高糖环境对浅二度烫伤创面VEGF表达及创面血管化的影响

目的 建立糖尿病大鼠浅二度烫伤模型和不同浓度的高葡萄糖体外培养体系,研究高糖环境对促血管化生长因子的表达及创面血管化的影响.方法 ①90只清洁级SD大鼠分为对照组和STZ诱导的速发型糖尿病组,两组同时形成10%体表总面积(TBSA)的浅二度烫伤模型,分别取烫伤后第1、3、7、10、14天创面皮肤组织样本,测定糖含量、FGF-2、血管内皮生长因子(VEGF)表达,检测微血管密度.②人脐带静脉内皮细胞分别在正常环境及30、50 mmol/L葡萄糖中培养7 d, ELISA法检测内皮细胞释放VEGF水平.结果 糖尿病组大鼠烫伤创面组织局部糖含量及VEGF表达均明显高于对照组,而其微血管密度显著低于对照组;体外培养的血管内皮细胞,高糖组释放VEGF水平显著低于正常环境组.结论 在糖尿病浅二度烫伤创面愈合过程中,存在促血管化生长因子高表达与血管内皮细胞低反应性的分离现象.     

基质金属蛋白酶及其组织抑制因子在皮肤增生性瘢痕中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶（MMPs）MMP2、MMP9及其抑制物（TIMPs）TIMP-1在皮肤增生性瘢痕中的作用。方法取3-6个月、6-12个月皮肤增生性瘢痕，以正常皮肤组织为对照，ELISA方法测定其MMP2、MMP9以及TIMP-1的含量，采用SPSS统计软件，以成组设计的单因素方差分析，分析它们在不同时段瘢痕组织中变化的意义。结果（1）3-6月瘢痕组织和6-12月瘢痕组织的MMP2，均较正常皮肤显著增高（110.70±5.23ng／ml VS 54.59±3.01，P〈0.01；77.23±7.10ng／ml VS 54.59±3.01，P〈0.01），而3-6月瘢痕组织的MMP2较6-12月瘢痕组织的MMP2亦有显著增高（110.70±5.23 VS 77．23±7．10，P〈0．01）；3-6月瘢痕组织和6-12月瘢痕组织的MMP9之间（3.85±0.88 VS 3.61±0.43，P〉0.05）以及它们与正常皮肤组织的MMP9相比（3.85±0.88 VS 4.13±0.33，P〉0.05；3.61±0.43 VS 4.13±0.33，P〉0.05）均无显著性差异；（2）3-6月瘢痕组织和6-12月瘢痕组织的TIMP-1与正常皮肤组织相比有显著增高（4．74±0．35 VS 3．01±0．11，P〈0．01；5．12±0．34 VS 3.01±0．11，P〈0．01），6-12月瘢痕组织较3-6月瘢痕组织的TIMP-1有显著增高（5.12±0.34 VS 4.74±0．35，P〈0．05）；（3）3-6月瘢痕组织和6-12月瘢痕组织的MMP2与TIMP-1的比值与正常皮肤组织相比均有显著增高（23．38±1．01 VS 18．15±0．58，P〈0.01；15.10±1.45 VS 18．15±0．58，P〈0．01），3-6月瘢痕组织较6-12月瘢痕组织的MMP2与TIMP-1的比值有显著降低（23.38±1.01 VS 15.10±1.45，P〈0.01）。结论MMPs以及TIMPs参与了皮肤瘢痕的增生过程，MMP2、TIMP-1含量及其比值可作为瘢痕生长和预后的指标。     

大鼠深度烫伤后局部组织中PDGFmRNA表达水平

目的：研究深度烫伤后局部组织中ＰＤＧＦｍＲＮＡ表达水平及其意义。方法：应用α－ ３２ＰｄＡＴＰ标记的ＰＤＧＦ－ ＡＡ和－ ＢＢ的ｃＤＮＡ 探针和斑点杂交测定大鼠深度烫伤后不同时相局部组织中ＰＤＧＦｍＲＮＡ的表达水平。结果：烫伤后组织中ＰＤＧＦ－ ＡＡ和－ ＢＢｍＲＮＡ的表达,较之对照组都有所升高,且在烫伤早期出现高峰,尤其是－ ＢＢｍＲＮＡ表达水平在深度烫伤后期又有持续升高,且绐终高于－ ＡＡｍＲＮＡ的表达水平。结论：ＰＤＧＦ在大鼠深度烫伤后的炎症反应和修复愈合过程中起着一定的作用。     

表皮生长因子受体与糖尿病创面难愈

表皮生长因子受体(EGFR)是一种170-KDa跨膜受体酪氨酸激酶。其配体，如：表皮生长因子(EGF)、转化生长因子—α(TGF—α)，和受体胞外结构域结合可引发受体二聚化和聚集，继而导致受体胞内部分的酪氨酸激酶激活。这种激活的、聚集的受体可使聚集的其他受体磷酸化，产生可供带有SH2结构域的胞内蛋白结合的位点，引发其下游一系列信号转导途径的激活。EGFP是一个多效应的信息传递者，其激活后能促进有丝分裂或诱导细胞凋亡；增加细胞活性、蛋白质分泌；诱导细胞分化或细胞去分化。人类皮肤中对ECF／TGF—α的反应决定于EGFR的数量和位置，井受影响结合力、内吞、受体酪氨酸激酶活性等过程的调节。EGFH在组织中约分布与该组织的生长活性相一致。链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ))诱导的糖尿病(STZ—DM)小鼠肝细胞中高亲和力位点的EGFR完全缺失，低亲和力位点下降到50000。糖尿病患者组织中ECFR的性质发生了改变。受体后自磷酸化程度下降。目前还不清楚这种改变与疾病发生的因果关系。     

糖尿病大鼠皮肤损害及其机制研究

链脲佐菌素诱导的SD糖尿病大鼠4周时皮肤已开始变薄,8周时表皮厚度已明显低于正常大鼠[(0.016_+0.006对0.041±0.007)mm,P<0.01],各时间点G2/M期的表皮细胞比例显著减少.12周时在真皮层中微血管病变常见.与同时间点正常大鼠相比,血浆晚期糖基化终末产物(AGEs)和丙二醛含量明显升高,谷胱甘肽下降(均P<0.01),皮肤糖含量、AGEs水平均显著升高(P<0.01).提示局部高糖和AGEs的蓄积,可能是糖尿病皮肤损害的重要机制.     

一种增生性瘢痕动物模型的建立

目的　建立兔耳瘢痕动物模型 ,观察兔耳腹侧创面在伤后不同时间瘢痕增生的情况。方法　于 32只新西兰白兔的 6 0只兔耳腹面手术切除 2cm× 5cm全层皮肤 ,创面用 1%磺胺嘧啶银冷霜外敷包扎至愈合 ,换药 1次 /周。未作手术的 4只兔耳作对照。 (1)术后连续 12个月观察兔耳创面自然愈合情况。 (2 )用光镜、透射电镜观察兔耳创面瘢痕增生情况。 (3)用计算机图像分析系统测定 1～ 6个月的瘢痕指数。　结果　兔耳创面上皮化后其色泽、厚度和质地均经历从瘢痕形成、成熟到退化的演变过程 ;1～ 2个月的瘢痕指数 2 .2 9± 0 .74较 3～ 4个月 (2 .82± 0 .36 )和 5～ 6个月 (2 .90± 0 .84 )低 (P <0.0 5),其变化与瘢痕增生程度的消长趋势吻合。　结论　兔耳腹面全层皮肤缺损经自然愈合后形成的增生性瘢痕与人体增生性瘢痕相似 ,该模型是研究增生性瘢痕的发生机制及评估其治疗方法的较好的动物模型之一     

精氨酸对烧伤病人T淋巴细胞功能的影响

我们以烧伤病人摄入占总热卡２％的精氨酸为实验组，以占总热卡２％的１４复合氨基酸液摄入为对照组，动态观察了增加精氨酸摄入对改善烧伤后Ｔ淋巴细胞功能的影响。实验结果表明：烧伤病人摄入占总热卡２％的精氨酸后，其外周血淋巴细胞对ＰＨＡ的反应性，ＣＤ４阳性细胞比例，ＣＤ４／ＣＤ８比例，白细胞介素２（ＩＬ－２）水平以及白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒ）的表达均较对照组有明显的提高。提示了精氨酸应该成为烧伤病人营…     

三度烧伤面积≥90％极重度伤员救治经验

目的总结三度烧伤≥90％病人抢救经验。方法选择1966年～2002年烧伤三度面积≥90％的病例，主要采取以及时正确的补液为主的综合方法复苏；中重度吸人性损伤伤员早期行气管切开术，保持气道通畅；积极扶植机体，正确处理创面，合理使用抗生素和必要的消毒隔离制度，防治烧伤感染和脏器并发症；三度创面处理的原则：尽早地清除坏死组织，及时、切实地封闭创面，自体皮和异体（种）皮结合，异体皮开窗嵌皮法和微粒、皮浆移植大张异体（种）皮覆盖术，以及肠内营养摄人和功能恢复治疗。结果48例病人16例救治成功，7例可以生活自理。结论及时正确的复苏是抢救的基础，切实有效的封闭创面是抢救成功的关键。防治感染与脏器并发症贯穿治疗的全过程。     

晚期糖基化终末产物对中性粒细胞生物学行为的影响

目的 观察晚期糖基化终末产物(AGE)对中性粒细胞生物学行为的影响,了解皮肤组织中AGE蓄积与糖尿病愈合中异常炎性反应的关系. 方法 体外分离培养SD大鼠中性粒细胞.在细胞悬液中加入不同的刺激物,根据所加物质分为:对照组,加入RPMI 1640培养液;A组,加入0.315 mg/mL AGE+RPMI 1640;B组,加入0.625 mg/mL AGE+RPMI 1640;C组,加入1.250mg/mL AGE+RPMI 1640.噻唑蓝法检测中性粒细胞活力;反转录-PCR法检测L-选择素mRNA表达;酶联免疫吸附测定法检测中性粒细胞弹性蛋白酶释放量;二氢二氯荧光黄二醋酸盐法检测中性粒细胞内活性氧水平. 结果 A、B、C组中性粒细胞活力(0.320±0.030、0.380±0.020、0.290±0.010)均高于对照组(0.170±0.040,P＜0.05).各实验组L-选择素mRNA表达水平(A组0.95±0.08、B组1.36±0.27、C组0.50±0.26)、弹性蛋白酶释放量(A组1.98±0.43、B组2.50±0.43、C组2.01±0.18)、活性氧水平(A组1.64±0.20、B组2.16±0.26、C组3.26±0.75)也均高于对照组(此3项指标分别为0.36±0.26、0.91±0.21、0.72±0.15,P＜0.05). 结论 AGE能增强中性粒细胞活力,使细胞的多种生物学行为发生改变,这可能是糖尿病异常炎性反应的主要原因之一.     

大鼠浅Ⅱ度烫伤创面表皮生长因子受体的表达

浅Ⅱ度烫伤创面愈合主要涉及表皮角质细胞迁移、增殖和分化。生长因子等多种因素调控着上皮细胞的生物学行为 ,从而完成创面修复 ,其中以表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor ,EGF)尤为重要。EGF是表皮角质细胞的化学性趋化因子和特异性促有丝分裂原 ,必须通过与相应受体———表皮生长因子受体 (EGFR)结合 ,才能在愈合过程中发挥其生物学活性。目前关于创面愈合过程中内源性EGF表达水平及其促愈作用的报道较多 ,但关于内源性EGFR表达水平的研究却鲜见报道。本文采用免疫组化技术和图像分析技术 ,从蛋白质水平上动态观察了浅Ⅱ度烫…