泽库县多禾茂地区鼠疫监测及疫情动态浅析

多禾茂地区海拔高度在3000--4400m之间，气候具多风、湿润、高寒等高原大陆性气候特点。植物生长期短，植被分森林灌丛草甸草原带和高原草甸草原带，适于喜马拉雅旱獭等啮齿类动物栖息。境内有7个自然村，人口7618人，以畜牧业经济为主。经流行病学调查，1883—1980年间发生人间鼠疫5起。1978年8月25日该地区首次从喜马拉雅旱獭体内检出鼠疫菌，判定为鼠疫疫区。我们于2005年6月20日至9月17日在该地区4万hm^2范围内开展了鼠疫监测工作。     

PCR产物靶向克隆法构建pET15b-CAT及His-tag-CAT融合蛋白的表达与纯化

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT,并表达和纯化出His-tag-CAT融合蛋白。方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列。以pZeoSV2(+)-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增。将纯化的人CAT cDNAPCR产物与经XhoⅠ和BamH Ⅰ酶切的线性化载体pET15b以6∶1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT。重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定。pET15b-CAT转化BL21(DE3)宿主菌,用IPTG诱导表达出His-tag-CAT融合蛋白,采用Ni2+-NTA树脂进行亲和层析。结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT。SDS-PAGE和Western blot结果表明,转化了pET15b-CAT的宿主菌表达出了His-tag-CAT融和蛋白,经Ni2+-NTA树脂亲和层析得到了纯化的His-tag-CAT,并在体外检测到其具有特异的过氧化氢酶的活性,活性值为80.23U/g。结论:采用PCR产物靶向克隆法成功地构建了pET15b-CAT,并表达和纯化出了His-tag-CAT融和蛋白,为采用外源性CAT防治与氧化应激损伤相关性疾病奠定了基础。     

湖北某石化社区居民高血压危险因素分析

目的了解湖北某地石化工业区居民高血压患病率及危险因素，为制定干预措施提供科学依据。方法整体随机抽取某地石化社区内3个居委会作为调查点，对每个调查点30岁以上常住居民进行高血压相关调查。结果共有效调查10000人，其中男性4263人，女性5737人。高血压总患病率为26．56％，标化率为25．60％，男性为29．60％，女性为24．30％。多因素非条件Logistic回归分析，男性、吸烟史、肥胖、血糖及血脂异常是当地石化社区居民高血压患病的危险因素。结论当地高血压患病率较高，应针对高血压现况及危险因素采取措施。抓好高血压的经常性宣传教育和不良生活方式的改变，是控制高血压及有关危险因素、遏制心脑血管病增长趋势的工作重点。     

重度妊高征终止妊娠时机及分娩方式探讨

目的:探讨重度妊高征终止妊娠的时机和方式。方法:对70例重度妊高征进行了回顾性研究,分析新生儿的窒息率和死亡率。结果:70例重度妊高征剖宫产率84.29%,新生儿的窒息率27.14%,围生儿死亡率10.00%,≤32周分娩的新生儿窒息率、围生儿死亡率明显升高(p<0.01),33~36周与≥37周无显著性差异(p>0.05)。结论:重度妊高征患者如病情需要,在促胎肺成熟治疗后可于孕32周终止妊娠,妊娠方式首选剖宫产。     

我国卫生人力资源现状及其研究进展

卫生人力资源是卫生资源的重要组成部分,是反映一个地区医疗卫生水平的重要标志,是卫生事业中最具活力、最积极的因素.十余年间,我国卫生人力资源研究取得了显著进步,由启动转向深化,进而为国家与地方制定卫生人力资源政策提供决策依据.近年来,我国卫生人力资源研究由定性研究转向以定量模型研究为主,由宏观渐向微观研究深入,研究主体也趋于多元化.     

PCR产物靶向克隆法构建原核表达载体pET15b-CAT

目的:将人过氧化氢酶(Catalase,CAT)cDNA的PCR扩增产物定向克隆到pET15b载体上以构建重组质粒pET15b-CAT.方法:扩增目的基因的PCR引物的5′端加上与线性化载体同源的碱基序列,以使PCR的扩增产物两端分别带上15个和线性化载体两端同源的碱基序列.以pZeoSV2( )-CAT为模板进行靶向克隆所需的人CAT cDNA扩增.将纯化的人CAT cDNA PCR产物与经XhoⅠ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b以6:1摩尔数之比混合于含重组酶的反应液中,25℃反应30 min,将PCR产物定向克隆于目标载体pET15b上,获得重组质粒pET15b-CAT.重组质粒经PCR,XhoⅠ酶切和DNA测序鉴定.结果:人CAT cDNA的PCR扩增产物与经Xho Ⅰ和BamHⅠ酶切的线性化载体pET15b发生了同源重组反应,经鉴定采用PCR产物靶向克隆法成功构建了pET15b-CAT.结论:PCR产物靶向克隆法是一种简便、高效地将PCR产物定向克隆于目标载体的方法,而无需对PCR产物进行酶切、末端抹平、载体去磷酸化及连接反应,适用于任何载体、任何插入片段和任意酶切位点.     

疝环填充式无张力疝修补术142例临床分析

目的 了解无张力疝修补术的适应症、疗效及复发率。方法 回顾性总结我所进行142例无张力疝修补术及追踪其疗效、复发率。并与同期经典股沟疝修补术进行比较。结果 随访中所有无张力疝修补术的病例无严重手术并发症，未见复发，平均住院7．8d。结论 无张力修补术是安全可行、费用适中、复发率低的微创术式。     

藤黄针剂的一些毒性

本文报告小白鼠腹腔注射藤黄针剂的急性毒性试验:LD_(50)为33mg/Kg(可信限26～40)。亚急性毒性试验:大白鼠每日一次腹腔或皮下注射藤黄针剂2.5、5、10、15mg/Kg,持续一个月,呈现心肌浊肿、肾浊肿、肝细胞变性、腹膜炎或皮下硬结以及肝点状坏死等毒性病变。并对毒性病变的性质进行了讨论。     

丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞生长及p53蛋白表达水平的影响

目的:研究丹参酮Ⅱ A联合顺铂在体外对宫颈癌Hela细胞生长的影响及细胞中p53蛋白表达水平的变化。方法:采用MTT法测定丹参酮Ⅱ A联合顺铂对Hela细胞增殖的影响;HE染色法观察细胞的形态学变化;流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡情况;Western Blot测定p53蛋白水平的表达。结果:丹参酮ⅡA联合顺铂用药组比同等剂量的两药单用组及对照组对Hela细胞的增殖抑制率高(P<0.05);对照组细胞未见凋亡,而两药单用组及联合组均可见细胞凋亡;药物处理组均可检测到细胞亚G1峰,两药联合组细胞亚G1峰与单药组差异显著;在只含溶媒组、丹参酮Ⅱ A组、顺铂组及丹参酮Ⅱ A联合顺铂组中p53蛋白水平表达逐步升高。结论:丹参酮Ⅱ A联合顺铂比两药单用能显著抑制Hela细胞的生长;二者通过增加p53蛋白的表达,促进细胞凋亡。     

细胞穿透肽PEP-1介导增强型绿色荧光蛋白转导入脐静脉内皮细胞

目的研究PEP—1—EGFP融合蛋白穿透人脐静脉内皮细胞的能力。方法用基因工程的方法制备并纯化EGFP蛋白和PEP—1—EGFP融合蛋白，将纯化后的两种蛋白和体外培养的人脐静脉内皮细胞共同孵育，分别观察其进入细胞的能力及PEP—1—EGFP进入细胞的时间依赖性、剂量依赖性和稳定性，并用MTr法检测PEP-1-EGFP融合蛋白对细胞的毒性。结果EGFP蛋白不能进入细胞内。PEP-1-EGFP融合蛋白可在5min内穿透人脐静脉内皮细胞，其穿透人脐静脉内皮细胞的能力呈时间和剂量依赖性，进入细胞后27h仍可观察到微量绿色荧光。PEP-1-EGFP蛋白浓度达200umol／L时对细胞仍无毒性。结论PEP—1能有效携带目的蛋白进入人脐静脉内皮细胞，这为将来用细胞穿透肽PEP-1介导有生物活性的抗氧化物质穿透内皮细胞治疗缺血再灌注损伤奠定了基础。