小鼠生殖泡期卵母细胞体外培养成熟、受精和胚胎发育的研究

为研究性成熟小鼠生殖泡期(GV)卵母细胞的体外成熟,同时比较体外成熟(IVM)和体内成熟组卵子的受精、胚胎发育情况,机械法分离性成熟小鼠卵巢中的GV期卵母细胞及刺激后的成熟卵母细胞,直接培养于[α-MEM+1 mg/ml Fetuin+10％FCS+1.5 IU/ml rHCG±5 ng/mlrEGF]中,16 h后移入f-HTF+10％FCS体外受精4 h,再在M16+10％FCS中培养72 h。记录其成熟、受精和胚胎发育情况,并与体内成熟的卵子比较。结果:GV期卵母细胞在含HCG培养液中成熟率为89.68％,培养液中添加EGF后,卵子成熟率无显著上升,但受精率、卵裂率均有显著提高(P<0.05)。体内成熟卵子的受精率可达62.83％,卵裂率60.18％;IVM组受精率仅48.92％,卵裂率36.69％,明显低于前者(P<0.01)。结论:小鼠GV期卵母细胞可体外培养成熟、受精和胚胎发育。培养液中添加促性腺激素和EGF都促进卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育能力。但IVM组卵母细胞的受精率、卵裂率低于体内成熟组,培养系统仍需改进。     

小鼠窦前卵泡的体外培养

目的 观察性成熟前小鼠的窦前卵泡体外培养的形态学改变,同时评价激素及生长因子等添加物对窦前卵泡体外发育的影响。方法 机械法分离性成熟前小鼠卵巢中的窦前卵泡,分2组培养于20μL培养液滴内。(1)Gn组:α-MEM 10％FCS 100 mU/mL rFSH±ITS(5 μg/mL insulin,5 μg/mL transferrine,5 ng/mLselenium)±10 mU/mL rLH,第12天移入 α-MEM 1.5 U/mL rHCG 5 ng/mL rEGF 10％ FCS。(2)nGn组:α-MEM 10％ FCS。每天换液观察,记录GC增生、窦形成等形态学改变和卵母细胞成熟情况。结果 激素组窦前卵泡增长明显,92.92％存活,28.65％形成窦,培养14d后40.35％排出成熟卵;而无激素组窦前卵泡生长缓慢,生存6d后开始萎缩、变黑,存活率仅10.91％,无窦卵泡形成,仅11.11％排出成熟卵,差异有显著意义(P<0.01)。激素组在添加ITS、LH后,窦前卵泡的窦形成率和排出成熟卵母细胞率均显著上升(P<0.05)。结论 α-MEM可作为窦前卵泡体外培养液,但必须添加rLH/rFSH、ITS、rHCG/rEGF以促进膜细胞黏附、颗粒细胞增生和卵母细胞成熟。     

达英-35对非肥胖、非胰岛素抵抗多囊卵巢综合征胰岛素敏感性的影响

目的探讨达英-35[diane-35,每片含醋酸环丙孕酮(CAP)2 mg和乙炔雌二醇(EE)35 μg]对非肥胖、非胰岛素抵抗(IR)多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素敏感性的影响.方法选取32例非肥胖、非IR的PCOS患者作为研究对象,达英-35治疗3个月,治疗前后测定体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、瘦素(Leptin)和性激素结合球蛋白(SHBG),并进行口服糖耐量试验(OGTT)和胰岛素释放试验,计算游离雄激素指数(FAI)、葡萄糖和胰岛素曲线下面积、空腹血糖/胰岛素之比(GIR)、OGTT各时点的胰岛素/血糖比以及卵巢体积.结果①治疗前后BMI、WHR和FSH无改变,LH、LH/FSH值、FAI和卵巢体积明显下降(P＜0.01),T也较治疗前降低(P＜0.05),SHBG则明显升高(P＜0.01),血Leptin升高(P＜0.05).②治疗前后空腹血糖均在正常范围,葡萄糖曲线下面积(AUC葡萄糖)无改变,治疗后胰岛素曲线下面积(AUC胰岛素)、OGTT各时相的胰岛素/血糖比和胰岛素水平均升高(P＜0.01),GIR则从11.24±2.15 mg·L/dl·mU明显下降为3.77±0.60 mg·L/dl·mU (P＜0.01).结论达英-35在明显改善非肥胖、非IR PCOS高雄激素血症的同时有胰岛素抵抗的迹象,其原因可能与周围组织胰岛素敏感性下降有关.     

5-杂氮-2'-脱氧胞苷调控HOXA10对子宫内膜异位症患者在位内膜容受性的影响

目的:研究甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,AZA)对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜容受性的影响.方法:体外原代培养内异症子宫内膜上皮细胞,AZA作用24 h后,亚硫酸氢盐测序法(Bisulfite Sequencing)检测HOXA10的甲基化水平的变化;实时定量PCR和Western Blot方法检测HOXA的转录和蛋白水平的变化.结果:AZA作用24h后,子宫内膜上皮细胞HOXA10的甲基化水平下降;同时HOXA10的表达增加.结论:AZA可通过抑制内异症子宫内膜上皮细胞中HOXA10的高甲基化,上调HOXA10的表达,从而促进子宫内膜容受性的建立.     

介绍一种保管人参方法

人参是名贵中药之一,若保管不当,则易变异、变质。虽保管的方法较多,但采用冷藏法则需专用的制冷设备和仓库,耗资很大;如用木箱密封保藏,则很难保证夏秋两季不发生虫害,故必须采用熏蒸剂熏蒸才能保证等。而笔者将人参与乙醇同贮却收到满意的效果。其法介绍如下: 备一个能密封的上下一般大的金属箱或其它器皿和一个金属盘(不锈钢)或广口钵,盘的直径应比箱底直径约少1/3,高不超过箱高的1/5,将盘放入箱 1992年第14卷第9期     

关于青春期多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的探讨

目的　探讨青春期多囊卵巢综合征 (PCOS)胰岛素抵抗 (IR)和葡萄糖耐量减低 (IGT)的发生率。方法　选择 2 0 0 3年 2～ 9月复旦大学附属妇产科医院 2 9例 14～ 19岁的青春期PCOS患者 ,测定体重指数 (BMI)、腰臀比 (WHR)、卵巢体积、血清卵泡刺激素 (FSH)、黄体生成激素 (LH)和睾酮 (T) ,并行口服糖耐量试验 (OGTT)和胰岛素释放试验 ,根据空腹血糖 /胰岛素之比 (GIR)将其分为IR组 15例和非IR组 14例。结果　所有研究对象的空腹血糖均正常 ,两组间卵巢体积、LH/FSH比值、T水平无明显差异 (P >0 0 5 ) ,IR组BMI、WHR、曲线下葡萄糖面积 (AUC葡萄糖)和曲线下胰岛素面积 (AUC胰岛素)均高于非IR组 (P <0 0 5 ) ,而非IR组LH水平高于IR组 (P <0 0 5 ) ;IR组IGT患者占 4 0 0 % ,高于非IR组的 7 1% ,相关分析则显示GIR与BMI、WHR、空腹胰岛素水平、AUC葡萄糖 和AUC胰岛素 呈负相关。结论　肥胖和BMI正常者青春期PCOS均存在IR ,表现IR的青春期PCOS患者更易发生IGT ,要重视青春期PCOS患者IR的评估以及IGT的筛选。     

体质量指数对多囊卵巢综合征患者体外授精-胚胎移植结局的影响

目的比较不同体质量指数（BMI）的多囊卵巢综合征（PCOS）患者体外授精-胚胎移植（IVF—ET）的治疗结局。方法87例接受IVF—ET治疗的PCOS患者，根据BMI分4组：A组BMI〈20kg／m^2，B组20～22．9kg／m^2，C组23～24．9kg／m^2，D组≥25kg／m^2。比较各组超排卵周期的基本资料、胚胎实验室数据及妊娠结局。结果D组促性腺激素用量与A组和B组相比均显著增加（P=0．01和P=0．037）。D组有效胚胎数与A、B、C三组相比均显著减少（分别为P=0．006，P=0．020和P=0．033）。各组临床妊娠率、流产率、活产率比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论随着PCOS患者BMI的增大，促性腺激素用量增加；当BMI≥25kg／m^2时，有效胚胎数减少。     

蜡样芽孢杆菌食物中毒的研究进展

蜡样芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种,会引起食物中毒,因此与人类关系密切。本文概述了蜡样芽孢杆菌的病原学特征、致病性及其引起食物中毒的流行病学特征,以提出科学的防控措施来有效控制该菌在食品中的污染,保护公众健康。     

下丘脑性闭经14例分析

下丘脑性闭经(hypothalamic amenorrhea,HA)是最常见的一种闭经形式，约占继发性闭经的48％。其病因复杂，本文即是对14例HA患者的病因和内分泌表现进行分析。     

子宫内膜异位症患者卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子甲基化状态的研究

目的:探讨子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)患者卵巢颗粒细胞中类固醇生成因子-1(steroidogenic factor-1,SF-1)表达下降的可能机制。方法:应用重亚硫酸盐测序法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测EMS患者和正常女性卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子区5'Cp G位点甲基化水平,将测得的序列与原始序列比对,统计甲基化位点、数量并分析EMS组和正常组甲基化程度。结果:BSP片段涵盖SF-1基因转录起始位点附近的13个Cp G位点(从Cp G-84到Cp G+168),EMS组SF-1基因启动子区域的整体甲基化水平显著高于对照组(P0.05),逐个位点的分析显示EMS组Cp G+7、+18、+21、+42、+54、+60、+132以及+146位点相较于对照组呈现高甲基化水平(P0.05);而EMS组Cp G+77、+121和+141位点的高甲基化水平尤为显著(P0.001)。结论:EMS患者卵巢颗粒细胞SF-1基因启动子区5'Cp G位点甲基化水平显著高于对照组,可能是EMS患者卵巢颗粒细胞SF-1 m RNA表达降低的机制。