miRNA通过Mcl-1基因调控HBV阳性肝癌细胞对索拉菲尼的敏感性

目的： 探讨干预 HBV 阳性肝癌细胞相关 miRNAs 对肝癌细胞索拉菲尼敏感性的影响。 方法： qPCR 检测 HepG2.2.15 （HBV阳性）和HepG2.vc （HBV阴性）肝癌细胞中miR-29、miR-101和miR-193b的表达,以HepG2.2.15细胞中低表达 的miRNA合成相应的miRNA mimics,并将目标miRNA mimics分别转染至HepG2.2.15和HepG2.vc细胞;qPCR检测两种细胞中 目标miRNA表达,Western blotting检测目标miRNA mimics转染前后Mcl-1蛋白表达。同时分别向转染和非转染的HepG2.2.15 和HepG2.vc细胞中分别加入（1×10 -9 ）~（1×10 -3 ）mol/L的索拉菲尼,72 h后测定索加菲尼对细胞作用的IC 50 值和细胞凋亡率。 结 果： 与HepG2.vc细胞比较,HepG2.2.15细胞中miR-193b的表达显著降低（P<0.05）;与miR-193b mimics转染前比较,HepG2.2.15 和HepG2.vc细胞中miR-193b的表达均有显著升高（P<0.05）。与HepG2.vc细胞比较,HepG2.2.15细胞中Mcl-1蛋白表达显著增 高（P<0.05）;miR-193b mimics转染后,HepG2.2.15和HepG2.vc细胞中Mcl-1蛋白表达较两者转染前均有显著降低（P<0.05）; miR-193b mimics 转染后,索拉菲尼可显著增加两组细胞的凋亡率（P<0.01）,同时其对两组细胞作用的 IC 50 值显著降低 [HepG2.2.15细胞： （0.215±0.028）vs (0.391±0.025) mol/L,HepG2.vc细胞： （0.315±0.027）vs (0.654±0.019) mol/L;均P<0.01]。 结 论： HBV相关肝癌细胞中miR-193b的低表达可能是癌细胞对索拉菲尼敏感性降低的原因,Mcl-1可能为miR-193b的靶点,miR- 193b mimics与索拉菲尼具有显著协同作用。     

盐酸小檗碱对小鼠重症急性胰腺炎的作用机制

目的研究盐酸小檗碱(BH)对小鼠重症急性胰腺炎的影响,并探讨其潜在的机制。方法使用雨蛙肽和脂多糖诱导小鼠重症急性胰腺炎。造模后按体质量随机分为模型组、氯高铁血红素组(50mg·kg~(-1)·d~(-1),灌胃)、BH组(50mg·kg~(-1)·d~(-1),灌胃),另设正常对照组,每组各10只。连续给药7d后,测定各组小鼠胰腺重量指数。ELISA法测定血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血红素加氧酶~(-1)(HO~(-1))、白细胞介素~(-1)0(IL~(-1)0)、淀粉酶和脂肪酶含量,同时测定胰腺HO~(-1)、CO、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)表达水平;对胰腺病理组织进行评分;RT-qPCR检测胰腺TNF-α、IL-6、IL~(-1)0和HO~(-1) mRNA表达水平;Western blot检测胰腺HO~(-1)、IκB-α、核因子κB(NF-κB)p65、Lamin B蛋白表达水平;免疫组织化学检测胰腺NF-κB p65表达水平。结果与模型组比较,BH组小鼠胰腺重量指数明显降低(P0.05);血清IL-6、TNF-α、淀粉酶和脂肪酶含量显著降低(P0.01),HO~(-1)和IL~(-1)0含量显著升高(P0.01);胰腺HO~(-1)、CO和SOD含量显著升高(P0.01),MDA和MPO含量显著降低(P0.01);胰腺病理形态评分显著降低(P0.01);胰腺TNF-α和IL-6mRNA表达显著降低(P0.01),IL~(-1)0和HO~(-1)mRNA表达显著升高(P0.01);HO~(-1)和IκB-α蛋白表达显著升高(P0.01),NF-κB p65蛋白表达显著降低(P0.01),NF-κB p65阳性细胞率显著降低(P0.01)。结论 BH可通过激活HO~(-1)活性介导小鼠胰腺炎性损伤和氧化应激损伤,其机制可能与抑制NF-κB活性有关。     

一期显微外科修复在前臂及手部神经损伤中的应用及对感觉功能的影响研究

目的 探究分析一期显微外科修复与常规修复术在前臂及手部神经损伤上的治疗效果及对患者感觉功能的影响情况.方法 选取近期我院收治的前臂及手部神经损伤患者70例,随机分组,对照组患者行常规修复治疗,观察组行一期显微外科修复,对比分析两组患者的治疗效果.结果 观察组患者的感觉功能恢复情况显著优于对照组,且观察组患者的满意度情况也显著优于对照组(P<0.05).结论 一期显微外科修复能显著提高患者的感觉功能情况和满意度情况,是前臂及手部神经损伤治疗的重要方法.     

黄芪多糖治疗免疫性肝损伤作用机理研究

目的 研究黄芪多糖对肝损伤的保护作用,初步探讨其作用机制,为开发其新的临床适应证提供药理学依据.方法 雄性昆明种小鼠40只随机分为正常对照组、模型组、黄芪多糖组、阳性组,各组小鼠以相同给药体积灌胃给予药物或纯净水,每天1次,连续7d.末次给药后1h,对照组尾静脉注射生理盐水,其余各组尾静脉注射LPS+D-GlaN,造模后禁食不禁水16h后断颈处死小鼠.剖取肝脏,分别测定肝脏组织INOS、NO和ICAM-1含量,观察比较肝脏组织病理形态,以及肝脏组织P65蛋白免疫组织化学表达.结果 与模型组比较,给药组小鼠肝脏组织INOS、NO及ICAM-1含量均有极显著减少(P＜0.01)；显微镜下肝脏细胞嗜酸性变性、坏死,出血等病变显著降低(P＜0.05),肝脏组织P65蛋白荧光OD值极显著减小(P＜0.01).结论 黄芪多糖对小鼠免疫性肝损伤具有显著保护作用,其作用机制可能与降低肝脏组织P65蛋白的合成,减少细胞INOS、NO、ICAM-1的形成有关.     

前列地尔联合α-硫辛酸治疗糖尿病周围神经病变的临床研究

目的探讨前列地尔与α-硫辛酸联合使用治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的疗效与作用机制,为临床应用提供科学的依据。方法选择DPN患者50例,随机分为治疗组和对照组,两组均给予常规控制血糖治疗,对照组给予甲钴胺治疗,治疗组则给予前列地尔联合α-硫辛酸治疗,共14d,记录两组治疗前后的临床症状评估,下肢神经传导速度(NCV)、振动感觉阈值(VPT),并检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果经过14d治疗,前列地尔联合a-硫辛酸组不仅临床疗效优于对照组,且NCV明显增加,VPT也明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);与对照组比较,治疗组hs-CRP和MDA水平明显降低,SOD活性明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论前列地尔与α-硫辛酸联合使用可明显改善DPN患者治疗效果,增加NCV,降低VPT,其机制可能是通过提高抗氧化能力,减轻炎性反应而实现。     

一例患腹泻症藏酋猴继发感染病例病理学观察

目的 为探明患腹泻症藏酋猴继发感染病例的致病机理.方法 对一例曾有反复腹泻病史的8岁龄藏酋猴进行病理学研究.结果 临床症状上,该猴处于严重脱水状态;大体解剖上,该猴的肺部和小肠均出现严重眼观病变;组织病理学上,该猴的肝脏、肾脏组织均出现颗粒变性和空泡变性,多组织器官性的血管发生淤血、充血,管壁间质发生水肿;胰腺、膀胱和脑部组织均未见异常组织病变.结论 猕猴的腹泻具有病因复杂和季节性发生的特点,治疗应坚持中草药治疗为主,西药治疗为辅的原则.     

VEGF受体结合抑制肽的筛选及其特性鉴定

目的　筛选能抑制VEGF与血管内皮细胞表面受体结合的VEGF模拟短肽 ,探讨小分子短肽作为血管内皮细胞生长抑制剂、肿瘤疫苗的可行性。方法　以抗 VEGF单克隆抗体分别对噬菌体随机 7肽、12肽库进行筛选。通过硝酸纤维膜斑点印迹法进行阳性克隆鉴定。用噬菌体克隆免疫小鼠检验这种短肽可否模拟VEGF的抗原决定簇诱发机体产生能与VEGF结合的抗体 ,研究小鼠抗血清、噬菌体表达的 7肽和 12肽以及人工合成 7肽对人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)生长的抑制作用。结果　对肽库进行 3轮筛选后 ,噬菌体克隆具有良好的富集效果。硝酸纤维膜斑点印迹法证实阳性率达到 10 0 % ,测序结果显示噬菌体上的短肽有共同序列 :GWYYDAL、VASAVFYSALVE。这两种噬菌体短肽免疫小鼠能激发产生高效价的抗 VEGF抗体。噬菌体表达的 7肽和 12肽对HUVEC的生长有明显的抑制作用。由短肽GWYYDAL阳性克隆免疫的抗血清对VEGF诱导的内皮细胞生长起抑制作用 ,人工合成的 7肽 (GWYYDAL)呈剂量依赖性阻拮VEGF促HUVEC增殖作用。结论　从噬菌体肽库中筛选到的噬菌体短肽GWYYDAL、VASAVFYSALVE模拟了VEGF的抗原表位 ,为研究VEGF受体结合抑制肽和设计肿瘤疫苗奠定了实验基础。     

Herbert螺钉固定联合以桡动脉返支的骨瓣植骨治疗陈旧性手舟骨骨折的疗效观察

目的探讨Herbert螺钉固定联合以桡动脉返支的骨瓣植骨治疗陈旧性手舟骨骨折的临床疗效。方法选取2005年6月²013年6月在我院骨科治疗的64例陈旧性手舟骨骨折患者作为研究对象,随机分为对照组(采用克氏针固定+带桡动脉返支的骨瓣植骨方法)和试验组(Herbert螺钉固定+带桡动脉返支的骨瓣植骨方法)各32例,通过随访半年,比较两组患者的骨折愈合时间及腕关节功能恢复情况。结果试验组患者骨折愈合率较对照组高,差异具有统计学意义(P<0.05);试验组腕关节功能恢复的优良率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Herbert螺钉固定联合以桡动脉返支的骨瓣植骨治疗陈旧性手舟骨骨折疗效显著,提高了骨折愈合率,加快了患者腕关节功能的恢复,值得临床推广应用。     

迪康凝胶和康惠尔清创胶治疗大鼠烫伤创面效果研究

目的 研究迪康凝胶和康惠尔清创胶对大鼠烫伤创面的治疗效果。方法 将SD大鼠随机分为模型组、康惠尔清创胶组和迪康凝胶组,均造背部深Ⅱ度烫伤。两药物组连续治疗21天,每天1次,模型组自然愈合。考察创面皮肤的愈合效果,检测皮肤组织IL-8、TNF-α、胶原Ⅰ型、Ⅲ型及血清EGF含量以及组织IL-8、TNF-α表达水平。结果 迪康凝胶可有效修复损伤组织,促进真皮生长,促进创面愈合;较模型组,可明显降低创面皮肤组织TNF-α和IL-8（P<0.05,P<0.01）,提高Ⅰ、Ⅲ型胶原含量（P<0.05,P<0.01）,明显提升血清EGF （P<0.05）;各组TNF-α和IL-8的mRNA表达水平均与其组织含量水平基本一致。迪康凝胶和康惠尔清创胶相比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 迪康凝胶能有效促进大鼠皮肤烫伤创面的愈合。