比格犬ERβ1293 基因真核载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达和定位

目的 观察比格犬Myc 标签ERβ₁₂₉₃重组真核表达载体在HEK293T细胞中的表达及定位。方法 以pEGFP-N1-ERβ₁₂₉₃重组真核表达载体为模板,PCR保真酶扩增得到ERβ₁₂₉₃基因编码区全长。Myc标签ERβ₁₂₉₃重组真核载体瞬时转染HEK293T细胞,运用蛋白质印迹技术（Western blotting）和间接免疫荧光技术（indirect immunofluorescence, IF）鉴定pcDNA3.1-Myc-ERβ₁₂₉₃在HEK293T细胞中的表达和定位情况。结果 成功构建pcDNA3.1-Myc-ERβ₁₂₉₃重组真核表达载体,转染至HEK293T细胞中。Western blotting检测有蛋白条带表达,共聚焦显微镜下观察IF处理后的转染细胞,荧光定位于细胞质。结论 前期实验得到比格犬ERβ剪切异构体ERβ₁₂₉₃编码区序列,缺失第四外显子,导致其与配体结合能力减弱或消失,因此目的基因编码蛋白定位在细胞中发生变化。     

鼻咽癌转移相关分子标志物的研究进展

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）是我国南方常见的恶性肿瘤之一,病理类型绝大多数为非角化型癌,恶性程度高,具有强大的侵袭转移力。肿瘤转移的研究已经深入到分子水平,发现NPC转移相关分子标志物对于揭示NPC转移机制以及改善NPC预后具有十分重要的作用。本文对EB病毒相关基因、VEGF—C、肿瘤转移抑制基因nm-23、肿瘤转移促进基因Tiam-1、基质金属蛋白酶MMP、细胞相关黏附蛋白等与鼻咽癌转移的关系作一综述。     

不同入路经皮椎体后凸成形术的体外力学研究

目的比较不同入路经皮椎体后凸成形术(PKP)对伤椎复位效果及恢复其力学性能的差异。方法选择成年男性防腐脊柱标本的T7至L4节段, 将单体椎体标本随机分为单侧弯角入路组(A组)、单侧经椎弓根入路组(B组)、单侧斜行入路组(C组)、双侧经椎弓根入路组(D组)(n=10)。测量椎体前、后缘高度, 测算并比较椎体容积。在生物力学机上建立骨质疏松性椎体压缩骨折(OVCF)模型后测量椎体前、后缘高度, 并分别对4组标本完成不同入路PKP。对椎体进行Micro-CT检查, 测量术后椎体前、后缘高度。记录椎体原始强度、原始刚度, 造模后刚度, 术后强度, 术后穿刺侧、对侧及总体刚度。比较各组在椎体内骨水泥灌注量, 前、后缘高度恢复, 强度、刚度变化的差异。结果 4组椎体容积比较差异无统计学意义(P>0.05);D组骨水泥灌注量显著多于其他3组, 差异均有统计学意义(P<0.05)。椎体前、后缘高度恢复、原始强度、原始刚度、造模后刚度、术后总体刚度4组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);4组术后强度与原始强度比较差异均无统计学意义(P>0.05);4组术后穿刺侧刚度及A、D...     

“互联网+”延续护理在髋关节置换术后功能康复及抗凝药口服依从性的应用效果

目的:研究“互联网+”延续护理对人工髋关节置换术(HA)后功能康复及抗凝药口服依从性的影响。方法:随访研究2017年4月至2019年4月在舟山市中医院实施HA患者62例,根据出院后护理模式分成对照组32例(常规家庭护理)和干预组30例(“互联网+”延续护理)。分别采用Harris评分、Barthel指数比较两组患者髋关节功能及日常生活质量。根据服药是否按时、连续,比较两组患者抗凝药口服依从性。结果:出院后3个月,干预组患者Harris评分优良率为90.00%,明显高于对照组的71.88%(P=0.021);Barthel指数为(88.34±9.10)分,显著高于对照组的(74.14±7.73)分(P=0.008)。干预组抗凝药口服依从性明显高于对照组,且深静脉血栓发生率仅为3.3%。结论:“互联网+”延续护理能够提升HA术后抗凝药口服依从性,改善髋关节功能,从根本上提高患者的生活质量。     

脱氧胞苷激酶调控电离辐射诱导三阴性乳腺癌细胞铁死亡

目的探索脱氧胞苷激酶(dCK)在放射诱导三阴性乳腺癌(TNBC)铁死亡中的调控作用。方法用人乳腺癌细胞株MDA-MB-231构建dCK基因沉默和不同磷酸化表型的细胞模型, 并给予铁死亡诱导剂Erastin和/或铁死亡抑制剂Fer-1联合或不联合X线放射处理。通过MTT法检测细胞活性, 活性氧荧光探针(DCFH-DA)检测活性氧水平, 通过蛋白质印迹法(Western blot)检测dCK、转铁蛋白、转铁蛋白受体(TfR1)、铁转运蛋白(FPN)、铁蛋白重链1(FTH1)的蛋白表达量。采用SPSS 17.0和Origin 2021软件对数据进行分析。计量资料符合正态分布, 以xˉ±s表示。两组之间的比较使用Studentt检验进行, 而三组及以上的比较使用单向方差分析。结果在MDA-MB-231细胞中, 放射诱导细胞死亡, 铁死亡诱导剂Erastin显著促进放射诱导的细胞死亡, 铁死亡抑制剂Fer-1能够逆转放射诱导的细胞死亡。与对照细胞相比, dCK基因沉默细胞的放射诱导的细胞死亡增加, 活性氧水平降低, Erastin联合放射诱导的细胞死亡减少, 活性氧水平减弱, Fer-1可使放射...     

组织工程化韧带及其材料的研究进展

现有人工韧带产品的重建方案在临床应用中已相对成熟,为防止韧带重建术后的腱-骨愈合困难、骨隧道扩大、滑膜炎性反应、感染、外固定松动等术后并发症的出现,利用组织工程技术构建肌腱组织成为今后可能的发展方向。本文综述组织工程化肌腱的构建及其支架材料的进展,探讨其中亟待解决的问题与未来的发展方向。     

COX-2表达下调抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖并促进凋亡

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)表达对大肠癌细胞HT-29细胞的细胞活力、增殖和凋亡等生物学行为的影响。方法利用脂质体将siRNA COX-2及空载体转入HT-29大肠癌细胞中,并设立对照组。48 h后,real-time PCR法检测COX-2、Bcl-2、Bax和基质金属蛋白酶2(MMP2)mRNA表达;Western blot检测COX-2及p-AKT表达;CCK-8法检测细胞活力;Annexin V/PI流式双染检测细胞凋亡;流式细胞计量术检测细胞周期;划痕实验及Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力。结果与对照组及空载体组比较,COX-2抑制组COX-2蛋白及mRNA表达量显著降低(P0.01);细胞活力下降(P0.01);细胞凋亡率提高,细胞周期阻滞于G期,细胞迁移及侵袭能力降低(P0.01);Bcl-2及MMP2 mRNA表达下调(P0.01);Bax mRNA表达上调(P0.01);p-AKT蛋白表达下调(P0.01)。结论 COX-2表达量下调后能显著的抑制细胞增殖、迁移与侵袭,并诱导细胞凋亡,可能与下调p-AKT有关。