糖尿病大鼠肾组织中miR-21和SnoN表达的变化

目的探讨糖尿病(DM)大鼠肾组织中微小核糖核酸-21(miR-21)和核转录共抑制因子(SnoN)在肾纤维化过程中的表达变化及其可能机制。方法用链脲佐菌素复制DM大鼠模型,并设对照组(NC),每组n=8。10周后处死大鼠,观察肾组织形态变化;免疫组织化学染色、Western blot及RT-q PCR检测miR-21、SnoN、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、p-Smad3(Ser423/425)、E钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)和胶原蛋白Ⅲ(collagenⅢ)的表达。结果与对照组相比,DM组肾组织p-Smad3(Ser423/425)、TGF-β1和α-SMA蛋白表达增加(P0.05),SnoN、E-cadherin蛋白表达减少(P0.05),但SnoN mRNA和miR-21表达明显上调(P0.05),并伴有collagenⅠ、collagenⅢ和FN在间质沉积增多。结论 TGF-β1可能上调miR-21表达,抑制SnoN翻译水平的表达,促进DN的纤维化病变。     

糖尿病大鼠肾小管骨调素表达上调

目的观察骨调素(OPN)在糖尿病(DM)大鼠肾小管的表达,探讨其与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、核转录因子-κB(NF-κB)及肾损害之间的关系。方法雄性SD大鼠70只,注射链尿佐菌素(STZ)诱导DM,随机分为5组,每组分别设鼠龄匹配的对照组。免疫组化检测肾小管OPN、AngⅡ、NF-κB及纤连蛋白(FN)的表达;Western blot检测肾皮质OPN和I-κB蛋白水平;生化测定血糖、血肌酐及24h尿蛋白量;光镜观察肾组织形态。结果DM大鼠肾小管AngⅡ和NF-κB表达从第3天、OPN从第7天、FN从第2周开始随病程发展而增多;肾皮质I-κB从第3天开始减少;4周时,OPN与AngⅡ、NF-κB、FN及蛋白尿呈显著正相关。结论DM大鼠肾小管OPN表达增加可能受AngⅡ和NF-κB调控,并参与肾小管间质病变的发病机制。     

SnoN对高糖诱导大鼠原代肾小管上皮细胞纤维连接蛋白合成的影响

目的: 观察核转录共抑制因子SnoN (Ski-related novel protein N)对高糖诱导大鼠原代肾小管上皮细胞(RTECs)纤维连接蛋白(FN)合成的影响。方法: 原代培养大鼠RTECs,免疫荧光细胞化学和Western blotting检测培养细胞的上皮性钙黏蛋白、 角蛋白-18和α-平滑肌肌动蛋白表达,鉴定培养细胞;正常糖(5.5 mmol/L)、高糖(25 mmol/L)和相同渗透压的甘露醇分别培养RTECs 30 min、2 h、12 h、24 h、48 h、72 h和96 h;SnoN siRNA转染RTECs,分为对照组、高糖组、control siRNA组和SnoN siRNA组;Western blotting和免疫细胞化学检测不同处理组RTECs中SnoN和FN蛋白的表达;RT-PCR检测FN mRNA。结果: 与正常糖培养组相比,高糖刺激能抑制 RTECs中SnoN蛋白表达,且呈时间依赖性;高糖刺激能使RTECs中FN蛋白和mRNA表达增加;与单纯高糖培养组相比,转染SnoN siRNA 能进一步促进高糖诱导的RTECs中FN蛋白表达(P<0.05)。结论: SnoN表达减少参与了高糖诱导的RTECs中FN合成过程。     

超脉冲CO2点阵激光辅助中药苦参油膏治疗增生性瘢痕的临床疗效观察

目的探讨超脉冲CO₂点阵激光辅助中药苦参油膏治疗增生性瘢痕的临床疗效。方法选取增生性瘢痕患者72例,随机分为对照组和研究组,每组各36例。对照组采用CO₂点阵激光治疗,冷敷冷疗后直接包扎,研究组在此基础上配合中药苦参油膏外敷,观察疗效和不良反应情况,比较两组患者疼痛指数、创面愈合时间、温哥华瘢痕量表(VSS)评分以及治疗后色沉发生率。结果每次治疗后研究组疼痛指数评分及创面愈合时间均低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者VSS评分无统计学差异(P>0.05);治疗后2个月和6个月时,研究组VSS评分均明显小于对照组(P<0.05)。研究组色沉发生率38.88%,明显低于对照组的72.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超脉冲CO₂点阵激光辅助中药苦参油膏治疗增生性瘢痕,可明显降低疼痛指数和VSS评分,缩短创面愈合时间,且不良反应较少,值得临床推广应用。     

烟酰胺对兔髓核细胞增殖及凋亡的调节作用

背景：研究表明，烟酰胺能够对白细胞介素1β或肿瘤坏死因子α致椎间盘退变起到保护作用，但烟酰胺对椎间盘细胞凋亡与增殖的保护机制尚不很清楚。 目的：观察烟酰胺对兔髓核细胞增殖及凋亡的调控作用及其机制。 设计、时间及地点：随机对照分组设计，于2007-04/10在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室及协和医院干细胞中心完成。 材料：2~3月龄日本大白兔10只，体质量1.5~2.0 kg，取L1~L6节段椎间盘内髓核细胞，体外培养髓核细胞凋亡模型。 方法：实验分为6组，正常对照组：不加任何药物；烟酰胺组：加入0.5 g/L 烟酰胺；白细胞介素1β组：加入10 μg/L 白细胞介素1β；白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组：加入10 μg/L 白细胞介素1β及非特异性Caspase抑制剂Z-VAD-FM；白细胞介素1β＋小剂量烟酰胺组：加入10 μg/L 白细胞介素1β及0.05 g/L 烟酰胺组；白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组：10 μg/L 白细胞介素1β及0.5 g/L 烟酰胺。3 d 后对各组细胞行Annexin V-PI染色，Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9功能染色检测及MTT检测。 主要观察指标：各组细胞凋亡率、caspase-3、8、9功能染色阳性细胞率及各组细胞的吸光度。 结果：①白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组和白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组较白细胞介素1β组细胞凋亡率明显下降（P < 0.01）。②白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组、白细胞介素1β＋大、小剂量烟酰胺组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9功能染色阳性细胞率较白细胞介素1β组明显下降（P < 0.01或P < 0.05）。③与白细胞介素1β组相比，白细胞介素1β＋Caspase抑制剂组和白细胞介素1β＋大剂量烟酰胺组吸光度升高（P < 0.01）。 结论：烟酰胺可以促进髓核细胞的增殖并抑制白细胞介素1β诱导的髓核细胞凋亡，对凋亡的抑制作用主要通过抑制凋亡的线粒体途径实现。     

用正交设计优选强力宁注射液除热原条件

用正交设计优选强力宁注射液除热原条件王卓,黄春华,郭兵,孙堂(沈阳药学院制药厂l10015)强力宁注射液是以甘草酸单铵盐,L-半胱氨酸盐酸盐,氨基乙酸为主药成分的复方抗肝炎注射剂,其处方组成成分较多,工艺过程复杂。对于污染热原的药液,选择一种方法可靠,操作简单,收率较高的除热原方法,对于提高产品收率,降低成本,有重要的实际意义。注射剂除热原有多种方法￣[1],吸附法是常用的较易行的方法。对众多的吸附剂,一般认为活性炭效?...     

云南白药胶囊和活血止痛胶囊治疗软组织损伤200例疗效成本分析

目的分析在治疗软组织损伤方面云南白药胶囊和活血止痛胶囊的临床疗效和医疗成本。方法应用随机方法把200例急性软组织损伤患者分为两组,常规治疗后口服云南白药胶囊或活血止痛胶囊,连服7 d,观察两组的临床疗效和药费金额,并把数据进行汇总,应用统计软件进行分析。结果两组在服药7 d后,与治疗前相比,有非常显著的差异,P<0.01;两组在治疗前后相比,P>0.05,无显著性差异,说明两组具有可比性,同时临床疗效接近。但从医疗费用上看,活血止痛胶囊比云南白药胶囊组少34.587元,相当于云南白药胶囊组整体费用的一半。结论云南白药胶囊与活血止痛胶囊胶囊在治疗软组织损伤方面都有明显的临床疗效,但费用差异很大,活血止痛胶囊更适宜在基层推广使用。     

丹芪合剂和依那普利对糖尿病大鼠肾组织PTEN的影响

目的研究丹芪合剂和依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾组织第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因(PTEN)表达的影响,探讨丹芪合剂和依那普利治疗糖尿病肾病(DN)的作用及机制。方法将SD大鼠分成对照组、糖尿病组、丹芪合剂治疗组和依那普利治疗组(n=8)。尾静脉注射链脲菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型;12周处死大鼠,检测相应生化指标和计算肾脏指数;观察肾组织病理学改变;免疫组化和Western blotting检测肾组织PTEN、TGF-β1、p-AKT1(Ser473)和FN蛋白的表达;RT-PCR检测PTENmRNA的表达。结果丹芪合剂和依那普利能减轻DM大鼠肾脏肥大,显著改善肾功能,减轻DN肾脏病变及肾间质FN表达,下调TGF-β1和p-AKT1(Ser473)表达,上调PTEN蛋白和mRNA的表达。结论丹芪合剂和依那普利可能通过上调肾组织PTEN表达,抑制AKT1激活,减少FN的沉积,减轻或延缓了DN的病变。     

糖尿病大鼠肾组织VEGF和TGF-β1的动态表达及意义

目的动态观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾组织中血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达情况,探讨它们在糖尿病肾病(DN)发生发展中的作用及其相互关系。方法实验动物随机分为5组,依病程长短分为:(1)A组(2周组);(2)B组(4周组);(3)C组(8周组);(4)D组(16周组);(5)E组(24周组),每组分别设有正常对照组(N组)和糖尿病组(DM组)。注射STZ法复制糖尿病大鼠模型;免疫组织化学方法检测肾组织VEGF、TGF-β1及纤连蛋白(FN)的表达;PAS染色光镜观察肾小球系膜、肾小管基底膜变化及细胞外基质沉积情况等的形态学改变;生化方法测定血糖、血肌酐及24h尿蛋白量。结果(1)正常对照组大鼠肾组织VEGF和TGF-β1均有少量表达,而糖尿病大鼠肾组织两者的表达均显著高于正常对照组。(2)糖尿病16周时肾组织VEGF表达与TGF-β1呈正相关。(3)随糖尿病进展,细胞外基质纤连蛋白(FN)在肾小管及肾小球表达增多,24h尿蛋白也增多,并且VEGF、TGF-β1两者都分别和FN、24h尿蛋白呈正相关性。结论糖尿病肾病大鼠肾组织中VEGF及TGF-β1参与了早晚期蛋白尿及肾脏肥大硬化的发生,并且VEGF和TGF-β1相互作用,共同促进了肾病的发生发展。     

甲状腺次全切除术28例临床分析

目的探讨甲状腺次全切除术对甲状腺疾病的疗效。方法回顾总结2002年1月至2006年12月笔者所在医院28例甲状腺次全切除术患者的临床资料。结果28例患者平均手术时间为82min（45～130min）,术中出血量为80ml（40～180ml）,于术后6～7d拆线出院,100％达I／甲愈合;术后暂时性喉返神经损伤1例,永久性喉返神经损伤1例,复发1例,再次手术后,未见再次复发。结论充分完善的术前准备、手术时精心操作、手术后认真处理,可以避免甲状腺危象等严重并发症发生。