BMP-7对油酸诱导肾小管上皮细胞转分化的影响

目的观察骨形态发生蛋白（BMP）-7对油酸（OA）诱导的人肾小管上皮细胞转分化的拮抗作用。方法应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株HK-2。分别用不同浓度BMP-7（0、1、5、10、50ng／ml）和一定浓度的OA（400μmol／L）共刺激体外培养的HK-2 48h,收集细胞,采用ELISA法和RT-PCR法检测转化生长因子（TGF）-β1蛋白、mRNA的水平和表达变化,采用RT-PCR法检测α-平滑肌动蛋白（SMA）mRNA的表达变化。结果BMP-7可以显著减少OA诱导的HK-2中TGF-β1和α—SMA mRNA的表达（P〈0．01）。结论BMP-7可以拮抗OA诱导的肾小管上皮细胞转分化。     

蛋白激酶C-ε在尿蛋白所致肾小管上皮细胞损伤中的作用

目的 探讨蛋白激酶Cε(PKC-ε)在尿蛋白所致肾小管上皮细胞(RTECs)损伤中的作用.方法 将体外培养的人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)分为对照组、尿蛋白组(4mg/mL),激动剂组(10μmol/LPKC-ε激动剂+4 mg/mL尿蛋白)及抑制剂组(10μmol/L PKC-ε抑制刹+4 mg/mL尿蛋白)分别处理48h,用Western Blotting法检测PKC-ε活性和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;用ELISA方法检测培养上清人纤维连蛋白(FN)、转化生长因子β (TGF-β)的分泌水平;用全自动生化分析仪检测细胞LDH释放率.结果 尿蛋白明显抑制HK-2细胞PKC-ε的活化(P＜0.01),增加HK-2细胞α-SMA表达(p＜0.05)、上清液FN和TGF-β分泌(P＜0.01)以及LDH释放率(P＜0.01);PKC-ε激动剂减轻尿蛋白所致HK-2细胞培养上清液TGF-β分泌(P＜0.01),而不影响α-SMA表达、FN分泌以及LDH释放率;PKC-ε抑制剂进一步增加尿蛋白所致HK-2细胞α-SMA表达、FN和TGF-β分泌以及LDH释放率(均P＜0.05).结论 PKC-ε高活性是维持RTECs正常形态和功能的基础,尿蛋白抑制RTECs正常PKC-ε高活性,减轻尿蛋白对PKC-ε活性的抑制可能有利于维持RTECs正常的形态和功能.     

选择性Caspase-1抑制剂对BXSB狼疮性肾炎小鼠治疗作用研究

目的研究特异性Caspase-1抑制剂对狼疮性肾炎（LN）的治疗作用及其作用机制.方法应用特异性Caspase-1抑制剂AC-YVAD-CMK处理LN模型BXSB小鼠4周,然后观察此潜在药物对该模型尿蛋白浓度、肾功能和血清自身抗体水平以及肾脏病理形态学的影响,继之检测它对肾脏局部及全身系统Caspase-1活性以及其下游细胞因子IL-18和IFN-γ表达的影响.结果未治疗LN模型血清肌酐（Scr）、血清抗ds-DNA抗体水平以及尿蛋白浓度显著升高（P均＜0.05）;肾小球IgG沉积及肾小球病理损伤程度显著较对照小鼠严重（P均＜0.005）;肾脏及脾脏Caspase-1活性显著升高（P＜0.01）,成熟形式IL-18蛋白表达升高（P＜0.001）,IFN-γmRNA表达显著上调（P＜0.05）;血清IFN-γ水平也显著升高（P＜0.01）.ICE抑制剂处理后Scr、抗ds-DNA抗体水平及尿蛋白浓度显著回降（P＜0.05）;肾小球病理损伤较未处理组显著减轻（P＜0.05）,但肾小球IgG沉积差异无统计学意义（P＞0.05）;肾脏及脾脏Caspase-1活性、成熟IL-18蛋白表达和IFN-γ mRNA表达均有不同程度回降（P均＜0.05）,血清IFN-γ水平也显著回降（P＜0.05）.结论选择性Caspase-1抑制剂对LN肾损伤具有良好的保护作用,抑制Caspase-1活性,进而抑制IL-18等细胞因子的活化和下游因子IFN-γ等的表达是其主要作用机制.     

IL-13抑制人肾小球系膜细胞IL-12的表达

为了探讨白细胞介素 13(IL 13)对体外培养的人肾小球系膜细胞产生白细胞介素 12 (IL 12 )的影响。我们用脂多糖(LPS 10 μg/ml) ,不同浓度的IL 13对系膜细胞培养 ,分别采用ELISA法和半定量RT PCR法检测细胞上清液的IL 12和系膜细胞IL 12p4 0mRNA表达。结果提示 5 %NCSRPMI 16 4 0基础培养条件下的系膜细胞未检测到IL 12蛋白分泌及其mRNA表达。在LPS刺激下系膜细胞的IL 12p4 0mRNA表达加强 ,并分泌出大量的IL 12。IL 13在 1～ 10 0ng/ml浓度范围内对LPS诱导的系膜细胞IL 12分泌及IL 12p4 0mRNA表达的抑制作用呈剂量依赖趋势。本研究认为IL 13可能通过抑制IL 12的产生 ,而调整了体内Th1/Th2细胞因子平衡 ,作为抗炎性细胞因子在肾小球肾炎发病机制中发挥一定作用     

IL-13对肾小球系膜细胞表达ICAM-1的影响

<正> 白细胞介素13(IL-13)是一种多效性Th2细胞因子,与IL-10有部分相似的生物学功能。有报道IL-10能抑制肾小球系膜细胞(MC)表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1),亦有报道IL-13抑制体外培养的MC表达一氧化氮合酶mRNA。IL-13对MC表达ICAM-1的影响未见报道,因此本实验拟观察IL-13对体外培养的MC表达ICAM-1的影响。1 材料与方法1.1 实验材料 雄性SD大鼠,体重120-150 g,2-3月     

尿毒血清对人类肾小管上皮细胞增殖及转分化的影响

目的: 探讨尿毒血清对人近端肾小管上皮细胞株( HK-2)增殖及转分化的影响,以期阐明尿毒症毒素在人肾小管－间质纤维化中的作用。方法: 采用MTT比色法检测尿毒血清对细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测尿毒血清对细胞周期、细胞增殖指数(PI)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞百分率的影响。结果: MTT法示5％-20％浓度尿毒血清组A₄₉₀值均高于正常对照组,流式细胞检测示10％-20％浓度尿毒血清组G₁期细胞均低于正常对照组,PI指数均高于正常对照组,但不同浓度尿毒血清组组间无明显差异;各浓度尿毒血清组α-SMA阳性细胞百分率均高于正常对照组,且随着尿毒血清浓度的增高而增高。结论: 慢性肾衰竭患者体内蓄积的尿毒症毒素可能通过促进肾小管上皮细胞增殖及转分化从而加速肾小管－间质纤维化进程,导致肾功能进行性恶化。     

系膜增生性肾炎患者肾组织白细胞介素-13基因表达及其意义

以往的研究表明 ,致炎细胞因子如白细胞介素 (ＩＬ) 1、肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)等参与系膜增生性肾炎 (ＭｓＰＧＮ)的发病过程。ＩＬ 13是近年发现的一种抗炎细胞因子 ,其主要生物学效应是抑制单核、巨噬细胞产生致炎细胞因子。ＩＬ 13在ＭｓＰＧＮ分子病理机制中的作用迄今国内尚未见报道。我们采用原位杂交技术 (ＩＳＨ)检测ＭｓＰＧＮ患者肾组织内ＩＬ 13ｍＲＮＡ表达量的变化 ,分析ＭｓＰＧＮ患者不同程度系膜增殖及肾小管间质病变的肾组织内ＩＬ 13ｍＲＮＡ表达水平的差异 ,以及其与肾功能、2 4ｈ尿蛋白排泄之间的关系 ,则有助于更深入…     

肿瘤坏死因子-α拮抗剂与肾小球疾病

肿瘤坏死因子 (TNF α)为一种多功能性细胞因子 ,是机体炎症及免疫反应的重要调节因子 ,它在肾小球疾病免疫发病中的作用日益受到重视。因此拮抗TNF α,尤其是肾脏局部的TNF α生物学效应为防治肾小球疾病提供了一个诱人的策略。本文对不同层次拮抗TNF α的方法以及TNF α拮抗剂和肾小球疾病关系的研究作一综述     

血管紧张素受体拮抗剂和血管紧张素转换酶抑制剂与肾脏病关系

血管紧张素 (Angiotensin)及其受体 (AT R)改肾脏损害中的作用以及血管紧张素受体拮抗剂和血管紧张素转换酶抑制剂在肾脏疾病中的保护作用一直倍受人们重视 ,本文就血管紧张素、血管紧张素受体、血管紧张素受体拮抗剂和血管紧张素转换酶抑制剂在肾脏疾病中的作用作一综述     

白细胞介素-18与免疫性肾损伤

白细胞介素 1 8是一种Th1类细胞因子 ,它主要由活化的单核 巨噬细胞产生 ,与白细胞介素 1 β有相似的结构 ,而与白细胞介素 1 2有相似的生物学功能 ,特别是具有极强的诱生γ 干扰素和增强NK细胞的细胞毒能力。可能在感染、肿瘤和自身免疫性疾病等方面起重要作用。作为一种免疫调节因子 ,研究IL 1 8在肾小球疾病中的作用对进一步明确免疫性肾损伤的发病机制和寻找治疗该类疾病的新途径具有潜在的价值