白细胞介素-18与糖尿病及其并发症的关系

近年来的研究表明,白细胞介素-18(IL-18)作为一种前炎症细胞因子,通过促发炎症因子生成,导致Th1/Th2细胞因子失平衡及胰岛β细胞凋亡而与糖尿病的发生、发展相联系,并且通过多种机制影响糖尿病的大血管病变和微血管病变(主要为糖尿病肾病和糖尿病视网膜病)的发生.同时,IL-18的基因多态性也是糖尿病研究领域中一个倍受关注的焦点.     

乙型肝炎病毒转染及脂多糖刺激对HepG2细胞Toll样受体2和4表达的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)转染对HepG2细胞表面Toll样受体(TLR)表达的影响及脂多糖(LPS)加重HBV转染致肝细胞损伤是否存在直接作用,进一步探讨乙型肝炎发病及重型化的发生机制。方法以不同浓度的LPS刺激HepG2细胞、HepG2．2．15细胞(转染HBV全基因组的HepG2细胞),并以免疫细胞化学方法检测HepG2细胞及HepG2．2．15细胞表面TLR 2、4蛋白质表达情况,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR2、4 mRNA表达情况,用Abbot试剂检测HepG2．2．15细胞HgsAg和HgeAg表达情况,用流式细胞仪观察细胞生长周期及细胞凋亡情况。结果HepG2、HepG2．2．15细胞膜上均有TLR2、4蛋白质表达,免疫细胞化学染色在未加LPS及各浓度LPS刺激细胞均可见细胞膜有棕褐色着色,且随着LPS浓度增加,其着色强度增加;对0mg/L及10mg/L LPS诱导HepG2、HepG2．2．15细胞RNA进行RT-PCR扩增,其产物行10g/L琼脂糖凝胶电泳均可见特异性条带,且10mg/L LPS诱导细胞TLR2和TLR4与分子量标准品的吸光度值比值明显高于0mg/L LPS诱导细胞扩增产物,分别为306．63±6．18对519．84±9．15和700．54±13．56对1116．62±37．67,F值分别为740．58和426．07,P值分别为0．01和0．02;流式细胞仪检测细胞周期发现HepG2绌胞及未经LPS诱导的HepG2．2．15未发生凋亡,各浓度LPS诱导的HepG2．2．15细胞均有细胞凋亡发生,且细胞凋亡率随着LPS浓度增加上升。结论LPS可能通过其与肝细胞膜上的TLR结合,而参与HBV转染后肝细胞损害及肝脏炎症重型化的发病机制。     

符合中国三类标准的心脏死亡器官捐赠四例经验总结

目的 总结符合“中国心脏死亡器官捐献分类标准”中国三类(C-Ⅲ)标准的器官捐赠及移植的经验.方法 2011-2012年间,符合C-Ⅲ标准的心脏死亡器官捐赠(DCD)者4例,在手术室进行可控性心跳及呼吸终止后,进行了器官捐赠.获取器官的热缺血时间为7～15 min.结果 除1例捐赠的肝脏进行快速病理学检查外,其他器官均质地良好.捐赠器官用于肝移植3例,肾移植8例,手术顺利,仅1例受者出现移植肾功能恢复延迟,受者均未发生排斥反应和外科并发症.出院后,移植物功能良好.结论 使用符合C-Ⅲ标准的捐赠器官可获得满意的移植效果.     

输注脾细胞建立输血相关的移植物抗宿主模型

目的探讨输注同种脾细胞建立小鼠输血相关的移植物抗宿主(TA-GVHD)模型及其特点。方法分离C57BL/6(H-2b)脾细胞,分别经静脉输注给Balb/c(H-2d)裸鼠与F1代(C57BL/6×Balb/c H-2b/d),建立输血相关的移植物抗宿主模型。活体染料羧基荧光素乙酰乙酸(5,6-carboxyfluorescein diacetate succini midyl ester,CFSE)标记供者脾细胞,通过流式细胞仪分析供者细胞在受者体内的增殖;免疫组化分析供者脾细胞survivin的表达;检测Balb/c裸鼠体内抗供者抗体及IL-10浓度;分析皮肤、小肠、肝脏的病理变化。结果输注同种脾细胞成功建立急性TA-GVHD模型。受者脾脏及外周可以检测到标记后增殖的供者细胞。小鼠的病理改变主要出现在肝脏,浸润细胞早期表达survivin。小肠及皮肤未见明显的病理改变。TA-GVHD裸鼠第7天IL-10、抗-Balb/c显著升高。结论输注同种脾细胞可以建立TA-GVHD模型,并具有简单、快速、稳定的特性,为诊断、治疗GVHD提供了良好的模型。     

脑卒中后癫(癎)86例分析

目的:探讨脑卒中后癫癎的发生率、发病机制及临床特点。方法:对1052例脑卒中患者的临床资料进行回顾性分析。结果:本组患者脑卒中后继发性癫癎的发生率为8.17%。卒中后癫癎的发作类型以单纯部分性发作多见(55.81%)。蛛网膜下腔出血最易合并继发性癫癎(19.35%)。本组患者中病灶位于皮层者继发性癫癎的发生率为12.18%,皮层下病灶者继发性癫癎的发生率为1.62%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:脑卒中是中老年人癫癎的常见病因。癫癎的发生率与卒中部位密切相关。     

Adefovir抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的在体外细胞培养研究中,观察Adefovir抗HBV的作用.方法以乙型肝炎病毒(HBV)DNA转染的细胞株2.2.15细胞为靶细胞,给药后通过检测细胞培养液中HBsAg、HBeAg和HBV DNA,对Adefovir抗HBV效果进行评价.在2.2.15细胞培养基中分别加入不同浓度的药物,培养数天后检测上清液中HBsAg和HBeAg滴度,细胞DNA抽提液检测HBV DNA;用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析法检测药物对细胞的毒性.结果 Adefovir加入细胞培养12d,最大无毒浓度为20μg/ml,对HBsAg抑制率为52.44%,对HBeAg抑制率为54.87%,对HBV DNA抑制率为45.68%,并有剂量依赖效应.结论 Adefovir在体外细胞培养的实验中有抗HBV病毒作用.     

miR-199a-5p通过靶向TGF-β2参与调节肝纤维化进程

目的：探讨miR-199a-5p在肝硬化发生中的作用机制。方法：通过设计合成miR-199a-5p mimics和miR-199a-5p inhibitor序列,对miR-199a-5p进行过表达和抑制研究,利用CCK8、5EdU、Western blotting等方法检测过表达miR-199a-5p对Lx-2细胞增殖活性的影响。以Lx-2细胞cDNA为模板,分别利用TGF-β2 3′UTR的野生型引物序列与miR-199a-5p潜在结合位点突变引物序列进行PCR扩增,获得野生型TGF-β2 3′UTR序列和突变型TGF-β2 3′UTR序列,并通过双荧光报告基因实验揭示TGF-β表达的调控过程。结果：体外实验结果显示,Lx-2细胞转染miR-199a-5p mimics后8、12、24 h,细胞活性均较对照组增加(P<0.05～P<0.01),α-SMA蛋白表达水平较对照组提高(P<0.05);Lx-2细胞转染miR-199a-5p inhibitor后8、12、24 h,细胞活性均较对照组降低(P<0.05～P<0.01),α-SMA表达水平亦较对照组...     

针刺对糖尿病抑郁模型大鼠血清CORT昼夜节律及SCN内Per1、Per2基因表达的影响

目的:观察针刺对糖尿病抑郁模型大鼠血清CORT昼夜节律及SCN内Per1、Per2基因表达的影响,探讨针刺治疗糖尿病抑郁的生物学机制。方法:将36只SD大鼠随机分为空白组(12只)、模型组(12只)和针刺组(12只)3组。模型组和针刺组运用腹腔注射链脲佐菌素+慢性应激法建立糖尿病抑郁复合模型。针刺组于造模后每日取穴"后三里"(双)、"三阴交"(双)、"百会"针刺,每次留针20 min,每日1次,连续针刺7 d。空白组和模型组相同方法抓取固定,不予处理。针刺结束后检测各组血糖、旷场实验行为学变化、血清CORT昼夜节律及SCN内Per1、Per2基因的表达水平。结果:模型组血糖较空白组显著升高(P0.05),而针刺组大鼠血糖较模型组显著下降(P0.05);模型组水平跨格数和直立次数较空白组显著减少(P0.05),针刺组大鼠水平跨格数和直立次数较模型组显著增加(P0.05);模型组大鼠CORT较空白组显著升高(P0.05)且近似昼夜节律消失(P0.05);针刺组CORT较模型组显著降低(P0.05),CORT昼夜节律恢复;模型组大鼠Per2基因表达较空白组显著升高(P0.05),而针刺组针刺治疗后Per2基因表达显著下调,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:针刺对糖尿病抑郁模型大鼠血糖、抑郁情绪及CORT昼夜节律具有调节作用,其作用机制可能是通过下调糖尿病抑郁大鼠SCN内Per2基因表达,从而降低对正性过程的反馈抑制而实现。     

抗IL-2受体γ链抗体抑制T细胞表达survivin的研究

目的 探讨体外封闭IL-27链抑制T细胞表达survivin的机制。方法 分离Balb／C、C57BL／6小鼠脾细胞进行双向混合淋巴细胞培养（MLR）及conA刺激试验。通过免疫细胞化学染色方法检测survivin表达及其规律。不同天数内加入抗γ公共链抗体,流式细胞术检测细胞凋亡（PEcy5-CD3,FTTE—Annexin-V）、细胞周期（PI）及CD25、survivin表达。结果 同种抗原及ConA刺激后脾细胞可检测到survivin、CD25表达。活化淋巴细胞表达survivin,加抗γ公共链抗体后,不能检测到survivin的表达,而CD3^＋ Annexin-V^＋细胞数增加,M期细胞数下降,凋亡细胞（前G1期）增加;但在MLR后第1～2天,抗γ公共链抗体加入并不能使凋亡细胞增加。结论 抗IL-2γ链抗体可诱导活化的T细胞凋亡,间接抑制活化的T细胞的survivin表达。     

Banff移植病理学诊断标准与移植病理学

1Banff移植病理学会议的起源及其简要历程Banff移植病理学会议(Banff Conference on Allograft Pathology,简称“Banff会议”)创立于1991年,截止至2021年,已经走过了30年的历程^([1-5])。Banff会议及其移植病理学诊断标准的建立和不断更新,是国际移植病理学发展中的里程碑,不仅极大地提高了器官移植术后并发症的诊断及其治疗水平,而且也形成了一个新的学科即移植病理学。