应用免疫磁珠法分离人胚胎神经干细胞的培养及鉴定

目的:从流产胚胎中分离出神经干细胞并培养、扩增和进行鉴定,为神经干细胞移植寻找源泉。方法:实验于2001-02/2005-06在加拿大多伦多大学和南京大学附属鼓楼医院完成。收集流产的胎儿脑组织,备人胚胎大脑组织细胞悬液制免疫磁珠法分离神经干细胞,实验设计共随机选择24个分离的单个神经干细胞通过反转录酶聚合链反应技术的方法用DNA扩增仪检测单个细胞中nestin神经干细胞标记物,betaactin为内参对照。以结果:分离的人胚胎神经干细胞生长、扩增正常,nestin阳性细胞纯度极高。结论:免疫磁珠法对胚胎神经干细胞的分离,及反转录聚合酶链反应技术在神经干细胞鉴定中的应用是值得进一步探讨的途径。     

11例黑热病相关噬血细胞综合征的临床特点分析

目的:分析黑热病相关噬血细胞综合征患者的临床特征,讨论此类患者的诊断和治疗。方法:收集并分析2018年10月—2021年12月确诊的11例黑热病相关噬血细胞综合征患者的临床资料。结果:11例患者中,10例来自黑热病流行地区,6例初诊时血清球蛋白升高,9例行噬血细胞综合征细胞因子谱检测到IL-10异常增高,2例合并EB病毒感染,1例合并干燥综合征。经8周治疗后,通过噬血细胞综合征疗效评估,6例达完全缓解(其中3例使用了芦可替尼治疗),5例达部分缓解;所有患者均未检测到利什曼原虫;血小板计数、铁蛋白、纤维蛋白原三项指标治疗后均明显改善,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:临床医生接诊来自黑热病流行地区的噬血细胞综合征患者需警惕黑热病可能。分子生物学筛查对黑热病相关噬血细胞综合征的诊断有重要意义,早期联合芦可替尼治疗或可提高黑热病相关噬血细胞综合征的疗效,血小板、铁蛋白、纤维蛋白原可作为重要的疗效评估指标。     

Runx2在青少年特发性脊柱侧凸患者骨髓间质干细胞中的表达及意义

目的：从骨髓间质干细胞（MSCs）水平探讨青少年特发性脊柱侧凸（AIS）发病的机制。方法：40例12～18岁志愿者，AIS患者20例，先天性脊柱侧凸（CS）患者10例，正常对照组10例。分别从髂前上棘处穿刺抽取10ml骨髓，肝素抗凝。采用密度梯度离心法分离MSCs，体外培养并传至P3代时行表型鉴定，采用RT-PCR法检测3组MSCs中核心结合因子α1（Runx2）mRNA的表达强度。结果：分离所得单个核细胞传至P3代经流式细胞仪鉴定表型与MSCs表面标记相符。AIS组Runx2的mRNA表达强度与CS组及正常对照组相比有显著统计学差异（P〈0．01），CS组与正常对照组相比无统计学差异（P〉0．05）。结论：转录因子Runx2在MSCs水平表达强度的异常可能与AIS发病有关。     

对糖尿病患者的综合护理方法及体会

随着对糖尿病认识的深入，人们越来越认识到全面有效地控制糖尿病并非单靠用药可以达到，因此如何护理老年糖尿病患者就成了很多糖友家属关心的事。对糖尿病患者的护理及健康教育干预，能使我们的糖尿病患者及时的了解有关护理知识，帮助我们的糖尿病患者积极的配合治疗，及时掌握和预防有关并发症。笔者根据自身的护理经验就糖尿病患者的护理提出了自己的见解。     

睾丸外组织雄激素受体的分布及检测

雄激素受体 (AR)是介导雄激素在靶细胞中发挥作用的关键大分子 ,主要存在于男性睾丸组织中。本文综述了AR及其mRNA在泌尿生殖系统的前列腺、附睾、阴茎皮肤等睾丸外组织 ,头皮、海马旁回、脂肪等非泌尿生殖系统组织及在胃癌、喉癌等睾丸外肿瘤组织中的分布情况 ,并对AR的检测方法进行了复习 ,以进一步研究循环血中雄激素对人体各系统的作用     

灞桥区肾综合征出血热流行及防治现状调查分析

本文通过对灞桥区l15例肾综合征出血热病人和42家村卫生室的调查，对灞桥区农村出血热的流行特点及防治现状进行了分析，提出了切合当地实际的防治措施。     

游离脂肪酸受体1在慢性炎症性疾病中的功能及药物研究进展

游离脂肪酸受体1 (free fatty acid receptor 1, FFAR1)属于G蛋白受体家族(G protein coupled-receptors,GPRs),又称GPR40。研究发现FFAR1在多种组织器官中表达,介导多种生物学功能,不仅调控脂肪酸及葡萄糖等物质的代谢,而且在免疫炎症反应中发挥重要作用,可能成为多种慢性炎症性疾病的治疗靶点。本综述就FFAR1在病理生理过程的调控机制及药物研发对近年来取得的研究新进展作一总结,并以多种化合物的发现为例,展望FFAR1在慢性炎症性疾病中的应用前景。     

单细胞反转录酶聚合链式反应技术对胰岛干细胞标记物胰岛素促进因子的鉴别

目的:利用干细胞分化获得胰岛细胞后目前还没有较理想的鉴别方法,实验通过单细胞反转录酶聚合链式反应技术鉴别胰岛干细胞标记物胰岛素促进因子,以建立一种检测胰岛干细胞的有效方法。方法:实验于2001-10/2005-08在加拿大多伦多大学和南京大学附属鼓楼医院完成。①将收集培养2～4周的单个胰岛干细胞用于实验。②胰岛活性测定实验中,选择1×106分化的胰腺干细胞,用低浓度和高浓度葡萄糖分别刺激1～4h,检测12,14,24d培养液中胰岛素的浓度。③单细胞反转录酶聚合链式反应检测胰岛素促进因子基因实验中,选择12个单个胰腺干细胞进行检测,另取12个单个未分化的干细胞作为对照。聚合链式反应体系为20μL。聚合链式反应扩增反应条件为94℃预变性4min,94℃变性30s,60℃退火30s,72℃延伸2min条件下循环35次。聚合链式反应产物以质量浓度为20g/L的琼脂糖凝胶电泳。结果:①分化的胰腺干细胞培养液中胰岛素浓度的检测:培养12,14,24d时培养液中胰岛素的浓度分别为42.6,68.2,73.5IU/L,随着时间的延长,呈逐渐升高的趋势。②单个胰岛干细胞胰岛素促进因子反转录酶聚合链式反应检测结果:12个单个胰岛干细胞中有7个胰岛素促进因子表达呈阳性,而作为对照的12个未分化干细胞均未检出,两者差异显著(P<0.001)。结论:采用单细胞反转录酶聚合链式反应检测方法为胰腺干细胞的鉴定和纯化提供了技术保障,证明单细胞反转录酶聚合链式反应是一种检测胰腺干细胞标记物的有效方法。     

BMPR-ⅠA/ⅠB在青少年特发性脊柱侧凸骨髓间质干细胞中的异常表达及意义

目的:从骨髓间质干细胞(MSCs)水平探讨BMPR-ⅠA/ⅠB表达与青少年特发性脊柱侧凸(AIS)发病可能相关的分子机制。方法:30例12—18岁志愿者分为2组:AIS组20例,同年龄正常对照组10例。髂前上棘处穿刺抽取10mL骨髓,肝素抗凝。密度梯度离心法分离MSCs,体外培养并传至P3代行表型鉴定,采用RT-PCR法、Western-blotting法、免疫荧光法检测2组MSCs中BMPR-ⅠA/ⅠB的表达情况。结果:BMPR-ⅠA/ⅠB不论是核酸水平还是蛋白水平的表达,在AIS组均要显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:BMPs信号通路中重要的膜表面分子BMPR-ⅠA/ⅠB在MSCs水平表达的异常可能与AIS发病的分子机制相关。     

程序降温冷冻保存对血管内皮细胞生长因子表达的影响

目的　探讨冷冻复苏对人脐静脉内皮细胞的血管内皮细胞生长因子 (VEGF)表达的影响以及在生物血管制品保存中的作用。方法　将人脐静脉内皮细胞株 (ECV30 4 )程序降温冷冻保存后再复苏 ,在不同的复苏时间内应用RT PCR和ELISA检测内皮细胞VEGFmRNA及其相应蛋白的表达。结果　复苏 3d内VEGF的表达显著下降 ,第 4d以后恢复至正常表达水平。结论　冷冻复苏血管内皮细胞孵育 4d后VEGF表达基本恢复正常。程序降温冷冻保存可能在制备具有生物活性的血管代用品上具有重要的作用。