Ski在全反式维甲酸抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖中的作用

【摘要】目的 探讨全反式维甲酸（ATRA）对转化生长因子(TGF)-β1诱导的大鼠系膜细胞增殖及Ski表达的影响。方法 不同浓度ATRA预处理大鼠HBZY-1系膜细胞（为各剂量ATRA组）24 h后再加TGF-β1 (10 μg/L)培养24 h。 CCK-8法检测细胞增殖情况;Real-time PCR法检测Ski mRNA的表达;Western blot检测Ski蛋白的表达;激光共聚焦荧光显微镜检测Ski蛋白的亚细胞定位。并与正常对照组及TGF-β1组比较。结果 与正常对照组相比,TGF-β1组系膜细胞增殖明显,且Ski mRNA及蛋白表达升高(P < 0.05);与TGF-β1 组相比,ATRA能够呈剂量依赖性地抑制 TGF-β1的促增殖作用,ATRA 10 μmol/L组Ski mRNA及蛋白表达量明显增高。ATRA组Ski蛋白主要定位于大鼠系膜细胞核,其细胞核荧光信号强度较TGF-β1组明显增强,细胞浆中荧光信号强度较TGF-β1组减弱。结论 ATRA可通过上调大鼠系膜细胞Ski表达,抑制其向核外转位,从而抑制TGF-β1诱导的系膜细胞增殖。     

系统性红斑狼疮患者抗心磷脂抗体检测及意义

测定２０例系统性红斑狼疮患者抗心磷脂抗体，血栓素Ｂ２及高凝指标，观察上述指标与血栓，流产等并发症的关系。结果表明，ＡＣＡ阳性组ＴＸＢ２，２’ＰＡｇＴ，４‘ＰＡｇＴ增高及血小板数减少，较ＡＣＡ阴性组有显著性差异；血栓形成，流产等并发症在ＡＣＡ阳性组也较阴性组明显增高，ⅧＲ；Ａｇ在两组间差异无显著性。     

胎儿胃、小肠内分泌细胞的分布及形态学观察

目的探讨胎儿胃、小肠内分泌细胞的分布。方法采用银浸染色方法，对12例胎儿的胃、小肠内分泌细胞行光学显微镜观察。结果胃、小肠中的内分泌细胞（嗜银细胞）呈锥体形、柱形、圆形、梭形、不规则形等。在小肠固有膜结缔组织中有散在的嗜银细胞。该细胞主要分布于小肠绒毛上皮、小肠腺及十二指肠腺，胃部较少，其中以十二指肠最多，空肠、回肠顺次递减，而十二指肠乳头又明显高于十二指肠其他部位，在这些部位有时可见该细胞抵达腺腔，并有颗粒释放于腺腔内。结论胎儿胃肠道含有内分泌细胞，其形态多样，主要分布于小肠及十二指肠乳头部。     

人骨髓间充质干细胞外泌体通过miR-93-5P介导改善肾纤维化

目的 ：探讨人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells, BM-MSCs)外泌体(exosomes,BM-exo)中微小RNA-93-5P(microRNA-93-5P, miR-93-5P)对小鼠肾脏单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型的肾脏保护作用及其机制。方法：16只6周龄雄性Balb/c小鼠被分为假手术(Sham)组、UUO+磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffered saline, PBS)(UUO模型)组、UUO+BM-exo治疗(BM-exo)组、UUO+BM-exo/miR-93-5P抑制剂(BM-exo/miR-93-5P抑制剂)组,每组4只。在UUO术后的第1、3、5天分别对UUO模型组、BM-exo组和BM-exo/miR-93-5P抑制剂组小鼠尾静脉注射0.1 mL PBS、200μg外泌体和200μg加入miR-93-5P抑制剂的外泌体,UUO术后7 d统一处死小鼠,收集各组小鼠的血清,检测血清肌酐(serum creatinine, S...     

人体胚胎学教学改革体会

人体胚胎学是一门重要的医学基础课程,由于该学科的特点,导致学生难学、老师难教的现实困境.文章根据个人的实践教学提出关于如何提高胚胎教学效果的思考:具体从胚胎学的重要性、教学过程中存在的不足,提出改正教学手段、丰富教学内容、加强实践教学以及提升教师自身综合素质方面进行了浅析,以培养综合新型医学人才为更好的适应社会需求.     

Heymann肾炎RAP全长及氨基端融合蛋白表达载体的构建及表达

目的构建大鼠Heymann肾炎致病源RAP全长和氨基端多肽原核融合表达载体,表达并纯化融合蛋白。方法采用RT—PCR法获得RAP全长的cDNA,将其与pGEM-T克隆载体连接并转化,筛选阳性克隆测序;设计针对RAP全长和氨基端的引物进行PCR扩增,获得相应的DNA。纯化后与PGEX-4T-1载体连接,亚克隆到感受态细菌B121中,经IPTG诱导,表达融合蛋白并纯化,经SDS-PAGE和Western Blot检验。结果酶切分析、PCR及DNA序列测定结果表明成功构建了重组原核表达载体pGEX-4T-1-RAP1083/283,并表达出RAP全长70kD和氨基端36kD的融合蛋白。WesternBlot结果显示分别在70、36kD处出现特异性条带,与理论相符。结论RAP,083／258与pGEX-4T-1融合基因表达载体的成功构建及其融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达,为后续研究RAP不同区段在Heymann肾炎发病机制中的作用奠定了基础。     

全反式维甲酸对转化生长因子β诱导的肾小球系膜细胞Sp1及c-met表达的影响

肝细胞生长因子(HGF)是一种多效性的细胞因子,c-met是HGF现已知的唯一的受体,HGF与c-met结合后,发挥相应的生物学效应[1].Sp1蛋白是众多基因的基本转录因子,能与c-met基因启动子区域的多重GC盒结合,是调节肾脏细胞表达c-met的重要转录因子[2].全反式维甲酸(ATRA)能抑制肾脏纤维化,保护肾功能.本研究探讨ATRA对肾小球系膜细胞Sp1、c-met表达的影响,以进一步了解ATRA对肾脏的保护机制.     

半卧位或坐位行颈内静脉留置导管在血液透析中的临床应用

目的:探讨对需行血液透析的特殊病例采用半卧位或坐位行颈内静脉留置导管,并与常规平卧位比较。方法:采用Seld inger技术予385例尿毒症血液透析患者建立临时性颈内静脉血管通路,其中平卧位组315例,半卧位组48例,坐位组22例,比较各组导管一次性穿刺成功率、平均留置时间及并发症等。结果:一次性穿刺成功率平卧位组299/315例(95%),半卧位组44/48例(92%),坐位组19/22例(86%);导管平均留置时间平卧位组70d,半卧位组74d,坐位组78d,三组比较均无统计学差异。置管过程中主要的并发症为误穿动脉(3.6%)、渗血(3.4%)和局部血肿(2.9%)、导管相关感染(6.0%)、导管血流量不足(6.2%)、血栓形成(1.3%)。结论:颈内静脉留置导管可作为血液透析患者理想的临时血管通路,并发症相对较少,保留时间较长,对合并严重心衰、大量胸腔积液、高度肥胖和脊柱畸形等疾病不能平卧的患者也可采用半卧位或坐位行颈内静脉置管,值得临床使用。     

恒磁场对人脐血间充质干细胞增殖及细胞周期的影响

目的:观察不同强度恒磁场辐射对人脐血间充质干细胞增殖水平及细胞周期的影响。方法:实验于2005-08/2005-10在中南大学湘雅医学院组织胚胎学教研室完成。①用密度梯度离心法分离人脐血间充质干细胞。②经贴壁筛选法筛选,对生长良好的第3代人脐血间充质干细胞进行恒磁场辐射(强度分别为0.05,0.1,0.5和1.0mT),连续刺激5d,8h/d。③用四甲基偶氮唑盐法、流式细胞仪法测定细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。结果:①0.05mT组细胞增殖显著高于对照组(0.198±0.011,0.162±0.007,P<0.05);细胞周期静止期/DNA合成前期比例显著降低(66.3±0.1,75.8±0.3,P<0.05);DNA合成期和DNA合成后期/分裂期比例显著增加(14.9±0.3比9.1±0.1,18.8±0.2比15.1±0.1,P<0.05)。②0.1mT组细胞增殖和细胞周期与对照组相比无明显差异。③0.5mT组和1.0mT组细胞增殖均显著低于对照组,细胞周期静止期/DNA合成前期比例显著增加,DNA合成期和DNA合成后期/分裂期比例显著降低(P<0.05)。④各组均未发现DNA倍体异常细胞。结论:恒磁场对人脐血间充质干细胞增殖的影响与磁感应强度有关,0.05mT的磁场促进间充质干细胞的增殖,0.1mT的磁场对间充质干细胞无明显影响,0.5mT和1.0mT的磁场抑制间充质干细胞的增殖。     

小儿狼疮性肾炎88例临床分析

目的探讨小儿狼疮性肾炎（ＬＮ）的临床特点。方法对８８例小儿ＬＮ和２００例成人ＬＮ进行了比较分析。结果小儿组男性比例较高,初发症状以发热、消瘦、乏力、水肿、肺部感染等多见;肾脏受累率两组差异不大,但儿童组受累的严重程度较成人重,且从发病至出现肾脏损害的平均时间较短;小儿贫血、血小板减少较多见,狼疮细胞阳性率高;感染为小儿ＬＮ死亡的主要原因。结论小儿ＬＮ的早期诊治很重要