胃肠道在呼吸机相关肺炎发病中的作用

目的 探讨胃肠道在呼吸机相关肺炎(VAP)发病中的作用.方法 将44只免疫功能正常的新西兰大白兔按数字随机法分为5组:(1)正常动物对照组(C组,2只);(2)单纯机械通气组(MV组,5只);(3)细菌接种组(B组,11只),即机械通气+胃内注入铜绿假单胞菌(或大肠杆菌),建立VAP动物模型;(4)促胃动力组(P组,13只),即机械通气+胃内注入大肠杆菌/铜绿假单胞菌+促胃动力药物(莫沙必利);(5)抑胃动力组(Ⅰ组,13只),即机械通气+大肠杆菌/铜绿假单胞菌+抑制胃动力药物(盐酸洛哌丁胺胶囊).干预P组和Ⅰ组胃肠动力,并维持胃液非强酸性环境,监测口咽部、大气道和消化道菌群,通气结束时行肺组织病理评分和组织学培养.采用SPSS 11.5统计软件,计量资料均数之间比较用t检验,率之间比较用χ2检验,3组均数之间比较用单因素方差分析(One-Way ANOVA).结果 肺接种菌感染率为10.8%(4/37);机械通气早期,胃动力改变不影响VAP的整体发生率(χ2=0.83,P0.05),P组肺接种菌感染率(0.0%,0/13)低于Ⅰ组(23.1%,3/13,χ2=4.55,P<0.05),P组口咽部接种菌检出时间迟于Ⅰ组;细菌按种后机械通气动物肺组织评分高于单纯机械通气组动物.结论 胃肠道菌群不是早发性VAP病原菌的来源,在晚发性VAP中可能占有较为重要的地位;胃肠动力影响VAP发生,改善胃肠动力有助于减少消化道菌群所致VAP.     

ARDS与多器官衰竭的病原谱和临床特点

报告32例ARDS/MOF患者发生的感染,其中免疫抑制宿主和老年人各占37.5％和43.8％,因感染导致MOF者占75.0％,内由原发性肺炎引起者占全部病例的53.1％;败血症为导致MOF的第二位原因。ARDS/MOF感染病原体中79.3％为条件致病菌,高度耐药的非发酵菌、肠球菌、表皮葡萄球菌尤其常见,占55.9％,特殊病原体占15.2％。有43.8％的患者发生菌群转换,转换频率为3.4。半数以上(17例)出现复合菌,发生复合菌感染者受累衰竭器官数3.8个,而单一感染者平均2.9个。死亡率81.3％,死亡者平均衰竭器官数3.5个,而痊愈者为2.5个,表明ARDS/MOF患者感染越严重,衰竭器官数越多,病死率越高。     

小干扰RNA沉默bcl-2基因抑制胃癌细胞生长的研究

目的利用RNA干扰技术,研究靶向bcl-2的小干扰RNA(siRNA)在体内外对胃癌细胞生长的影响,探讨其对胃癌治疗的可行性。方法化学合成bcl-2基因的siRNA,脂质体法将bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞,采用实时定量PCR和Western印迹观察bcl-2 siRNA转染前后胃癌细胞bcl-2基因的表达变化,四甲基偶氮唑盐(MTT)实验、流式细胞检测技术和端粒重复序列扩增法(TRAP)分别检测胃癌细胞增殖、凋亡和端粒酶活性变化。并将转染bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种于裸鼠皮下,观察其在裸鼠体内成瘤及生长情况。结果数据经方差分析,bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,明显抑制bcl-2基因表达,并与其浓度和作用时间相关,以100 nmol/L bcl-2 siRNA对bcl-2基因表达抑制效果最佳。以该浓度的bcl-2 siRNA转染胃癌SGC 7901细胞后,bcl-2 mRNA和蛋白表达抑制分别为79．9%和85．3%；经bcl-2 siRNA作用的SGC 7901细胞生长明显缓于对照组(P＜0．05),细胞凋亡率高于对照组(P＜0．05),端粒酶活性明显低于对照组(P＜0．05)。转染100 nmol/L bcl-2 siRNA的胃癌SGC 7901细胞接种裸鼠皮下后,肿瘤出现时间晚,体积小．生长受到明显抑制(P＜0．05)。结论靶向bcl-2的siRNA可明显下调靶基因bcl-2的表达,在体内外抑制胃癌SGC 7901细胞的生长,为探索胃癌基因治疗提供新的策略。     

分析护理干预对妊娠期糖尿病患者的应用效果及对睡眠质量影响

目的：分析护理干预对妊娠期糖尿病患者的应用效果及对睡眠质量影响。方法：选取2020年5月至2021年7月宁德蕉城区医院收治的妊娠期糖尿病患者46例作为研究对象,按照随机数字表法分为观察组(n=25)和对照组(n=21)。对照组给予传统医疗护理干预,观察组给予优质护理干预。采用阿森斯失眠量表(AIS)比较2组患者干预前后睡眠质量的变化,采用老年人自我护理能力量表(ESCA)比较2组患者干预前后自护能力的变化,采用健康调查简表(SF-36)比较2组患者干预前后的生命质量改善效果,并比较2组患者的血糖控制情况及妊娠结局。结果：护理干预后,观察组AIS评分显著低于对照组,观察组ESCA评分、SF-36评分均显著高于对照组,观察组血糖控制状况明显改善,睡眠质量和自我管理水平也显著提高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论：护理干预在治疗妊娠期糖尿病患者中表现出显著的疗效,可有效提升患者的睡眠质量并改善妊娠结局,值得临床推广使用。     

CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用

实验旨在研究CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用。将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组．即去除CD4^＋CD25^＋T细胞组和未去除CD4^＋CD25^＋T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN一1分泌,以及多肽特异性CD8^＋T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性。结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,所诱导的特异性CD8^＋CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8＋T细胞对MFC杀伤活性增强。这些结果表明。预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加。CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用。     

卡氏肺孢子虫虫体负荷与肺损伤的关系研究

为研究卡氏肺孢子虫 (Pneumocystis carinii,PC)虫体负荷与肺损伤的关系 ,采用清洁级 Sprague- Dawley(SD)大鼠 (5 0只 )每周两次皮下注射醋酸可的松 ,连续 8～ 12 wk,建立卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)模型。共计 14只大鼠 PCP诱导成功。测定支气管肺泡灌洗液 (BAL F)细胞计数及分类、总蛋白 (TP)、白蛋白 (AL B)、碱性磷酸酶(AL P)、乳酸脱氢酶 (L DH)、 型胶原酶 (MMP- 2、MMP- 9)等肺损伤的活性指标。并根据病理组织观察计数虫体累及肺泡数多少 ,将 PC虫体负荷分为轻度组 (每 10 0个肺泡中被虫体累及肺泡数 <2 5 % ,A组 ,n=6 ,)和中重度组(每 10 0个肺泡中被虫体累及肺泡数≥ 2 5 % ,B组 ,n=8) ,比较 PC虫体负荷与肺损伤的关系。 6只清洁级 SD大鼠作为正常对照组 (C组 )。结果在 PC虫体负荷中重度组的 BAL F中白细胞总数 (6 .8× 10 6 /L± 1.7× 10 6 /L)较轻度组 (3.8× 10 6 /L± 1.2× 10 6 /L)明显增加 ,但分类差异不明显。中重度组 BAL F中 AL B为 (892 .7± 46 8.9) μg/ml,较轻度组的 (2 6 2 .2± 16 9.3) μg/ml明显为高 (P<0 .0 1) ;正常对照组仅为 (2 6 .3± 2 1.0 ) μg/ml。中重度组 TP为(175 5 .6± 70 5 .6 ) μg/m l、L DH为 (2 5 .8± 5 .5 ) U/dl,显著高于轻度组 [TP(783.5± 5 5 3.0 )     

多发性硬化患者T细胞克隆中CD3CD56双阳性细胞的分析

目的多发性硬化(MS)是一种器官特异的自身免疫病,病变侵犯中枢神经系统.MS不仅有T,B细胞介导,而且与脑淋巴瘤的发生有密切关系.方法本文用T细胞克隆技术,细胞表型分析技术和细胞毒活性分析经MBP抗原肽治疗的MS患者外周血的T,B淋巴细胞(另文发表).结果经MBP抗原肽诱导的T细胞克隆中有相当一部分T细胞系不仅高表达CD3CD56双阳性标志(NKT细胞),50.7%±4.9%,对照为6.0%和3.0%,而其他神经系统疾病分别是11.0%和20.0%,且这种双阳性细胞群不同于NK细胞能特异杀伤神经胶质瘤(59.7%±4.9%)而NK细胞仅为17.3%±4.5%,具有统计学差异.结论用MBP抗原肽诱导的T细胞克隆可用作疫苗治疗MS患者,而这种高表达CD3CD56双阳性标志(NKT细胞)对神经胶质瘤细胞较NK细胞潜在的更强的杀伤活性.至于其抗瘤机制正在研究之中.     

辅助性T细胞和细胞毒性T淋巴细胞双表位修饰的树突状细胞肿瘤疫苗治疗胃癌的实验研究

目的研究辅助性T细胞（Th）表位和细胞毒性T淋巴细胞（CTL）双表位修饰的树突状细胞（DCs）肿瘤疫苗用于胃癌免疫治疗的效果。方法用CTL表位MAGE-341-49和Th表位MAGE-322-36混合多肽冲击DCs，每周刺激脾脏T细胞1次，4周后收集多肽特异性T细胞。流式仪分析T细胞亚群分布，测定CD4^＋T细胞识别抗原细胞因子分泌及CD8^＋T细胞杀伤肿瘤细胞效能，观察双表位修饰的DCs肿瘤疫苗治疗胃癌的保护性免疫效应。结果双表位致敏的DCs体外可同时活化CD4^＋和CD8^＋T细胞，其中CD4^＋T细胞识别肿瘤细胞小鼠前胃癌细胞株MFC后分泌大量Th1型细胞因子[干扰素（IFN）-γ，白介素（IL）-2]，CD8^＋T细胞强效杀伤MFC。双表位修饰的DCs肿瘤疫苗小鼠体内免疫治疗获得抵抗后继胃癌细胞MFC的免疫保护能力，并显著高于单一表位（CTL或Th）修饰的DC8疫苗。结论Th和CTL双表位修饰的DCs肿瘤疫苗可同时激活CD4^＋Th1细胞和CD8^＋CTL抗肿瘤免疫，有效清除胃癌细胞。     

TXNDC9在结肠直肠癌组织中的表达及其影响

目的:探讨TXNDC9基因在结肠直肠癌组织和细胞中的表达,以及沉默TXNDC9高表达后对细胞株SW1116增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:分别应用免疫组织化学技术、免疫印迹法观察TXNDC9在结肠直肠癌组织和细胞中的表达水平:应用小干扰RNA瞬时转染TXNDC9高表达的结肠癌细胞株SW1116,用实时PCR筛选最高效率的干扰片段,并用Western印迹法检测基因沉默效果:最后研究瞬时转染后SW1116细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:结肠直肠癌组织中TXNDC9的表达明显高于对照的癌旁正常组织(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力亦有明显下降(P<0.01)。结论:TXNDC9在结肠直肠癌组织中的表达显著高于癌旁正常黏膜上皮,并与肿瘤的大小和浸润深度相关,SW1116是TXNDC9基因高表达的细胞株之一,下调TXNDC9表达能显著抑制该细胞的增殖能力、细胞迁移和侵袭能力。TXNDC9基因对维持肿瘤细胞的增殖和运动能力有重要作用,并可能成为抑制肿瘤生长和转移的有效途径。     

树突状细胞及其负载胃癌细胞总RNA的抗肿瘤作用

目的以小鼠胃癌细胞总RNA负载树突状细胞(DC),研究其抗肿瘤免疫作用.方法磁性细胞分选器(MACS)自小鼠脾细胞中分选出CD11c+的DC作短期培养,以小鼠前胃癌细胞株的总RNA脉冲DC,分别以RNA脉冲的DC(RNA/DC)和未脉冲的DC(UDC)皮下注射免疫小鼠2次;免疫后7 d,皮下接种小鼠前胃癌细胞MFC 5×105/鼠,以未作免疫注射的小鼠作为对照.接种肿瘤细胞后21 d,处死实验动物,测量肿瘤体积,检测自然杀伤细胞(NK)、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性和血清IL-12含量.结果RNA/DC免疫组、UDC免疫组和对照组的皮下肿瘤体积分别为(0.3688±0.6571)、(0.7536±0.3659)、(2.6323±1.1435)cm3.RNA/DC免疫组外周血和脾细胞NK活性均明显升高,较对照组分别高出66.2%和65.4%;其肿瘤特异性CTL也明显升高,较对照组升高49.5%.UDC组NK和CTL活性也明显高于对照组.结论短期培养的DC和以肿瘤细胞总RNA作为抗原脉冲的DC均可诱导较强的抗肿瘤免疫.