SOX9在青少年特发性脊柱侧凸患者骨髓间质干细胞的表达及意义

目的：探讨SOX9在青少年特发性脊柱侧凸（AIS）发病机制中的作用。方法：30例12～18岁志愿者分为两组，AIS组20例，同年龄对照组10例。分别从髂前上棘处穿刺抽取10ml骨髓，肝素抗凝。采用密度梯度离心法分离骨髓间质干细胞（MSCs），体外培养并传至P2代行表型鉴定，分别采用RT—PCR法、Western blotting法及免疫荧光法检测两组MSCs中SOX9的表达情况。结果：不论是核酸水平还是蛋白水平，AIS组患者的SOX9表达均高于对照组（P〈0．01）。结论：转录因子SOX9在MSCs水平表达强度的异常可能与AIS发病相关。     

单细胞反转录酶聚合链式反应技术对胰岛干细胞标记物胰岛素促进因子的鉴别

目的：利用干细胞分化获得胰岛细胞后目前还没有较理想的鉴别方法，实验通过单细胞反转录酶聚合链式反应技术鉴别胰岛干细胞标记物胰岛素促进因子，以建立一种检测胰岛干细胞的有效方法。方法：实验于2001-10／2005-08在加拿大多伦多大学和南京大学附属鼓楼医院完成。①将收集培养2～4周的单个胰岛干细胞用于实验。②胰岛活性测定实验中，选择1&;#215;10^6分化的胰腺干细胞，用低浓度和高浓度葡萄糖分别刺激1～4h，检测12，14，24d培养液中胰岛素的浓度。③单细胞反转录酶聚合链式反应检测胰岛素促进因子基因实验中，选择12个单个胰腺干细胞进行检测，另取12个单个未分化的干细胞作为对照。聚合链式反应体系为20μL。聚合链式反应扩增反应条件为94℃预变性4min，94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸2min条件下循环35次。聚合链式反应产物以质量浓度为20g/L的琼脂糖凝胶电泳。结果：①分化的胰腺干细胞培养液中胰岛素浓度的检测：培养12，14，24d时培养液中胰岛素的浓度分别为42．6，68．2，73．5IU／L，随着时间的延长，呈逐渐升高的趋势。②单个胰岛干细胞胰岛素促进因子反转录酶聚合链式反应检测结果：12个单个胰岛干细胞中有7个胰岛素促进因子表达呈阳性，而作为对照的12个未分化干细胞均未检出，两者差异显著（P〈0．001）。结论：采用单细胞反转录酶聚合链式反应检测方法为胰腺干细胞的鉴定和纯化提供了技术保障，证明单细胞反转录酶聚合链式反应是一种检测胰腺干细胞标记物的有效方法。     

中医药治疗免疫性血小板减少症的机制

免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia,ITP)是一种免疫介导的血小板破坏增多、血小板生成不足,以皮肤黏膜出血为特征的自身免疫性疾病。现代中西医血液病专家共识将ITP的中医病名命名为"紫癜病"。ITP的中医病因复杂,外感内伤均可致病,病机主要为外感邪热,血热妄行;脾气虚损,气不摄血;肝肾阴虚,虚火上炎;瘀血内阻,血不循经。近年来研究表明,从中医临床实践到实验研究,中医药在治疗ITP的作用机制上取得了一些进展,包括抑制血小板相关抗体的产生,减少血小板的破坏及改善血小板功能;促进巨核细胞成熟及血小板生成增多;调节细胞免疫及体液免疫,使其紊乱的免疫功能恢复平衡。本文就中医药干预ITP的临床及实验研究进行总结分析,为评价中医药治疗ITP的作用机制及新药研发提供参考。     

应用荧光原位杂交技术动态观察急性早幼粒细胞白血病患者PML-RARα融合基因的变化

目的：探讨荧光原位杂交(FISH)技术在急性早幼粒细胞白血病(APL)诊断及疗效判断中的作用。方法：对初发的急性白血病患者行常规形态学、细胞化学染色，并采用FISH技术检测PML-RARα融合基因，流式细胞术分析白血病细胞的免疫表型，对治疗过程中患者PML-RARα融合基因阳性细胞比例进行动态观察。结果：FISH对标准的PML-RARα融合基因的检出与形态学和临床符合率为100％，对流式细胞学免疫表型不符合的APL诊断的1例作出了明确诊断，对累及17号染色体的附加染色体异常也有一定的提示作用，对APL治疗过程中分子生物学缓解的判断非常直观。结论：FISH技术检测PML-RARn融合基因，实验方法简便、快速、直观和准确，具备了用以确定白血病类型，指导临床治疗和进行治疗后的疗效监测的作用。     

基于德尔菲法形成《控烟健康传播核心信息循证指南——吸烟对女性疾病发病率的影响》核心信息研究

目的 基于德尔菲法形成《控烟健康传播核心信息循证指南——吸烟对女性疾病发病率的影响》核心信息并达成共识,为制定具有较好的权威性、代表性及可靠性的控烟健康传播循证指南奠定基础。方法 遴选不同专业领域并且在该领域具有权威性和代表性的专家和受众代表参与德尔菲法投票。专家组成员综合研究证据、临床经验、患者价值观及偏好等因素进行利弊平衡,基于GRADE框架,通过德尔菲专家咨询法对核心信息的推荐等级进行评分,最终达成共识。使用积极系数、权威系数及变异系数对德尔菲法进行质量控制。结果 遴选30名多领域专家和2名受众代表参与德尔菲法专家咨询。经过二轮德尔菲调查后,在51条核心信息中,共有47条达成共识,共识率为92.17%,其中强推荐12条、弱推荐35条。积极系数分别为100.00%(32/32)和84.38%(27/32),专家权威系数为0.63～0.78,核心信息变异系数均<0.35。结论 基于德尔菲法形成的《控烟健康传播核心信息循证指南——吸烟对女性疾病发病率的影响》核心信息具有较好的权威性、代表性及可靠性,为开展和控烟相关的健康传播工作提供证据支持,并为循证指南研究提供方法学参考。     

HCCR1和HCCR2可溶性蛋白在细菌中表达、纯化及在早期肝癌诊断中的应用

目的评估HCCR1和HCRR2克隆、细茵表达及可溶性蛋白的纯化及应用于早期肝癌诊断的可行性。方法cDNA克隆、表达、蛋白质的纯化、Westem blot分析用于评估HCCR1和HCCR2蛋白的生产，Elisa方法用检测血清抗原。结果HCCR1和HCCR2能够高水平地在细茵中表达，纯化的可溶性蛋白能用于生产抗体并应用于肝癌的早期诊断。结论HCCR1和HCCR2蛋白质可以在细茵中生产，并能成功地用于肝癌的早期诊断。     

FISH在免疫表型特殊的急性早幼粒细胞白血病诊断中的应用

为探讨荧光原位杂交(fluoresence in situ hybridization,FISH)技术在免疫表型特殊的急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)诊断中的应用,作者用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测APL患者骨髓中单个核细胞的免疫表型,并用FISH检测患者是否存在PML/RARα融合基因.结果发现,少数APL患者免疫表型为CD13 ,CD33 ,CD34-和HLA-DR ,而利用FISH技术检测后,发现存在PML/RARα融合基因,与典型的APL患者HLA-DR-、PML/RARα融合基因( )的结果不同,提示临床上不能只将免疫表型作为诊断白血病的独立指标,而应该结合传统的FAB分型及新兴的分子诊断技术如FISH、PCR等来协助诊断.     

《三因方》中的呕吐病证治疗探析

本文分析了宋代著名医家陈无择对呕吐病证治疗的学术经验。陈氏强调病因，注重辨证，将呕吐病证分为“寒呕”、“热呕”、“痰呕”、“食呕”、“血呕”、“气呕”等，并分别阐述了其病因证状及治疗。     

3MPR-IA/IB在青少年特发性脊柱侧凸骨髓间质干细胞中的异常表达及意义

目的：从骨髓间质干细胞（MSCs）水平探讨BMPR-IA/IB表达与青少年特发性脊柱侧凸（AIS）发病可能相关的分子机制。方法：30例12-18岁志愿者分为2组：AIS组20例，同年龄正常对照组10例。髂前上棘处穿刺抽取10mL骨髓，肝素抗凝。密度梯度离心法分离MSCs，体外培养并传至P3代行表型鉴定，采用RT-PCR法、Western-blotting法、免疫荧光法检测2组MSCs中BMPR-IA/IB的表达情况。结果：BMPR-IA/IB不论是核酸水平还是蛋白水平的表达，在AIS组均要显著高于正常对照组（P〈0．01）。结论：BMPs信号通路中重要的膜表面分子BMPR-IA/IB在MSCs水平表达的异常可能与AIS发病的分子机制相关。     

阻塞性睡眠呼吸暂停综合征对不稳定型心绞痛患者血清C1q水平的影响及其与血小板聚集率的相关性

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)对不稳定型心绞痛(UAP)患者外周血C1q水平的影响,及其与经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后血小板聚集率(PAR)之间的相关性。方法 连续入选2018年7月—2019年7月在北京安贞医院行PCI术的UAP患者182例,所有患者均行多导睡眠监测。以呼吸暂停低通气指数(AHI)≥15的患者为OSAS组(n＝92),AHI＜15的患者为对照组(n＝90)。检测患者血清C1q水平和二磷酸腺苷诱导的PAR。分析AHI、血清C1q与PAR的关系。结果 OSAS组血清C1q水平显著高于对照组[176.00(174.28,189.26)mg/L比174.50(167.15,180.76)mg/L,P＝0.030]。PCI术后1个月OSAS组PAR显著高于对照组[(51.36%±19.34%)比(42.56%±22.23%),P＝0.007]。Spearman相关分析发现AHI、血清C1q与PAR呈显著正相关(r＝0.219,P＝0.003;r＝0.634,P＜0.001)。多重线性回归分析显示,AHI和血清C1q是PCI术后PAR升高的独立影响因素(P＝0.036;P＜0.001)。结论 UAP合并OSAS患者血清C1q显著升高。AHI和C1q是UAP合并OSAS患者PCI术后1个月发生血小板高反应性的影响因素。