成骨细胞异种移植的免疫观察

目的 探讨异种成骨细胞移植及组织工程骨构建的可能性。方法 用二步酶消化—组织块联合接种法行SD大鼠骨细胞原代培养，传代后用碱性磷酸酶(ALP)染色法进行细胞鉴定；再将28只大耳白兔分为3组：自体移植组(A组)、异种移植组(B组)、正常对照组(C组)，分别于腹直肌袋内注入自体软骨细胞悬液、SD大鼠成骨细胞及生理盐水，于1、2、4及8周行免疫学及组织形态学检测。结果 细胞原代接种后5天成单层，经鉴定为成骨细胞；实验兔各组移植后受体无明显全身及局部排异反应；B组移植后2、4周检测到特异性抗体，2周检测到细胞介导的细胞毒反应，4周达高峰，8周开始减退，HE染色见大量炎性细胞浸润，至8周无明显异位成骨现象。A、C两组移植后末见明显体液及细胞免疫反应。结论 单纯异种成骨细胞不能作为细胞移植及组织工程骨构建的可靠细胞来源。     

腹腔镜下肾血管平滑肌脂肪瘤单纯剜除术

目的探讨后腹腔镜肾血管平滑肌脂肪瘤单纯剜除术的手术方法及临床疗效。方法2005年6月～2006年12月,采用后腹腔镜途径对11例肾血管平滑肌脂肪瘤行单纯剜除术。术中沿瘤体边缘外用电钩或超声刀切开肾包膜,肿瘤突出部分沿边缘整块取出,深部剩余部分富脂瘤体组织由吸引器吸出,再以小方纱擦拭瘤窝表面,双极电凝止血。生物蛋白胶、止血纱布及可吸收线缝合肾脏创面。结果11例手术均成功完成,无中转开放者。平均手术时间84.5min(60～110min),平均术中出血量51ml(20～100ml),平均术后住院时间8.8d(6～14d),无并发症。术后肾功能正常。随访7～23个月(平均13.4月),影像学检查无局部肿瘤组织残留或复发。结论后腹腔镜肾血管平滑肌脂肪瘤单纯剜除术具有创伤小、出血少、恢复快、住院时间短等优点。     

大鼠bFGF基因荧光定量PCR检测方法的建立

目的 建立用荧光定量PCR方法检测大鼠bFGF基因mRNA水平.方法 以Trizol-步法提取新鲜骨组织总RNA,以Oligo(dt)18为引物逆转录产生eDNA并进行扩增,以T-A克隆法将纯化的目的片断与PGEM.T Easy载体连接成重组质粒并转化E.coli DH5a.采用碱裂解法提取重组质粒,经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量,并以靶基因和内参GAPDH mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标.结果 由PGEM.T Easv.bFGF所构建的标准曲线线性关系良好(反应体系中含1×102-1×107拷贝大鼠bFGF基因分子时,扩增反应Ct值与拷贝数的对数成线性关系)、灵敏度高、特异性强、准确可靠.批内和批间重复性测定的变异系数分别为1.03%～4.59%以及2.24%～6.46%.结论 成功建立了用实时荧光定量PCR检测大鼠bFGF基因表达量的方法.     

老年性骨质疏松患者股骨近端骨质量的改变

目的:骨质疏松主要表现为骨质含量减少,钙量减少,骨质量定量评估为骨质疏松的治疗提供了客观依据,为此探讨老年性骨质疏松股骨近端骨质量的改变。方法:调查于2002-08/2004-03在广东省第二人民医院完成,采用骨密度测量仪(NorlandXR36,USA)对40例老年测试者股骨近端骨质量进行测量,同时进行血清钙和磷含量的检测。结果:股骨颈的骨密度值为(0.735±0.118)g/cm2,股骨转子的骨密度值为(0.584±0.121)g/cm2,血清钙值为(2.7±0.6)mmol/L,血清磷值为(0.99±0.40)mmol/L。结论:老年人股骨近端骨密度明显降低,易并发股骨颈或股骨转子间骨折。骨密度测量为骨质疏松提供定量评估依据,并为预防股骨近端骨折并发症的发生提供理论基础。     

股骨转子间骨折手术方式与术后早期康复干预对患肢功能恢复的影响

目的：探讨股骨转子间骨折的手术方式及术后早期康复干预对患肢功能恢复的作用。方法：对36例股骨转子间骨折病例中的2l例行Richard钉板内固定，15例行解剖型钢板内固定，术后进行康复治疗，包括持续被动运动(CPM)、主动抗引力运动、关节屈伸运动及关节抗阻力运动。过渡性部分负重行走，直至完全负重行走。结果：36例患者随访6个月～5年，患髋关节屈伸范围为伸至180&;#176;，屈至60&;#176;，骨折全部愈合，5例行走轻度跛行，Richard钉板固定组2例股骨头缺血性坏死。结论：股骨转子间骨折内固定术后行早期康复干预，可减轻肌肉萎缩及关节挛缩，有利于患肢关节功能恢复。     

临床免疫学与免疫检验课程设计性实验教学的探索与实践

以“酶联免疫吸附试验检测乙肝表面抗原方法的建立”设计性实验的实施过程为例对临床免疫学与免疫检验课程设计性实验教学中的选题、实施、总结及教学方法进行了探索与实践,进一步阐明了设计性实验对学生实践能力、观察能力、分析能力、解决问题能力、创新能力培养的重要作用。     

单纯心理应激小鼠模型的建立及对行为、内分泌免疫功能的影响

目的 建立Balb/c小鼠单纯心理应激模型及其评价体系,观察单纯心理应激对机体内分泌免疫功能的影响.方法 采用旁观电击实验建立心理应激模型,20只Balb/c小鼠随机分为正常对照组10只和心理应激组10只,另外准备10只小鼠仅接受足部电击,作为应激源,不进入实验处理.记录并分析正常对照组和心理应激组小鼠行为学指标,检测血清皮质酮水平,血清IL-2、IL-4含量,评价Balb/c小鼠单纯心理应激模型.结果 心理应激组小鼠旷场试验指标、血清IL-2水平较对照组有显著降低(P＜0.05);血清皮质酮、IL-4水平较对照组有显著增高(P＜0.05).结论单纯心理应激小鼠模型建立成功,该心理应激模型能激活下丘脑-垂体-肾上腺轴,抑制小鼠的细胞免疫功能.     

白藜芦醇对离心运动后骨骼肌微损伤的修复

背景：白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂和自由基廓清剂,具有清除自由基、减轻脂质过氧化等重要药理作用,目前有关白藜芦醇在减轻骨骼肌损伤、促进损伤修复方面的研究尚不多见。 目的：观察白藜芦醇对离心运动后骨骼肌超微结构损伤、血清丙二醛和肌细胞浆Ca2+浓度的影响。 设计、时间及地点：对照观察动物实验,于2007-08/2008-06在南方医科大学完成。 材料：成年雄性SD大鼠72只,实验室适应性喂养3 d后随机分为蒸馏水组(n=40)、白藜芦醇组(n=32)。白藜芦醇制剂购自湖南省洪江华光生物有限公司。 方法：白藜芦醇组大鼠每日腹腔注射1次白藜芦醇制剂60 mg/kg,蒸馏水组大鼠腹腔注射等量蒸馏水,连续2周。2周后,将大鼠在动物跑台上进行一次性下坡跑运动,速度为16 m/min,下坡坡度为16°,5 min运动,2 min休息,总运动时间为120 min。运动过程中采用人工驱赶和声刺激,不使用电刺激。 主要观察指标：于运动前、运动后即刻、运动后24,48,72 h电镜下观察比目鱼肌纤维Z线,TAB法测定血清丙二醛和流式细胞仪检测肌细胞浆Ca2+浓度。 结果：与蒸馏水组比较,白藜芦醇组镜下肌纤维损伤程度减轻,骨骼肌细胞Z线异常百分率在运动后即刻、运动后24,48,72 h比蒸馏水组分别降低了50.34%,52.67%,52.65%和53.26%(P < 0.05),离心运动引起的血清丙二醛升高程度分别下降了27.7%,29.56%,34.38%和27.79%(P < 0.05),胞浆Ca2+浓度分别降低了27.53%,25.84%,22.14%和11.62% (P < 0.05)。 结论：白藜芦醇可降低离心运动后血清丙二醛浓度和肌细胞浆Ca2+浓度,减轻运动导致的肌肉损伤。     

包皮环切术的临床应用探讨（附1000例报告）

目的:总结包皮环切术围手术期处理的临床经验.方法:回顾性分析2005年2月～2008年3月实施的包皮环切术1 000例临床资料.结果:包皮过长870例,793例Ⅰ/甲愈合;包茎130例,8例病理检查发现阴茎癌.结论:阴茎背神经阻滞麻醉效果确切,"一钳环切法"手术时间短,外形美观,电凝结合缝扎止血效果好;包茎患者以暴露尿道外口为主要修复原则.     

细粒棘球蚴抗原B对小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化作用

目的探讨细粒棘球蚴抗原B (AgB)对巨噬细胞极化的调控作用。方法将RAW264.7巨噬细胞培养24 h后,分为M1、 M2、 AgB、 AgB+M1、 AgB+M2和空白对照组（M0组）,每组3孔。待所有巨噬细胞贴壁3 h后,AgB、 AgB+M1、 AgB+M2组均加入羊源细粒棘球蚴囊液提取的天然AgB （终浓度为1 000 ng/ml）,刺激1 h后,M1组和AgB+M1组加入脂多糖（LPS,终浓度为100 ng/ml）和γ干扰素（IFN-γ,终浓度为20 ng/ml）刺激分化20 h;M2组和AgB+M2组加入白细胞介素4 (IL-4)、IL-13 （终浓度均为20 ng/ml）刺激分化20 h;空白对照组不更换培养液,同步培养20 h。显微镜下观察巨噬细胞形态。提取各组巨噬细胞总RNA, RT-PCR检测刺激后巨噬细胞表面标志物精氨酸酶1 (Arg-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)的mRNA相对转录水平;蛋白质免疫印迹（Western blotting）分析巨噬细胞蛋白Arg-1、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的相对表达量;ELISA检测刺激后巨噬细胞培养上清中IL-10...