糖尿病大鼠肾小球转化生长因子β1和血管内皮生长因子的表达

目的：观察糖尿病大鼠肾小球转化生长因子β1（TGF—β1）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的动态变化，探讨其与细胞外基质沉积以及肾损害之间的关系。方法：雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组（A组），糖尿病1周组（B组），糖尿病4周组（C组），糖尿病8周组（D组）。用链脲菌素复制糖尿病模型；免疫组织化学法检测TGF—β1、VEGF和纤维连接蛋白（FN）在肾小球的表达情况；HE和PAS染色，光镜观察动物肾组织形态；生化法测定血糖、血肌酐及尿蛋白。结果：正常肾小球内可见少量VEGF表达，而未见TGF—β1表达。糖尿病1周肾小球内可见TGF—β1表达，而VEGF表达无明显增加；糖尿病4周组和糖尿病8周组肾小球内TGF—β1和VEGF表达显著增多，且两者呈正相关，而且糖尿病4周组肾小球内TGF—β1及VEGF的表达与24h尿蛋白量之间呈正相关。糖尿病4周组和糖尿病8周组肾小球内FN的表达显著高于正常对照组。结论：大鼠糖尿病状态诱导肾小球内TGF—β1和VEGF表达增加，可能在糖尿病肾病大鼠高滤过、蛋白尿和肾小球肥大以及纤维化发病中起作用。     

两套插管法静吸复合麻醉用于气管切除术1例

我院于1989年9月15日在静吸复合麻醉下,采用二套插管法顺利地为1例患者进行了气管内肿瘤及部分气管切除术。现将麻醉处理总结如下:患者,男,58岁,体重80.5kg。气管内声门下7cm处有1cm大小肿瘤。术前有轻度呼吸困难,咳嗽带血。一般情况尚可。肺部检查正常。心电图报告“低电压”。手术前用药:杜冷丁75mg,非那根25mg,安定10mg,阿托品0.5mg。为防止插管时刺破肿瘤,我们采用二套插管法。即首先用第一套管清醒经     

吸痰前有效拍背对慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人吸痰效果观察

COPD病人41例,随机分为两组,对照组直接吸痰,实验组先拍背后吸痰。通过卡方检验结果显示,吸痰前予以有效拍背与未拍背直接吸痰效果比较有显著差异(P<0.05)。因此,对于COPD病人吸痰前应予以有效拍背。     

星状神经节阻滞治疗头疼68例

近年来,以星状神经节阻滞为主,综合治疗头疼68例,报告如下。1 治疗方法 对主诉头疼,头、颈部无器质性病变,无严重心血管疾患者,先用XLI-晶体管血流图仪作双侧颈及(或)椎动脉血流图检查,异常者在该     

锂与缺碘性甲状腺肿发病关系的实验研究

流行病学调查和动物实验证明,锂是一种致甲状腺肿物质,并注意到某些地方性甲状腺肿的地理分布与锂的地理分布相吻合,而且在同样缺碘情况下,甲状腺肿的发病率与人群血清锂水平呈正相关。为了阐明锂对缺碘性甲状腺肿的发生及其在甲状腺组织病理演变中的作用,我们进行本实验研究。     

羊膜上皮细胞胶原海绵复合体的构建及其细胞特性变化

目的:构建羊膜上皮细胞(AECs)胶原海绵复合体,并研究其细胞生长及特性.方法:将大鼠AECs接种于胶原海绵支架中,一般贴壁培养细胞作对照,用CM-Dil及Hoechest33342标记细胞膜和细胞核、HE染色、扫描电镜等观察细胞的生长和形态,CCK-8法检测细胞活力,免疫细胞化学、实时荧光定量PCR检测细胞表型.结果:与一般贴壁培养AECs相比,AECs在胶原海绵中粘附生长良好,增殖能力强,直径变小,细胞表型变化不明显,仅Nestin mRNA表达上调.结论:胶原海绵支架与AECs生物相容性良好,能维持细胞原特性并促进其生长和增殖.     

WNT4及其抑制因子SFRP1在糖尿病肾病大鼠肾组织中的表达

目的观察WNT4/β-catenin信号通路及其抑制因子分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)在糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织中的表达变化,探讨其在肾脏纤维化发生发展中的可能作用。方法将大鼠随机分为正常对照(NC)组和DN组,8只/组。尾静脉注射STZ 55 mg/kg复制IDDM模型。HE、PAS及Masson染色观察肾组织形态学结构和纤维化病变;免疫组织化学法观察WNT4和β-catenin蛋白在肾组织的表达部位;Western blot检测WNT4、SFRP1、β-catenin、p-GSK-3β、GSK-3β、CollagenⅠ、α-SMA和E-cadherin蛋白在肾组织中的表达;Real-time PCR检测WNT4及SFRP1 mRNA在肾组织中的表达。结果与NC组相比,DN组大鼠肾组织纤维化病变明显;WNT4蛋白和mRNA表达显著增多(P<0.05);β-catenin、p-GSK-3β、α-SMA和CollagenⅠ蛋白的表达显著增多(P<0.05);E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05);SFRP1蛋白和mRNA表达显著下降(P<0.05)。结论在DN发病中,WNT4/β-catenin信号通路异常活化;SFRP1表达减少可能抑制该通路,促进了DN肾纤维化的发生发展。     

糖尿病大鼠肾组织中PTEN/AKT/mTOR通路对自噬的调控作用

目的:观察糖尿病大鼠肾组织中PTEN和自噬水平的变化,探讨糖尿病肾病中PTEN/AKT/m TOR通路对自噬的调控机制。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)和糖尿病组(DM组),每组各8只。用链脲佐菌素复制DM大鼠模型。于成模后10周处死大鼠后测定相应生化指标和肾脏指数,免疫组化观察肾小管上皮细胞PTEN蛋白的表达部位;Western blotting法检测肾组织LC3、PTEN及PTEN/AKT/m TOR通路的变化;realtime PCR检测肾组织PTEN的mRNA表达水平。结果:DM组的血糖、24 h尿蛋白量和肾脏指数均显著高于NC组(P0.05)。与NC组相比,DM组大鼠肾组织的LC3I和LC3II水平明显降低(P0.05)。PTEN主要分布于肾小管上皮细胞中,DM组PTEN蛋白的表达水平明显低于NC组(P0.05)。DM大鼠肾组织中,PTEN/AKT/m TOR通路的活性增高。结论:糖尿病大鼠肾脏组织中细胞自噬水平下降,而参与自噬调控的PTEN/AKT/m TOR通路活性升高,提示其自噬水平的变化可能受到PTEN/AKT/m TOR通路的调节。     

p38MAPK介导高糖下调肾小管上皮细胞表达BMP-7

目的:观察高糖环境中培养的原代肾小管上皮细胞骨形态发生蛋白-7(BMP-7)表达及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的作用。方法:原代培养大鼠肾小管上皮细胞,随机分为正常对照组、高糖组、p38MAPK阻断剂SB202190+高糖组和高渗组,处理72h后收集贴壁细胞,免疫细胞化学检测BMP-7和纤维连接蛋白(FN)表达;Westernblotting检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达;RT-PCR法检测BMP-7和FNmRNA水平。结果:正常对照组肾小管上皮细胞BMP-7主要表达于细胞浆,有少量总p38MAPK与FN表达,未见p-p38MAPK;高糖状态激活了p38MAPK,p-p38MAPK蛋白表达明显增加,FN的表达也明显增多而BMP-7的表达显著减少;与SB202190共同培养72h后,p-p38MAPK的表达较高糖组减少约80%,BMP-7的表达却被显著上调,而FN的表达减少。高渗组与正常对照组比较无明显差异。结论:高糖状态下肾小管上皮细胞BMP-7蛋白和mRNA均减少,阻断p38MAPK信号通路可促进内源性BMP-7增多,提示p38MAPK可能参与高糖下调肾小管上皮细胞BMP-7的表达。     

中药复方对糖尿病大鼠肾小管PKCα和ERK1/2表达的影响

目的观察自拟的中药复方对糖尿病(DM)大鼠肾小管蛋白激酶Cα(PKCα)和细胞外信号调节激酶(ERK1/2)表达的影响,探讨其防治糖尿病肾病(DN)的药理机制。方法雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(N组),糖尿病组(D组),中药复方1号治疗组(Y1组),中药复方2号治疗组(Y2组),依那普利治疗组(E组)。尾静脉注射链脲佐菌素(55mg/kg)复制DM动物模型。实验12周时处死大鼠,生化方法测血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、胆固醇;光镜观察肾组织的形态结构变化;免疫组化检测肾组织PKCα、TGF-β1、FN、ERK1/2蛋白表达情况;RT-PCR法检测大鼠肾皮质ERK2mRNA水平。结果 D组大鼠血糖、24 h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯和胆固醇较N组显著升高,药物治疗组的24 h尿蛋白均较D组显著降低,Y1、Y2组的甘油三酯、胆固醇比D组显著降低,而Y1组和E组的血肌酐显著低于D组;D组大鼠出现明显的肾脏形态学异常改变,而Y1、Y2组和E组病变明显减轻;免疫组化结果显示,与N组相比,D组大鼠肾组织PKCα、ERK1/2、TGF-β1、FN表达显著增高,Y1、Y2组和E组较D组明显降低;RT-PCR结果显示D组大鼠肾皮质ERK2mRNA表达较N组显著增多,Y1、Y2组和E组ERK2mRNA的表达较D组均显著下调。结论中药复方和依那普利可能通过抑制PKCα-ERK1/2信号通路而下调TGF-β1的过度表达,使FN的生成减少,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用。