肿瘤抗原的DCs,均能明显抑制肿瘤的生长。通过流式细胞仪检测可能参与体内、外抗肿瘤免疫应答的免疫细胞,结果显示CD4＋和CD8＋T细胞均被明显激活(P<0.05)。 结论：通过siRNA沉默DCs的Ii链可能是一种行之有效的增强抗肿瘤免疫的方法。     

硬膜外麻醉在小儿腹腔镜疝环扎术应用的研究

目的 探讨硬膜外麻醉在小儿腹腔镜疝环结扎术应用可行性.方法 选择40例腹股沟斜疝患儿,随机分为全麻插管组(P组)和硬膜外组(E组),每组20例.观察气腹对BP、HR、RR、SpO2、ETCO2及血气的影响,分段抽桡动脉血测血气.结果 气腹后对E组BP、HR、RR、PaCO2影响较P组明显(P＜0.05),而术后恢复E组较P好.结论 硬膜外麻醉对小儿腹腔镜疝环结扎术后恢复较平稳,只要麻醉选择得当,术中管理正确,实施是可行的.     

HPLC法测定清热消炎宁颗粒中异嗪皮啶和迷迭香酸的含量

目的建立高效液相色谱测定清热消炎宁颗粒中异嗪皮啶和迷迭香酸含量的方法。方法采用HPLC方法,色谱柱为AgilentZORBAX SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80),流速为1.0 ml/min,检测波长为340 nm。结果异嗪皮啶浓度在2.074～41.48μg/ml范围内,迷迭香酸浓度在2.062～41.24μg/ml范围内均呈良好的线性关系,相关系数r分别为0.999 9、0.999 2,平均回收率分别为98.89%、99.16%,RSD分别为1.59%、1.02%。结论该方法操作简便、结果准确、重现性好,可用于清热消炎宁颗粒的质量控制。     

小鼠骨髓来源内皮祖细胞体外诱导培养及分化特征

目的: 研究小鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)的体外培养方法及体外分化特征。方法: 采用梯度离心法分离小鼠骨髓单个核细胞并进行诱导培养,用流式细胞术和免疫细胞化学对细胞表型特征进行检测,分别采用MTT和Transwell方法对其增殖、迁移能力进行检测。结果: 体外培养4 d至14 d,CD133、SCA-1及CD117的表达率分别从11.05%、29.32%及16.45 %降至2.29%、7.82%及3.92%;而VEGFR-2、CD31、VE-cadherin、eNOS及vWF的表达率分别从12.21%、8.43%、18.27%、7.11%及32.61%增加至62.13%、32.96%、67.73%、27.89%及82.16%;吞噬acLDL和结合UEA-I的细胞从57.18%增加至86.70%。在0 μg/L至80 μg/L VEGF浓度梯度下,细胞增殖率和迁移率分别增加58.03%和33.83%。结论: EGM-2内皮培养基可稳定培养小鼠骨髓来源EPCs,培养过程中其干细胞标志物表达逐渐降低,而内皮细胞标志物表达及特性不断增加,VEGF可显著促进其增殖和迁移。     

九节茶栽培品中指标成分含量的动态分析研究

目的 对九节茶栽培品中指标成分异秦皮啶的动态分析研究,确定栽培九节茶的最佳采收期.方法 采用热浸法提取,高效液相色谱法分别测定不同采收月份栽培九节茶的水溶性浸出物及异秦皮啶的含量.结果 栽培九节茶浸出物1～9月份逐渐升高,9月份达到高峰,异秦皮啶含量在1～10月份逐渐增加,10月份达到峰值,两指标在11～12月份稍微降低.结论 栽培九节茶药材的最佳采收期为9～10月.     

进展期贲门癌病人脾脏免疫状态的研究

为了探讨进展期贲门癌病人脾脏的免疫状态，分别检测了２０例病人的外周血、脾静脉血与脾脏的ＮＫ细胞活性、Ｔ淋巴细胞亚群（ＣＤ）。结果示（１）与正常人相比，进展期贲门癌病人的外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）、脾静脉血淋巴细胞（ＳＶＬ）及脾细胞（ＳＣ）的ＮＫ细胞活性、ＣＤ、ＣＤ细胞抑低，ＣＤ细胞增多，致ＣＤ／ＣＤ细胞比值明显下降；（２）从进展期贲门癌病人ＰＢＬ、ＳＶＬ与ＳＣ三者之间比较结果可见，后二者的ＮＫ细胞活性、ＣＤ／ＣＤ细胞比值均明显低于ＰＢＬ。我们认为，进展期贲门癌能削弱病人的整体免疫功能；随着肿瘤的进展，脾脏逐步转向负性免疫状态。     

基因修饰对消化道肿瘤细胞化疗药敏感性的影响

目的：探讨UPRT基因修饰消化道肿瘤细胞后对5-氟脲嘧啶(5-FU)杀伤效应的增强作用。方法：采用PCR技术从大肠杆菌K12菌株基因组中扩增UPRT基因，并构建pLXSN逆转录病毒表达载体，进一步转染人胃癌细胞株SCG7901、大肠癌细胞株Lovo以及肝癌细胞株7721。采用MTT法检测转导UPRT基因前后，肿瘤细胞对5-FU敏感性的变化。结果：通过逆转录病毒载体介导UPRT基因修饰肿瘤细胞，体外MTT法检测结果显示，转导UPRT基因后可使SCG7901、Lovo及7721对5-FU的敏感性分别提高约21．07、30．25及35．19倍。结论：UPRT基因修饰肿瘤细胞，能明显提高其对5-FU杀伤的敏感性，增强5-FU的抗瘤效应。     

支气管上皮细胞表达IL-6和IL-8的研究

目的以支气管上皮细胞株BEAS-2B细胞为研究对象，观察在Th2型细胞因子和促炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNFα)的作用下，IL-8和IL-6的表达变化。方法通过RT-PCR方法测定Th2型细胞因子IL-4、IL-13以及促炎症因子TNFα单独和协同刺激下BEAS-2B细胞IL-8和IL-6的基因表达；通过ELISA方法测定细胞培养上清液中蛋白质的表达。结果在IL-4、IL-13和促炎症因子TNFα的单独刺激下，IL-6和IL-8的基因和蛋白质表达均较未刺激组显著增高；但IL-4、IL-13和TNFα协同刺激后，IL-8的基因和蛋白质表达进一步增高，而IL-6反而降低。结论支气管上皮细胞在TNFα和Th2型细胞因子的协同刺激下，通过调节IL-6和IL-8的表达，进一步调节嗜酸粒细胞性和非嗜酸粒细胞性炎症。