骨髓源性肝干细胞的筛选、扩增和分化

Objective To explore the feasibility of direct separation, selective proliferation and differentiation of BDLSC from hone marrow cells with culture systems containing cholestatic serum in vitro.Methods Whole bone marrow cells of rats cultured in routine medium were replaced with con-ditioning selection media containing eholestatic sera of different concentrations after they attached to the plates.The optimal concentration of cholestatic serum was determined according to the outcome of the selected cultures.Then the selected BDLSC were induced to proliferating culture system and dif-ferentiating culture system.Each passage of the proliferated stem cells was subjected to flow cytome-try for detection of stem cell markers.The morphology and phenotypie markers of BDLSC were char-acterized using immunohistochemistry, RT-PCR and electron microscopy.The metabolic functions of differentiated cells were also determined by glycogen staining and urea assay.Results The 50 ml/L eholestatie serum was the optimal concentration for the selection of BDLSC at which BDLSC could sur-vive while the other populations of the bone marrow cells could not.The purified BDLSC could prolif-erate for 6 passages and maintained stable markers in our proliferating system.When the culture sys-tem changed to differentiating system, hepatocyte-like colony-forming units (HCFU) were formed.HCFU expressed markers of embryonic hepatoeytes (AFP, albumin and cytokeratin 8/18), biliary cells (cytokeratin 19), hepatocyte functional proteins (transthyretin and eytoehrome P450-2b1), and hepatocyte nuclear factors (HNF-1α and HNF-3β).They also had glycogen storage and urea synthesis functions, two of the critical features of hepatocytes.Conclusion BDLSC can be selected directly from whole bone marrow cells and pure BDLSC can also proliferate for 6 passages.The differentiated cells have hepatocyte-like phenotype and function.BDLSC will he a new way to provide a readily avail-able alternate source of cells for clinical hepatocyte therapy.     

中国Ⅲ类和Ⅰ类心脏死亡供体在肝移植应用中的近期效果

目的 总结中国Ⅲ类和Ⅰ类心脏死亡供体在肝移植应用中的近期效果.方法 回顾性分析2011年9月-2014年6月在广东佛山市第一人民医院完成的中国Ⅰ类心脏死亡捐献供体(DBD组)和Ⅲ类心脏死亡捐献供体(DBCD组)肝移植的临床资料.结果 DBD组和DBCD组分别有12例和21例受体,两组术前供、受体年龄、原发病、肝功能指标ALT、TBIL、ALB、供肝冷缺血时间、受体MELD评分无明显差异,两组术中出血量、输血量、手术时间、无肝期差异无统计学意义,P＞0.05;DBD组和DBCD组术后中位随访时间分别为8.8个月和20个月,两组肝移植受体和移植物累积生存率均为100％,术后ICU住院时间、术后肝功能恢复时间、术后住院时间、早期并发症、急性排斥反应发病率差异均无统计学意义,P＞0.05.结论 中国Ⅲ类心脏死亡供体(DBCD)肝移植能取得与中国Ⅰ类心脏死亡供体(DBD)肝移植一样的近期效果,详细的供体评估、规范的供体器官获取流程、缩短冷供肝缺血时间、保护供肝胆管周围微血管网、加强围手术期的管理和长期随访是提高中国Ⅲ类心脏死亡供体肝移植受体生存率的关键.     

回盲部癌致右侧腹股沟区与双侧前下腹壁脓肿1例

结肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一, 其发病率呈逐年上升趋势,它的典型临床症状有腹痛、血便及排便习惯改变等. 有文献报道结肠癌侵犯前腹壁的发生率为2.4%[1], 然而形成脓肿并发症的现象更少见,其发生率为0.3%~0.4%[2]. 临床上偶见结肠癌侵入腹壁继发感染而引起腹壁脓肿,这种以腹壁脓肿为首发临床症状的结肠癌具有起病隐匿、漏诊率高、预后差的特点. 本文报告1 例回盲部结肠癌致右侧腹股沟区与双侧前下腹壁脓肿形成的病例来总结该类疾病的临床诊治经验.     

内镜逆行胆胰管造影术处理心脏死亡器官捐献供体肝移植受体术后胆道狭窄临床分析

目的探讨内镜逆行胆胰管造影技术(ERCP)在心脏死亡器官捐献供体(DCD)肝移植术后胆道狭窄治疗中的临床应用价值。方法回顾性分析2011年9月至2014年6月接受DCD肝移植手术治疗的34例肝移植受体的临床资料。结果磁共振胰胆管造影(MRCP)作为诊断肝移植术后胆道狭窄的标准方法,34例DCD肝移植术后发生胆道狭窄8例,发生率为23.53%,其中2例为吻合口狭窄,胆道狭窄组的肝移植等待时间明显长于非胆道狭窄组[(72.5±86.0)d vs(14.4±30.1)d,U=40.0,P=0.01]。1例自行再通,7例接受ERCP胆道内支架置入均获成功,ERCP术后并发胰腺炎4例(57.14%),胆管炎1例(14.29%)和胆管炎合并肝脓肿1例(14.3%)。结论胆道狭窄是DCD肝移植术后常见并发症,MRCP是诊断肝移植术后胆道狭窄的重要非有创性检查手段,ERCP胆道内支架置入是处理肝移植术后胆道狭窄的有效治疗方式,仍需进一步观察ERCP的疗效。     

胰腺外伤的处理经验——附45例报告

【摘要】 目的 探讨胰腺损伤的处理经验。方法 回顾性分析我院及佛山市第一人民医院近10年来收治的45例胰腺外伤患者的临床资料,其中对12例Ⅰ级损伤患者行保守治疗,4例Ⅰ级损伤患者行介入超声治疗;另外29例患者则选择外科手术治疗,其中行单纯手术引流6例,清创修补引流11例,胰尾或胰体尾切除术4例,右半肝联合远端胰腺加脾切除1例,近端胰腺关闭、远端胰腺行胰胃吻合2例,胰十二指肠切除4例,肝、胆总管、十二指肠、胰修补加胃及空肠造瘘1例。结果 全组治愈43例,2例死与多脏器功能衰竭,胰瘘4例,12指肠瘘1例,均经保守治疗后痊愈。结论 根据胰腺外伤的不同位置和程度,选择合适的处理方法有利于提高胰腺外伤的治愈率,减少并发症的发生率。     

新辅助化疗对结直肠癌肝转移患者肝功能及组织学的影响

目的探讨新辅助化疗对结直肠癌肝转移患者肝功能及组织学的影响。方法回顾性分析2010年1月至2012年9月佛山市第一人民医院收治的65例结直肠癌肝转移行肝切除术患者的临床资料。其中39例患者接受连续6个周期的FOLFOX7方案（5-氟尿嘧啶＋亚叶酸钙＋奥沙利铂）化疗,停药1个月后行肝部分切除术（研究组）;26例患者未经化疗直接行肝部分切除术（对照组）。比较两组患者的围手术期情况、术前和术后肝功能、术后并发症以及肝组织病理学改变。组间比较采用t检验或,检验,重复测量的数据采用重复测量的方差分析。结果研究组和对照组患者手术时间分别为（195±37）min和（190±41）min,两组比较,差异无统计学意义（t=0．1,P〉0．05）。研究组患者术中出血量为（410±75）ml,显著多于对照组患者的（348±44）ml（t=6．3,P〈0．05）。研究组患者术后3d血清AST及ATJT值分别为（328±121）U／L和（330±120）U／L,显著高于对照组患者的（160±22）U／L和（168±26）U／L（t=13．4,12．8,P〈0．05）。研究组和对照组患者术前胛、AST、ALT、TBil和Alb比较,差异无统计学意义（t=1．0,0．0,1．4,1．3,0．4,P〉0．05）。研究组患者术后7d血清AST及ALT值分别为（243±132）U／L和（253±147）U／L,显著高于对照组患者的（90±17）U／L和（99±16）U／L（t=12．5,12．0,P〈0．05）。研究组患者大体标本外观淤血、水肿者占71．8％（28／39）,对照组患者无外观淤血、水肿者,两组比较,差异有统计学意义（X2=90．0,P〈0．05）。研究组患者肝窦状隙扩张伴肝细胞萎缩、坏死发生率达48．7％（19／39）,对照组患者为15．4％（4／26）,两组比较,差异有统计学意义（X2=89．2,P〈0．05）。结论FOLFOX7方案长期化疗在停药1个月后对肝功能无明显影响,但对行肝部分切除术后肝功能有影响,且改变了肝实质,有可能对手术产生不良影响。     

体重指数预测脑-心双死亡器官捐献供肝脂肪肝的价值

目的评价体重指数(BMI)预测脑-心双死亡器官捐献(donation after brain plus cardiac death,DBCD)供肝脂肪肝的价值。方法回顾性分析2011年7月至2013年3月在广东省佛山市第一人民医院移植中心实施的22例DBCD供体的临床资料。根据供体BMI将22例供体和17例受体分为体重正常组(18.0～22.9kg/m2)和体重过重组(≥23.0kg/m2)。比较两组供体的术前临床指标及供肝脂肪肝程度,比较两组受体术后7d肝酶学指标、凝血功能及并发症发生情况。采用Pearson法分析供体BMI和供肝脂肪肝程度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析BMI预测供肝脂肪肝的灵敏度和特异度,并计算最佳截点值及相应的灵敏度和特异度。结果 DBCD供体BMI为(22.5±1.3)kg/m2,其中体重正常组13例,体重过重组9例,所有捐献者BMI均未超过28.0kg/m2。体重过重组的平均年龄及供肝脂肪肝程度高于体重正常组,两组比较差异有统计学意义(均为P<0.05)。两组受体术后7d的临床指标比较,体重过重组的丙氨酸转氨酶峰值高于体重正常组(P<0.05)。两组受体术后未发生移植物失功或功能不全和急性排斥反应。供体BMI与供肝脂肪肝呈中等程度相关(r=0.572,P=0.005)。ROC曲线分析显示BMI预测肝细胞脂肪变性率≥30%的曲线下面积为0.87(95%可信区间为0.68～1.00,P=0.005),最佳截点值为BMI≥23.0kg/m2,此时的灵敏度为0.875,特异度为0.643,具有中等程度的预测价值。结论 DBCD供体BMI可以较好地预测供肝脂肪肝,但特异度有待进一步提高。     

腹腔镜解剖性肝切除术:附40例报告

目的 探讨腹腔镜下解剖性肝切除术的可行性及安全性.方法 2008年1月至2012年3月,我院对40例肝良恶性病变患者实施了腹腔镜下解剖性肝切除术.其中原发性肝癌13例、复发性肝癌1例、肝胆管细胞癌1例、转移性肝癌6例、肝胆管结石10例、肝血管瘤7例、肝局灶性结节性增生1例、肝腺瘤1例.术中常规使用腹腔镜超声定位.采用选择性半肝血流阻断技术,应用高频电刀、超声刀或Ligasure等器械离断肝实质.肝断面粗管道用Hemolock夹闭,必要时使用血管切割闭合器离断.实施腹腔镜右半肝切除3例,左半肝切除10例,左肝外叶切除14例,S56切除5例,S5切除3例,S6切除4例,S4b切除1例.结果 全腹腔镜切除34例,中转开腹腔镜辅助切除6例.无围手术期死亡.手术时间(250.21±50.94) min,术中出血(420.20±120.10)ml.术后发生胆漏2例.住院时间(5.68±1.74)d.结论 在严格掌握适应证前提下,腹腔镜解剖性肝切除术是安全、可行的.该法具有创伤小、恢复快的优点,可作为部分肝良恶性病变的标准术式.     

参麦注射液治疗蒽环类药物所致心脏毒性的临床研究

目的:探讨参麦注射液治疗蒽环类药物所致心脏毒性的疗效与不良反应。方法:使用蒽环类药物化疗的癌症患者82例,随机分为两组:对照组(n=47);治疗组(n=35)使用参麦注射液50ml 5%葡萄糖注射液250ml,静脉滴注,每天1次,21天为1个疗程。结果:治疗组有效率(CR PR)48.6%,对照组有效率42.6%,两者间差异无显著性(P>0.05),治疗组心脏毒性低于对照组(P<0.05),治疗组骨髓抑制明显低于对照组(P<0.01)。结论:参麦注射液对蒽环类药物化疗造成的毒副作用有一定的防治作用,减轻化疗所致的血液学毒性和心脏毒性,值得进一步研究。