丙酮酸乙酯对小鼠缺血再灌注肾脏细胞凋亡的影响

目的研究丙酮酸乙酯（EP）对小鼠缺血再灌注（I／R）肾脏组织凋亡相关基因表达及细胞凋亡的影响。方法8周龄雄性BABL／c小鼠52只,随机分为假手术组（n=10）、I／R组（建立I／R模型,n=10）、EP处理组（n=32）;EP处理组再分为EP预处理组（建模前30min给药）和I／R后4、6、12hEP处理组（分别于建模后4、6、12h给药）,每组8只动物。TUNEL染色分析和比较各组凋亡细胞数量的变化;Real—timePCR检测肾脏组织凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspas-3mRNA表达。结果TUNEL染色分析显示,与假手术组比较,I／R组凋亡细胞数量明显增多（P〈0．05）;EP预处理组凋亡细胞数量明显少于I／R组（P〈0．05）。Real-timePCR检测结果显示,与假手术组相比,I／R组Bax和Caspase-3mRNA表达显著升高,Bcl-2mRNA表达明显降低（P〈0．05）;与I／R组比较,EP预处理组和I／R后6hEP处理组的Bcl-2mRNA表达显著升高（P〈0．05）,EP预处理组和I／R后各时间点EP处理组的Bax和Caspase-3mRNA表达明显降低（P〈0．05）。结论EP能有效抑制BABL／c小鼠肾脏I／R过程中的细胞凋亡,可能与其调控肾脏组织凋亡相关基因的表达有关。     

丙酮酸乙酯对肾缺血/再灌注损伤小鼠炎症因子及丝裂素活化蛋白激酶表达的影响

目的 观察丙酮酸乙酯(EP)对小鼠缺血/再灌注(I/R)损伤肾脏的保护作用,研究其对肾组织中炎症因子及丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达的影响. 方法 将50只雄性BABL/c小鼠按随机数字表法分为假手术组(n=8)、模型组(n=10)和EP治疗组(n=32);EP治疗组再分为EP预处理组和EP 4、6、12 h处理组,每组8只,分别于制模前30 min及制模后4、6、12 h腹腔注射EP 40 mg/kg.采用夹闭双肾动脉30 min制备肾I/R损伤模型.于I/R 24 h取肾组织,采用实时聚合酶链反应(PCR)检测白细胞介素(IL-1β、IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测MAPK信号转导通路中细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK)、p38MAPK等的蛋白表达. 结果 实时PCR结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠肾组织IL-1β、IL-6、TNF-α、ICAM-1及HMGB1的mRNA表达均显著增高(IL-1β:12.05±8.08比3.18±1.13;IL-6:10.26±6.85比0.81±0.34;TNF-α:5.83±3.85比0.67±0.34;ICAM-1:3.87±2.02比0.29±0.13;HMGB1:652.82±78.50比112.31±32.50,均P＜0.05);而EP各处理组能显著抑制上述炎症因子的表达,尤其以12 h处理组最为显著,分别为0.45±0.26、 0.66±0.13、 0.21±0.11、 0.05±0.02、 212.26±3.20(均P＜0.05).Western blotting结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠肾组织磷酸化的ERK1/2、JNK、p38MAPK蛋白表达均显著升高(p-ERK1/2:1.13±0.38比0.48±0.34;p-JNK:1.40±0.15比0.36±0.15;p-p38MAPK:0.47±0.15比0.21±0.17,均P＜0.05);与模型组比较,EP各处理组在不同时间点均能显著抑制ERK1/2、JNK、p38MAPK的活化(均P＜0.05). 结论 EP能有效防治小鼠I/R肾脏损伤,可能与其调控炎症相关因子及MAPK信号转导的表达有关.     

连续性静静脉血液滤过治疗的置换液剂量对危重急性肾损伤患者预后的影响

目的探讨连续性静脉静脉血液滤过(continuous veno-venous hemofiltration,CVVHF)治疗中置换液剂量对危重急性肾损伤患者预后的影响。方法所有患者资料均来源于上海市医学发展基金重点研究课题《急性肾衰竭的早期发现与防治》数据库。选取数据库中发生急性肾损伤,并进行CVVHF治疗且置换液量30ml/(kg·h)的患者74例,其中男性48例,女性26例,年龄(55.8±17.7)岁(19～87岁)。将患者分成两组:①CVVHF-A组(37例):置换液剂量为30～40ml/(kg·h);②CVVHF-B组(37例):置换液剂量40ml/(kg·h)。观察两组患者透析前后生命体征及血生化指标的变化,同时在治疗前、治疗第4d和治疗结束后用急性生理学与慢性健康状况评分(acute physiology and chronic health evaluation,APACHE)Ⅱ评估疾病严重性,评估两组患者在30d和60d时的患者生存率和肾存活率,观察不同置换液剂量对急性肾损伤患者预后的影响。结果两组患者的基础情况包括性别、年龄、一周内手术史、慢性肾脏疾病史、糖尿病史和肾功能以及治疗前的血气分析、肾功能、心率、平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、尿量、多器官功能障碍综合征和全身炎症反应综合征发生率、APACHEⅡ评分均相匹配(P0.05)。CVVHF-A组患者的平均置换液量为(33.4±3.3)ml/(kg·h),CVVHF-B组患者的平均置换液剂量为(53.2±8.5)ml/(kg·h),两组相比差异有统计学意义(P0.001)。单次CVVHF治疗后患者的血PH、HCO3-、K+、尿素氮和肌酐均较治疗前显著改善(P0.05),而心率、MAP和Na+在治疗前后差异均无统计学意义(P0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示CVVHF-A组患者30d和60d的生存率分别为48.7%和40.5%;CVVHF-B组患者30d和60d的生存率分别为56.8%和48.6%,Log-Rank检验显示两组生存率差异均无统计学意义(P=0.724)。肾存活与患者存活结果相似。结论在危重急性肾损伤患者中应用CVVHF治疗时,30ml/(kg·h)以上的置换液剂量可以显著纠正代谢性酸中毒,改善肾功能,而对血液动力学影响不大。40ml/(kg·h)以上的置换液剂量与30～40ml/(kg·h)的剂量相比并未显示出更多的优势。     

新型腹膜透析液的临床应用

<正>腹膜透析是终末期肾衰竭(end-stage renaldisease.ESRD)患者肾替代治疗方法之一。传统的腹膜透析液采用葡萄糖作为渗透剂,乳酸盐作为缓冲碱。这种高糖、高渗、低PH值、含葡萄糖降解产物(glucose degradation products,GDPs)的腹膜透析液已经被证实是一种非生物相容性的透析     

血管生成素2与腹膜透析时腹膜血管新生的关系

Objective To investigate the association between angiopoietin-2 (Angpt-2) and peritoneal angiogenesis in a uremic peritoneal dialysis (PD) rat model. Methods Uremic (subtotal nephrectomy) rats were established and divided into non-PD, 10 d-PD, 28 d-PD and 56 d-PD groups. Standard PD solution was applied in the study. Rats undergone sham operation without PD were used as control group. Vessel density of the peritoneum was detected and quantified with anti-CD31 immunohistochemical staining. Expressive levels of Angpt-2 and vascular endothelial growth factor (VEGF) were examined in the peritoneum by real-time PCR and Western blotting. Results The non-PD group was characterized by increased vessel density in the peritoneum compared with that of the control group [(5±3)/HP vs (1±1)/HP]. Progressive angiogenesis was found in 10 d-PD, 28 d-PD and 56 d-PD groups [(10±5)/HP, (17±5)/HP, (19±4)/HP]. Furthermore, expressive levels of Angpt-2 and VEGF increased significantly in the non-PD group compared with the control (P<0.01), and such expressions were significantly higher in the PD groups as compared to non-PD group (P<0.01), but no difference was found among the PD groups. Both VEGF and Angpt-2 levels were positively correlated with vessel density(r=0.7756, P<0.01; r=0.5223, P<0.05). Conclusions Uremia and PD promote peritoneal angiogenesis in rats. Increased expression level of Angpt-2 in peritoneum is positively correlated with peritoneal angiogenesis. Angpt-2 may be a new therapeutic target of peritoneal angiogenesis.     

黄芪对人肾小球系膜细胞CD44mRNA表达的影响

目的：了解黄芪（AM）对小肾小球系膜细胞（HMCs)分泌基质和表达CD44mRNA的影响。方法：应用不同浓度AM或AM血清处理经PDGF-BB刺激的HMCs,分别采用MTT法和ELISA方法检测HMCs增殖和Ⅳ型胶原（Col-Ⅳ）分泌,用RT-PCR法检测AM对HMCs表面CD44mRNA表达的影响。结果：经AM或AM血清处理后,由PDGF-BB诱导的HMCs增殖与未处理对照组相比呈显抑制,并呈剂量依赖效应;HMCs分泌Col-Ⅳ和CD44mRNA表达水平较未处理对照组相比也有显下降,并与剂量呈一定相关。结论 ：AM可抑制HMCs增殖和Ⅳ型胶原蛋白的过度生长成,并且这种作用可能部分是通过降低HMCs表面CD44mRNA的过表面而介导的,本研究结果提示,AM对延缓慢性肾脏疾病向肾硬化进展可能有益。     

慢性肾衰竭患者一体化治疗

各种肾脏疾病 ,不管其病因是什么 ,进展的最终结果将导致慢性肾衰竭。当进入终末期肾衰竭(ｅｎｄｓｔａｇｅｒｅｎａｌｆａｉｌｕｒｅ ,ＥＳＲＦ)时 ,患者的生命将主要依赖肾脏替代治疗。尽管目前透析治疗质量已有了极大的提高 ,但慢性肾衰竭透析患者的患病率和死亡率仍然很高。据美国的一项统计结果显示 ,透析患者的预期寿命仅是相同年龄、性别和种族的美国人群的 16%～ 37%。而高的患病率和病死率又和肾脏替代治疗前对慢性肾功能不全的防治不当有关 ,为此人们提出了慢性肾衰竭一体化治疗 (ｉｎｔｅ ｇｒａｔｅｄｔｈｅｒａｐｙ)的概念 ,包…     

CVVH 和SLED在肝移植术后急性肾衰竭中的疗效

目的 探讨连续性肾脏替代疗法(CRRT)治疗模式静脉血液滤过(CVVH)和持续缓慢低效血液透析(SLED)对肝移植术后发生急性肾衰竭患者的疗效和安全性. 方法 所有患者资料均来源于上海市卫生局<急性肾衰竭的早期发现与防治>研究课题数据库.2004年1月 ～2005年12月,原位经典肝移植术后发生急性肾衰竭并需要进行透析治疗的患者共26例,其中6例行SLED(SLED组),6例行滤过液剂量为35～40 mL·kg-1·h-1的CVVH(CVVH-A组),14例行滤过液剂量为50～60 mL·kg-1·h-1的CVVH(CVVH-B组).观察各组患者透析前后肾、肝功能和血流动力学等指标的变化;于治疗前、治疗第4天和治疗终止后,采用APACHEⅡ评分评估疾病严重性,比较各组患者存活和肾脏存活情况. 结果 单次治疗后各组肾、肝功能等指标明显改善(P<0.05);治疗前后血流动力学指标无显著差异(P>0.05).治疗第4天时各组间APACHE Ⅱ评分的差异无统计学意义(P>0.05);治疗终止后,CVVH-A组与CVVH-B组之间APACHE Ⅱ评分差异有统计学意义(10.8±4.6 vs 20.7±10.4,P=0.025).SLED组、CVVH-A组和CVVH-B组的患者生存率分别为33.3%、66.7%和50.0%;肾脏存活率分别为66.7%、83.3%和50.0%,差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 对肝移植术后发生急性肾衰竭的患者,CRRT 和SLED均为安全且有效的治疗措施. (P>0.05).治疗第4天时各组间APACHE-Ⅱ评分的差异无统计学意义(P>0.05);治疗终止后,CVVH-A组与CVVH-B组之间APACHE Ⅱ评分差异有统计学意义(10.8±4.6 vs 20.7±10.4,P=0. 25).SLED组、CVVH-A组和CVVH-B组的患者生存率分别为33.3%、66.7%和50.0%;肾脏存活率分别为66.7%、83.3%和50.0%,差异均无统计学意义(P>0.05). 结论 对肝移植术后发生急性肾衰竭的患者,CRRT 和SLED均为安全且有效的治疗措施. (P>0.05).治疗第4天时各组间APACHE Ⅱ评分的差异无统计学意义(P>0.05);治疗终止后,CVVH-A组与CVVH-B组之间APACHE Ⅱ评分差异有统计学意义(10.8±4.6 vs 20.7±10.4,P=0. 25)     

Klotho在急性缺血再灌注性肾损伤中的变化及其与凋亡的关系

目的 观察Klotho蛋白在缺血再灌注急性肾损伤中的表达变化,探讨其在肾小管上皮细胞凋亡中的作用。方法 10只BALB/c小鼠随机分为肾脏缺血再灌注组（I/R组, n=5）和假手术组（Sham组, n=5）,采用双侧肾蒂夹闭术建立肾缺血再灌注模型,于造模后24 h留取小鼠的血清及肾组织。应用酶法分别测定血清尿素氮和肌酐,ELISA法检测血清Klotho蛋白水平,TUNEL染色法检测肾脏细胞凋亡水平,Real-Time PCR及Western blotting技术分别检测肾组织Klotho、Bax、Bcl-2和Caspase-3的基因及蛋白表达,应用Pearson直线相关法分析急性肾损伤时小鼠全身及局部的Klotho水平和肾脏凋亡的关系。结果 与Sham组相比,I/R组小鼠术后24 h肾小管上皮细胞明显变性、坏死,肾脏凋亡细胞明显增加,肾组织cleaved Caspase-3蛋白水平、Bax/Bcl-2 mRNA及蛋白表达比值均显著升高。I/R组小鼠血清Klotho蛋白水平较Sham组小鼠显著降低[（669.89±136.51） pg/mL vs. （2 107.92±549.22） pg/mL,P〈0.01],肾组织Klotho mRNA及蛋白表达分别较Sham组下调约9/10 （P〈0.001）及1/5 （P〈0.05）。相关性分析显示肾组织bax/bcl-2 mRNA比值与血清Klotho蛋白及肾组织klotho mRNA均呈显著负相关（r=-0.833,P〈0.01;r=-0.916,P〈0.001）,肾组织Bax/Bcl-2蛋白比值和肾组织Klotho蛋白也呈显著负相关（r=-0.637,P〈0.05）。结论 缺血再灌注急性肾损伤后小鼠全身及肾组织局部Klotho表达均显著下调,Klotho水平的下降可能与凋亡诱导的肾损害密切相关。     

腹膜转运特性明显影响艾考糊精腹透液的超滤量

目的 观察不同腹膜转运特性的患者使用7.5%艾考糊精腹透液长时间留腹后的超滤量。 方法 采用前瞻性、多中心、随机、双盲和平行对照临床研究的亚组分析。连续非卧床腹膜透析（CAPD）患者根据腹透液肌酐与血肌酐比值（D/Pcr）和Twardoski的评判标准,分为高转运、高平均转运、低平均转运和低转运4组。患者分别使用7.5%艾考糊精透析液或2.5%葡萄糖 Dianeal?誖 PD-2、PD-4透析液,疗程4周。比较各组超滤量。 结果 共201例CAPD患者入选,其中艾考糊精组98例,葡萄糖组103例;男96例,女105例;年龄（56.1±13.7）岁（18～81岁）。198例进行了腹膜平衡试验,其中高转运患者24例（12.1%）,高平均转运72例（36.2%）,低平均转运81例（40.7%）,低转运21例（11.0%）。治疗第4周,高转运、高平均转运和低平均转运患者中,艾考糊精组超滤量显著升高,无论与基线值还是与葡萄糖组比较,差异都有统计学意义;而低转运患者中,艾考糊精组超滤量高于葡萄糖组,但差异无统计学意义。相关分析显示,艾考糊精腹透液产生的超滤量与D/Pcr呈正相关（R2 = 0.1681,P < 0.01）,而葡萄糖透析液产生的超滤量与D/Pcr呈负相关（R2 = 0.0949,P < 0.01）。 结论 7.5%艾考糊精腹透液可显著改善CAPD患者的超滤量和腹膜肌酐清除率,尤其在腹膜高转运、高平均转运和低平均转运患者,其作用显著优于葡萄糖腹透液。