沉默Toll样受体4基因表达的RNAi慢病毒载体的构建

背景:Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,在由内毒素诱导的炎性反应的信号通路中发挥着重要作用。目的:构建人TLR4基因的RNA干扰慢病毒载体,并观察其对人脐静脉内皮细胞TLR4在蛋白水平的沉默效应。方法:利用Invitrogen在线软件设计人TLR4基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核苷酸后克隆到线性载体pENTRTM/H1/TO的黏性末端,并进行DNA测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组反应,从而获得干扰TLR4基因真核表达的慢病毒载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助复合体和TLR4基因的真核表达慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人脐静脉内皮细胞,检验其干扰TLR4基因表达的有效性。结果与结论:实验成功构建TLR4基因真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8.7×106U/mL。免疫印迹杂交结果表明,所获得的慢病毒感染人脐静脉内皮细胞TLR4基因在蛋白水平的表达显著降低。实验成功构建了人TLR4基因慢病毒RNA干扰表达载体,并验证了其在人脐静脉内皮细胞上的有效性。     

右旋糖酐生产工艺改革试验

本文介绍发酵法右旋糖酐生产中,将分级沉淀物溶液经离子交换(或电渗析),然后直接喷雾干燥,以代替原有的保温、调粉、离心和箱式烘箱干燥等工序.所得产品的质量符合中国药典标准。     

登革热的中医辨治

登革热是由登革病毒引起,经伊蚊传播的急性传染病。20世纪在世界各地曾多次发生过大流行,患病人数多达百万以上。在东南亚呈地方性流行,尤以夏秋两季伊蚊易孳生地区为甚。1978年广州、佛山等地发生流行,随后华南各省有不     

超声心动图对三尖瓣闭锁的诊断

本文分析先天性三尖瓣闭锁(TA)患者的超声心动图表现,其直接特征性表现是在右侧房室连接处看不到三尖瓣叶及其启闭活动,仅见较粗的带状强回声,彩色多普勒血流显像见右房室间无血流通过,M形曲线上于右房右室之间见一增强变厚的回声带,活动幅度很小,舒张期未见分离现象。     

立体定向脑电图引导射频热凝术治疗癫疒间的临床价值

目的探讨立体定向脑电图(SEEG)引导射频热凝术治疗药物难治性癫疒间的临床价值。方法回顾性分析34例药物难治性癫疒间的病例资料。均行SEEG电极植入,脑电监测期间行SEEG引导射频热凝。结果随访1～24个月,平均(7.2±5.8)个月。热凝后发作频率减少50%以上21例(62%),发作频率减少但未达到50%4例,发作频率无变化7例,发作频率稍增多2例。热凝前后发作频率差异有统计学意义(P0.01)。热凝后6 d～12个月,行二期开颅切除致疒间灶23例,未行二期手术11例。结论 SEEG引导射频热凝因其精准性与微侵袭性,对药物难治性癫疒间病人,特别是不适合开颅手术者,可能是一种相对安全有效的治疗方法,具有一定临床应用价值。     

碘伏与苯扎溴铵在人工流产术中的消毒效果比较

摘要 目的 <\b>比较人工流产术前应用200 mg/L碘伏与200 mg/L苯扎溴铵进行阴道灌洗的消毒效果。方法 <\b>将医院产科门诊人流室要求人工流产手术的156例妇女随机分为实验组（200 mg/L碘伏阴道灌洗）和对照组（200 mg/L苯扎溴铵阴道灌洗）各78例,比较术前两组宫颈和穹隆细菌培养结果,术后盆腔炎及外周血象改变。结果 <\b>实验组细菌培养的阴性率明显高于对照组(P<0.05),术后盆腔炎和外周血白细胞升高等指标均明显低于对照组(P<0.05)。 结论 <\b>术前选择200 mg/L碘伏阴道灌洗的消毒效果明显优于200 mg/L苯扎溴铵。     

体外受精治疗非典型21-羟化酶缺乏症患者成功妊娠1例

目的 21-羟化酶缺乏症(21-OHD)、17α-羟化酶缺乏症(17-OHD)为先天性肾上腺皮质增生的2种类型,因酶缺乏程度不同,临床表现不一又分为多种亚型,其中非典型21-OHD与不完全型17-OHD皆症状轻微,临床不易发现,目前此类患者妊娠率较正常者低下,如何鉴别疾病,改善临床预后并提高生育能力是临床诊治及随访的重点。方法对本院生殖中心1例罕见的非典型21-OHD合并人细胞色素P450c17A1(CYP17A1)、卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHCGR)基因多态性病例的诊断、治疗及促排卵的过程进行回顾性分析。结果该患者经基因型检测获得明确诊断,高孕酮血症及时得到治疗,并予以个体化促排卵方案,最终获得良好妊娠结局。结论生殖科临床医生应提高对先天性肾上腺皮质增生的认识,适当利用基因型分析协助诊断,在助孕过程中灵活制定个体化促排卵方案。     

沉默Toll样受体4基因表达的RNAi慢病毒载体的构建

背景：Toll样受体4 (toll-like receptor4,TLR4)是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,在由内毒素诱导的炎性反应的信号通路中发挥着重要作用。 目的：构建人TLR4基因的RNA干扰慢病毒载体,并观察其对人脐静脉内皮细胞TLR4在蛋白水平的沉默效应。 方法：利用Invitrogen在线软件设计人TLR4基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核苷酸后克隆到线性载体pENTRTM/H1/TO的黏性末端,并进行DNA测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组反应,从而获得干扰TLR4基因真核表达的慢病毒载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助复合体和TLR4基因的真核表达慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人脐静脉内皮细胞,检验其干扰TLR4基因表达的有效性。 结果与结论：实验成功构建TLR4基因真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8.7×10⁶ U/mL。免疫印迹杂交结果表明,所获得的慢病毒感染人脐静脉内皮细胞TLR4基因在蛋白水平的表达显著降低。实验成功构建了人TLR4基因慢病毒RNA干扰表达载体,并验证了其在人脐静脉内皮细胞上的有效性。     

口鼻联合进路腺样体微创手术附67例报告

目的探讨口鼻联合进路腺样体微创手术的可行性及优点。方法采用气管插管静脉全身麻醉,在鼻内镜电视显视下经口鼻联合进路切除腺样体。结果所有病例,术后无出血、残留,无咽鼓管损伤等并发症,鼻咽部检查显示结构良好,随访6～24个月,检查无复发,A/N均在正常范围。结论采用本法,手术精细、微创,手术时间短,可同时去除相邻病变,减少复发,提高疗效,方法易行,值得应用。