真皮生物模板对成纤维细胞生物学行为的影响

目的　研究真皮生物模板的应用对皮肤组织创伤修复过程中成纤维细胞 (fibroblast,FB)生物学行为的影响 ,探讨其在影响组织修复及减轻瘢痕形成中的作用机制。　方法　 SD大鼠 12 0只 ,在背部造成 2 .5 cm× 2 .5 cm的全层皮肤组织缺损创面 ,随机分为 4个处理组 ,即开放创面组、全厚皮移植组、刃厚皮移植组、复合移植组 (无细胞真皮基质 +刃厚皮移植 ) ,分别于术后 1、2、4、6及 12周取材。通过免疫组织化学及图像分析技术检测组织标本中肌成纤维细胞 (myofibroblast,MFB)的标志蛋白—— α平滑肌肌动蛋白 (α smooth muscle actin,α- SMA)的表达以及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、整合素 α2 、β1 及转化生长因子 β1 (transforming growth factorβ1 ,TGF- β1 ) )的表达量。　结果　复合移植组 α- SMA在术后 1～ 12周低于开放创面组 ,术后 1、4、6周低于刃厚皮移植组 ,术后 2、12周高于全厚皮移植组(P<0 .0 5 ) ;复合移植组 FN在术后 1～ 12周低于开放创面组和刃厚皮移植组 ,术后 1～ 4周高于全厚皮移植组 (P<0 .0 5 ) ;复合移植组整合素 α2 在术后 1～ 12周低于开放创面移植组 ,术后 1～ 4周低于刃厚皮移植组 ,术后 1、2周高于全厚皮移植组 (P<0 .0 5 ) ;复合移植组整合素 β1 在术后 1～ 12周低     

增生性瘢痕中血管内皮细胞的分离和培养

增生性瘢痕形成的机制目前仍未揭示清楚,既往对瘢痕的研究主要集中在成纤维细胞上,而对瘢痕中的另一重要细胞组分--血管内皮细胞的研究,却一直被人忽视.目前认为,血管内皮细胞不仅与微血管内皮的完整性有关,同时还能够分泌大量的细胞因子和激素,如成纤维细胞生长因子（FGF）、转移生长因子（TGF）β1、一氧化氮（NO）、内皮素（ET）1等,参与许多器官和系统的发病.     

糖尿病大鼠深Ⅱ度烫伤创面成纤维细胞生物学行为的改变

目的研究糖尿病深Ⅱ度烫伤对真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响。方法以链脲菌素(STZ)诱导糖尿病的深Ⅱ度10%TBSA烫伤大鼠模型,观察创面愈合情况。流式细胞术检测真皮组织中FB细胞周期;TUNEL法检测FB凋亡;伤后0、3、7、21d检测皮肤组织的羟脯氨酸含量。结果糖尿病大鼠深二度烫伤后愈合延迟,糖尿病组烫伤后进入S期的成纤维细胞数量明显低于正常组(P<0.01,P<0.05),创面凋亡细胞数量高于正常组(P<0.01,P<0.05);烫伤前和烫伤后糖尿病组皮肤组织单位面积羟脯氨酸含量均低于正常大鼠(P<0.01,P<0.05)。结论在糖尿病病理状态下,皮肤损伤后主要的修复细胞FB增殖异常,凋亡增多,胶原含量减少,可能是创面修复延迟的原因之一。     

高糖环境对浅二度烫伤创面VEGF表达及创面血管化的影响

目的建立糖尿病大鼠浅二度烫伤模型和不同浓度的高葡萄糖体外培养体系,研究高糖环境对促血管化生长因子的表达及创面血管化的影响。方法①90只清洁级SD大鼠分为对照组和STZ诱导的速发型糖尿病组,两组同时形成10%体表总面积(TBSA)的浅二度烫伤模型,分别取烫伤后第1、3、7、10、14天创面皮肤组织样本,测定糖含量、FGF-2、血管内皮生长因子(VEGF)表达,检测微血管密度。②人脐带静脉内皮细胞分别在正常环境及30、50mmol/L葡萄糖中培养7d,ELISA法检测内皮细胞释放VEGF水平。结果糖尿病组大鼠烫伤创面组织局部糖含量及VEGF表达均明显高于对照组,而其微血管密度显著低于对照组;体外培养的血管内皮细胞,高糖组释放VEGF水平显著低于正常环境组。结论在糖尿病浅二度烫伤创面愈合过程中,存在促血管化生长因子高表达与血管内皮细胞低反应性的分离现象。     

氨基胍对糖尿病烧伤创面促愈作用的研究

目的　探讨氨基胍对糖尿病烧伤创面修复的影响及其可能的机制。　方法　SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病对照组和氨基胍干预组。后两组通过腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)建立糖尿病模型。STZ注射后 ,干预组予以氨基胍 10 0mg·kg-1·d-1喂养 ,8周后烫伤前为 0时相点 ,三组大鼠给予深Ⅱ度烫伤 ,于伤后 3,7,14 ,2 1d描出创面形状 ,计算创面愈合率 ,观察组织形态学改变 ,并对创面组织糖基化终末产物 (AGEs)含量、糖含量及局部组织释放一氧化氮 (NO)含量进行检测。　结果　与糖尿病对照组比较 ,应用氨基胍后 ,皮肤组织糖含量不降低 ,创面局部炎症反应出现较早 ,坏死组织脱落及上皮匍行提前 ,AGEs含量减少 ,组织释放NO的能力增加 ,创面愈合明显加快。　结论　氨基胍可通过抑制AGEs形成 ,促进NO的合成和释放 ,促进糖尿病烧伤创面愈合。     

糖尿病病程对真皮成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨病程对糖尿病皮肤和真皮成纤维细胞(FB)生物学行为的影响.方法通过制备不同病程糖尿病模型,对皮肤中的组织生化和真皮FB的生物学行为进行检测.结果短程糖尿病皮肤厚度变薄,糖含量升高,且病程至8周有晚期糖基化终末产物(AGEs)蓄积,真皮S期细胞比例升高和单位面积皮肤羟脯氨酸含量减少.高糖和AGE HSA导致真皮FB生长抑制和凋亡,呈剂量依赖性.结论糖尿病皮肤随着病程延长,病理生理异常会不断加重;糖尿病真皮FB的生物学改变与皮肤高糖和AGEs蓄积存在直接关系.     

白细胞对损伤的反应

由操作激活的白细胞所产生的细胞素和其它代谢产物，有利的作用是增强宿主的抵抗力，不利的影响是抑制远位器官的功能和引起“全身性炎症”。     

Dose-effect of dietary L-arginine supplementation on burn wound healing in rats

Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｄｏｓｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｅｔａｒｙＬａｒｇｉｎｉｎｅｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｎｂｕｒｎｗｏｕｎｄｈｅａｌｉｎｇｉｎｒａｔｓＭｅｔｈｏｄｓ　２１８ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙｒａｔｓ（ｗｅｉｇｈｉｎｇ２００－２５０ｇ）ｗｅｒｅｓｕｂｊｅｃｔｅｄｔｏ１０％ｄｅｅｐｐａｒｔｉａｌｔｈｉｃｋｎｅｓｓｓｃａｌｄｂｕｒｎｓａｎｄｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｉｎｔｏｓｉｘｇｒｏｕｐｓＧｒｏｕｐｓＡ,Ｂ,Ｃ,Ｄ,ＥａｎｄＦｒｅｃｅｉｖｅｄ８…     

糖尿病大鼠皮肤的组织化学改变

目的：研究糖尿病(DM)大鼠皮肤的组织化学改变，探讨DM难愈创面形成和发展的病理机制。方法： 用链脲佐菌素（STZ）将SD大鼠诱导成速发型DM大鼠模型，并以正常大鼠作对照，分别于致病后4、8和12周获取大鼠背部中央的皮肤标本。应用HE染色，观察皮肤组织学的改变；应用Beckman’s生化自动分析仪检测皮肤组织匀浆的糖含量；采用F－3010荧光分光光度计测定皮肤胶原提取液的荧光强度；应用免疫组化和图像分析技术检测皮肤组织晚期糖基化终末产物（AGEs）含量。结果： 组织学观察可见，DM大鼠表皮组织变薄，表皮细胞层次欠清晰，部分表皮缺乏复层排列；真皮层部分胶原萎缩、肿胀，退化变性，并伴有程度不等的炎性细胞浸润；皮下脂肪进行性萎缩或消失。皮肤糖含量在各时相点均显著高于正常对照（P<0.01）。皮肤胶原提取液的荧光值亦高于相应年龄正常鼠（P<0.05），并随病程增加。AGEs蛋白主要沉积于真皮基质和细胞中，以及皮肤血管基底膜周围，并随病程的发展，染色逐渐加深，呈片状。结论： DM皮肤在损伤前就已发生明显的组织化学改变，而这些改变可能是由于局部高糖和AGEs累积所引发，并可能是DM难愈创面形成和发展的病理基础之一。     

肌成纤维细胞在皮肤瘢痕形成过程中的作用

目的 探讨表达α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的肌成纤维细胞在皮肤增牛性瘢痕中的作用.方法 免疫组织化学法检测皮肤增牛性瘢痕中α-SMA的表达;通过细胞培养,检测成纤维细胞与肌成纤维细胞羟脯氨酸含量并进行比较;ELISA法分别检测成纤维细胞与肌成纤维细胞Ⅲ型前胶原、纤维连接蛋白、TGF-β1含量并进行比较.结果 正常皮肤组织只有血管平滑肌细胞表达α-SMA,其他真皮细胞几乎不表达,增生性瘢痕皮肤组织中,α-SMA染色阳性细胞大大增加,比例高达96.89%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01);肌成纤维细胞羟脯氨酸含量较正常成纤维细胞显著增高(P<0.01);肌成纤维细胞Ⅲ型前胶原含量较成纤维细胞显著增高(P<0.05);肌成纤维细胞TGF-β1含量较正常成纤维细胞显著增高(P<0.01);肌成纤维细胞纤维连接蛋白含量较成纤维细胞显著增高(P<0.05).结论 肌成纤维细胞是造成增生性瘢痕的最关键细胞.