高糖和甲基乙二醛对人脐静脉内皮细胞Ang-Tie2信号链表达的影响

目的观察高浓度葡萄糖对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成素2(Ang2)和酪氨酸激酶2受体(Tie2)表达的影响,探讨腹膜透析患者腹膜血管新生的可能机制。方法分别以4.25%葡萄糖(高糖组)、4.25%甘露醇(甘露醇组)和800μmol/L葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MGO)(MGO组)对体外培养的HUVECs进行干预,设立空白对照组。以MTT比色法测定的D(490 nm)比较各组HUVECs干预后12、24、48 h时点的细胞增殖情况;分别采用Real-Time PCR技术、ELISA法和Western blotting法检测各组HUVECs中Ang2和Tie2 mRNA表达、细胞培养上清液中Ang2分泌量及HUVECs中Tie2蛋白的表达。结果高糖组、甘露醇组和MGO组HUVECs干预后12 h时点的D(490 nm)均明显高于空白对照组(P<0.05),干预后24 h时点的D(490 nm)则显著低于空白对照组(P<0.05)。与空白对照组比较,高糖组、甘露醇组和MGO组HUVECs中Ang2mRNA表达均明显上调,高糖组和甘露醇组细胞培养上清液中Ang2分泌量均显著增加(P<0.05),...     

在线尿素清除率监测仪检测透析充分性的准确性

目的 探讨在线尿素清除率监测仪(OCM)监测血液透析患者透析充分性的准确性及其应用价值.方法 19例行规律性血液透析的无尿患者于治疗开始后0.5、1、2、3、4 h分别留取部分收集法(PDC)及全部收集法(TDC)透析液样本,测定尿素氮,检验PDC方法 的精确性并计算直接定量法获得的尿素清除指数(Kt/V,DDQ Kt/V).于透析开始前、透析结束即刻及透析结束后30 min时采血测定尿素氮并通过DaugirdasⅡ公式计算单室Kt/V(Sp Kt/V),采用更接近双室水平的速率公式、平衡公式计算Ra Kt/V、Eq Kt/V,使用费森尤斯公司OCM模块监测Kt/V(OCM Kt/V).比较不同方法 得到的Kt/V水平及其相关性,比较OCM内置Watson公式、Hume-Weyers公式、体重推导公式计算患者尿素分布容积(Vurea)与直接定量法计算获得的Vurea之间的差异.结果 PDC法收集的透析废液的尿素氮水平为(5.15±1.85)mmol/L,与TDC法[(5.37±1.90)mmol/L]的差异无统计学意义(P=0.534).Pearson相关检验显示,PDC与TDC两种方法 测定的尿素氮浓度呈正相关(r=0.955,P＜0.05).Bland-Altman检验显示,PDC与TDC两种方法 获得的透析废液标本中尿素氮水平具有非常好的一致性.DDQ Kt/V值为1.34±0.26,OCM Kt/V值为1.24±0.24,SpKt/V值为1.58±0.27,Ra Kt/V值为1.39±0.24,Eq Kt/V值为1.41±0.27.Sp Kt/V值显著高于DDQ Kt/V值、OCM Kt/V值、Ra Kt/V值、Eq VKt/V值(P值均＜0.05),而OCM Kt/V值、Ra Kt/V值、Eq Kt/V值与DDQ K1/V值的差异均无统计学意义(P值均＞0.05).Pearson相关分析显示,OCM Kt/V值与DDQ Kt/V值、Sp Kt/V值、Ra Kt/V值、Eq Kt/V值呈正相关(P值均＜0.05),r值分别为O.706、0.594、0.605、0.731,OCM Kt/V值与DDQ Kt/V值、Eq Kt/V值、Ra Kt/V值之间的相关性均高于OCM Kt/V值与Sp Kt/V值;Sp Kt/V值、Ra Kt/V值、Eq Kt/V值与DDQ Kt/V值呈正相关(P值均＜0.05),r值分别为0.901、0.891、0.963,均优于OCM Kt/V值与DDQ Kt/V值之间的相关性值.通过Watson公式、Hume-Weyers公式及体重推算公式计算获得的Vurea分别为(34.10±4.25)、(35.93±4.28)、(33.79±6.93)L,均显著高于DDQ方法 获得的Vurea[(28.23±9.27)L,P值均＜0.05].结论 OCM Kt/V与患者实际获得的透析剂量相似且存在良好的相关性,可能作为患者实际获得的透析剂量的一种较可靠的测量方法,且可以实时监测,应进一步推广与验证.     

挤压综合征伴急性肾功能衰竭和脓毒血症救治成功一例报道

挤压伤综合征是指四肢或躯干的肌肉丰富部位受到长时间挤压后,出现缺血、缺氧、变性、坏死等一系列病理改变,并由此引发以急性肾脏损伤(acute kidney injury,AKI)为特点的临床症候群,死亡率极高.     

细胞凋亡的分子机制研究进展

１概述 七十年代初,病理学家 Ｋｅｒｒ等［１］发现病理性坏死与生理性细胞死亡在形态学上完全不同,并首先将后者命名为： Ａｐｏｔｏｓｉｓ即凋亡。细胞凋亡在维持多细胞有机体发育、保持免疫稳定、防止器官硬化、抗病御病毒入侵、防止细胞癌变等方面有重要作用。 随着对细胞凋亡作用和细胞抗凋亡能力［２］。当抗凋亡能力下降时,在适当的外界因子作用下,细胞发生凋亡。由于各种不同外界刺激因子所引起的细胞凋亡在形态学上有相似或相同改变,所以人们推测是否在各种刺激因子凋亡信号传递途径的下游存在共同通路。目前［３］认为细胞凋…     

血管生成素2与腹膜透析时腹膜血管新生的关系

Objective To investigate the association between angiopoietin-2 (Angpt-2) and peritoneal angiogenesis in a uremic peritoneal dialysis (PD) rat model. Methods Uremic (subtotal nephrectomy) rats were established and divided into non-PD, 10 d-PD, 28 d-PD and 56 d-PD groups. Standard PD solution was applied in the study. Rats undergone sham operation without PD were used as control group. Vessel density of the peritoneum was detected and quantified with anti-CD31 immunohistochemical staining. Expressive levels of Angpt-2 and vascular endothelial growth factor (VEGF) were examined in the peritoneum by real-time PCR and Western blotting. Results The non-PD group was characterized by increased vessel density in the peritoneum compared with that of the control group [(5±3)/HP vs (1±1)/HP]. Progressive angiogenesis was found in 10 d-PD, 28 d-PD and 56 d-PD groups [(10±5)/HP, (17±5)/HP, (19±4)/HP]. Furthermore, expressive levels of Angpt-2 and VEGF increased significantly in the non-PD group compared with the control (P<0.01), and such expressions were significantly higher in the PD groups as compared to non-PD group (P<0.01), but no difference was found among the PD groups. Both VEGF and Angpt-2 levels were positively correlated with vessel density(r=0.7756, P<0.01; r=0.5223, P<0.05). Conclusions Uremia and PD promote peritoneal angiogenesis in rats. Increased expression level of Angpt-2 in peritoneum is positively correlated with peritoneal angiogenesis. Angpt-2 may be a new therapeutic target of peritoneal angiogenesis.     

肾脏功能减退与肾血管病变的相关性研究

目的探讨肾脏功能减退与肾血管病变的关系。方法回顾性分析132例肾活检患者的临床资料。以MDRD简化公式评估肾小球滤过率(GFR),并将患者分为四组,A组:对照组;B组:血压正常,GFR>90mL/min;C组:血压正常,GFR30～90mL/min;D组:高血压,GFR30～90mL/min。将四组患者的肾活检组织进行光镜、电镜和免疫荧光检查,观察肾血管病变情况。结果与A组相比,B组患者血管病变无明显增加(6.7%vs.11.1%);C组血管病变程度(34.3%)较B组明显加重(P<0.05);D组血管病变程度在各组中最为严重(45.0%),但与C组比较无显著差异(P>0.05))。结论随着肾小球滤过率的下降,即使无高血压的存在,血管病变也逐渐增加。肾脏血管病变可一定程度上反映患者肾脏功能减退的情况。     

骨形态蛋白2 siRNA靶向抑制对体外培养人脐动脉平滑肌细胞成骨样分化及钙化的影响

目的研究骨形态蛋白2（BMP2）小分子干扰RNA（siRNA）靶向抑制对人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）由白介素6（IL-6）诱导刺激的成骨样分化和细胞层钙化的影响。方法以体外培养的原代HUASMC作为实验对象。建立RNA干扰（RNAi）实验平台,通过FAM标记阴性对照siRNA优化转染条件;将BMP2基因的4条候选siRNA分别转染原代HUASMC,Real-TimePCR检测BMP2mRNA表达,筛选有效抑制siRNA。将复苏的原代HUASMC分为siRNA转染组（转染有效抑制siRNA）和模拟转染组（对照组,不转染siRNA）,两组均加入重组人IL-6（rhIL-6）（10ng/mL）刺激孵育,Real-TimePCR检测刺激孵育12、48h时点成骨样转化相关基因BMP2、骨特异性碱性磷酸酶（BAP）、骨钙素（OC）和骨桥蛋白（OPN）mRNA表达。将复苏的原代HUASMC分为siRNA转染组、对照组和空白组（不予rhIL-6刺激孵育,其余处理与对照组相同）,siRNA转染组和对照组均加入rhIL-6（50ng/mL）刺激孵育,甲氧-酚酞络合酮法检测rhIL-6刺激孵育前及孵育后2、4d时点各组HUASMC细胞层钙盐含量,以总蛋白含量校正。结果成功建立合适的RNAi实验平台。10ng/mLrhIL-6刺激孵育后12h时点,siRNA转染组HUASMC BMP2和BAPmRNA表达明显低于对照组（P〈0.05）;刺激孵育后48h时点,siRNA转染组OC和OPNmRNA表达显著低于对照组（P〈0.05）。加入50ng/mLrhIL-6刺激孵育前,siRNA转染组、对照组和空白组HUASMC细胞层钙盐含量比较差异无统计学意义（P〉0.05）;在siRNA转染组,50ng/mLrhIL-6刺激孵育后2、4d时点的细胞层钙盐含量均明显低于对照组（P〈0.05）,刺激孵育后2d时点的细胞层钙盐含量明显高于空白组（P〈0.05）。结论体外培养的原代HUASMC能够实现BMP2基因的siRNA靶向抑制,能显著抑制由IL-6诱导刺激的成骨样分化和钙化。     

进展性IgA肾病患者血清IL-18水平及来氟米特对其的影响

目的：观察进展性IgAN患者的血清白细胞介素-18（IL-18）水平,及来氟米特（LEF）治疗前后对其的影响。方法：将进展性IgAN患者随机分为来氟米特（LEF）组和激素组,使用酶联免疫吸附法（ELISA）检测其治疗前后的血清IL-18水平。结果：共36例患者完成为期12个月的随访,来氟米特联合激素治疗后可使蛋白尿水平显著降低,肾功能维持稳定。患者治疗前血清IL-18水平较对照组显著升高[（360.3±25.2）vs（51.2±8.9）ng/L,P〈0.01],治疗显效者其水平显著降低。Logistic回归显示治疗前血清IL-18水平是预测进展性IgAN患者疗效的独立危险因素（β=-0.582,P=0.001）。结论：来氟米特可作为进展性IgA肾病的有效治疗方案,治疗前IL-18可能成为IgAN发病预测、疗效预判的一个无创指标。     

蛋白尿发生机制的研究进展

肾小球的滤过膜是肾小球选择性滤过功能的结构基础,在保持体内的水、电解质和酸碱平衡中发挥重要的作用.滤过膜从内向外由肾小球内皮细胞(EC)、基膜(GBM)和脏层上皮细胞(足细胞)三层结构组成.这三层物质构成肾小球滤过的机械和电荷屏障,使相对分子质量较大或相对分子质量虽较小但带有负电荷的物质(如白蛋白)不能滤出至肾小囊,使滤过膜具有分子和电荷的选择性.一旦肾小球滤过膜结构受损,蛋白等大分子物质将透过滤过膜,形成蛋白尿.滤过膜结构的损伤破坏是各种以蛋白尿为主要表现的肾小球疾病的共同机制.因此,研究滤过膜的生理功能与损伤机制,对更深地了解肾脏疾病的发生、发展及判断预后尤为重要.滤过膜的三层物质是共同发挥作用的,任何一部分损伤都会导致滤过屏障的完整性受到破坏,产生蛋白尿.本文将探讨足细胞和内皮细胞在蛋白尿形成中的作用.