Bcl-2Ki-67的表达预测恶性淋巴瘤造血干细胞移植后复发的临床研究

目的:研究Bcl-2、Ki-67在恶性淋巴瘤(Malignant lymphoma,ML)组织中的表达以及与自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem celltransplantation,AHSCT)预后的相关关系.方法:1)采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)法检测33例行AHSCT治疗的患者组织切片中Ki-67,Bcl-2的表达.并探讨Ki-67,Bcl-2的表达与预后的相关性.2)生存率统计采用Kaplan-Meier生存曲线,Log-rank检验,多因素分析采用Cox风险回归模型.结果:1)33例AHSCT治疗组,Bcl-2阳性表达组和阴性表达组移植后3年无病生存率分别为35.71%和88.89%(P<0.05);Ki-67阳性表达组和阴性表达组3年无病生存率分别为43.75%和85.71%(P<0.05),提示Bcl-2和Ki-67的表达与AHSCT的预后相关.2)Cox多因素分析显示,Ki-67和Bcl-2是影响ML患者AHSCT后无病生存的相关因素(P=0.043 7).结论:Bcl-2、Ki-67蛋白阳性表达的ML患者,AHSCT后易复发,可作为移植后预后判断的指标之一.Ki-67和Bcl-2是影响ML患者AHSCT无病生存的独立相关因素.     

PICK-1蛋白在多种肿瘤中的表达及在乳腺癌的临床意义

目的:主要探讨乳腺浸润性癌组织中PICK-1蛋白的表达与该肿瘤临床病理、其他生物学指标以及患者预后的相关性.方法:采用组织芯片免疫组织化学染色方法检测496例乳腺浸润性癌组织中PICK-1、ER、PR、HER2/neu、TIMP-1等蛋白的表达情况及表达间的相关性,以及PICK-1蛋白在不同分子亚型乳腺癌中的表达情况及对预后的影响.结果:PICK-1蛋白在乳腺癌组织中的表达率为27.22%,肿瘤细胞中PICK-1的高表达与淋巴结受累和高组织学分级相关(P均<0.001),且与HER2/neu表达相关(P<0.001),而与雌孕激素受体状态无关(P>0.05).同时该蛋白的表达与TIMP-1表达呈正相关(P=0.002).PICK-1蛋白表达与患者总生存期缩短相关.分层分析显示PICK-1仅对淋巴结阳性患者的预后有影响,同时对HER2/neu不同状态患者的影响不同,其中对三阴性乳腺癌(HR-HER-)预后影响最大.单因素分析显示乳腺肿瘤直径、组织学分级、淋巴结状态、HR状态、HER2/neu表达、TIMP-1表达、肿瘤细胞表达PICK-1均是有意义的预后指标;但多因素分析显示仅肿瘤直径、组织学分级、淋巴结状态、HER2/neu表达和PICK-1表达是独立的预后因素.结论:PICK-1蛋白与浸润性乳腺癌的侵袭和转移特性相关.同时有可能作为患者预后不良的指标,尤其是对于三阴性乳腺癌的预后意义更为显著.     

SYT-SSX融合基因亚型与滑膜肉瘤细胞增殖及凋亡的关系

目的:SYT-SSX融合基因是滑膜肉瘤的分子遗传学特征,影响滑膜肉瘤的发生发展,但作用机制不详.本研究通过分析SYT-SSX融合基因亚型与肿瘤细胞增殖及凋亡的关系,探讨SYT-SSX对滑膜肉瘤增殖、凋亡的影响.方法:选取141例SYT-SSX融合基因阳性的滑膜肉瘤.进行核分裂计数,通过Ki-67免疫组织化学染色计算Ki-67标记指数(labelingindex,LI),反映肿瘤细胞的增殖情况;通过TUNEL染色计算凋亡指数(apoptosisindex,AI),并结合Bcl-2和Bax免疫组织化学染色,分析肿瘤细胞的凋亡情况;最后,分析SYT-SSX亚型与核分裂数、Ki-67 LI、AI及Bcl-2、Bax表达的关系.结果:SYT-SSX1和SYT-SSX2阳性滑膜肉瘤分别为50例和91例;SYT-SSX1型和SYT-SSX2型滑膜肉瘤的核分裂数分别为(15.58±9.18)/10HPF和(11.02±8.78)/10HPF,前者显著高于后者(t=-2.902,P=0.004);并且,SYT-SSX1型和SYT-SSX2型滑膜肉瘤的Ki-67 LI分别为(25.26±12.78)%和(19.77±11.44)%,前者明显高于后者(t=2.615,P=0.010).另外,SYT-SSX1与SYT-SSX2型滑膜肉瘤的AI分别为(1.66±1.84)%和(1.65±2.22)%,两组无统计学差异(t=0.022,P=0.982);不同SYT-SSX亚型病例的Bcl一2和Bax表达情况无明显差别(分别P=0.156,P=0.321).结论:SYT-SSX融合基因亚型可能影响滑膜肉瘤肿瘤细胞的增殖,SYT-SSX1型病例肿瘤细胞的增殖能力较强;但是,SYT-SSX1与SYT-SSX2可能在调节细胞凋亡方面的能力无明显差别.     

头颈鳞癌Notch1的表达与顺铂敏感性的关系

背景与目的：Notch1属于Notch跨膜受体家族,在肿瘤细胞增殖和凋丁。过程中发挥着重要作用。已有研究表明Notch1影响化疗药物敏感性。而Notch1与头颈鳞癌顺铂敏感性的关系仍未被阐明。本研究旨在明确Notch1在头颈鳞癌中的表达状况,探讨Notch1表达水平对头颈鳞癌顺铂敏感性的影响。方法：收集25例头颈鳞癌新鲜手术标本进行原代细胞培养,肿瘤原代细胞胶原凝胶体包埋化疗药物敏感性检测（collagengeldropletembeddedculture—drugsensitivitytest,CD—DST）技术检测顺铂敏感性,．免疫化学染色检洲头颈鳞癌、正常鳞状上皮和舌鳞癌细胞株（Tb3．1）Notch1的表达水平．将经二甲基亚砜（dimethylsulfoxide,DMSO）、DAPT处理后的Tb3．1细胞分4组（DMSO、DAPT、DMS0＋Cisplatin、DAPT＋Cisplatin）,顺铂作用后CD—DST检测各组吸光度值。结果：头颈鳞癌组织Notch1阳性表达,表达水平明显高于正常鳞状上皮（P〈0．001）,且与顺铂敏感性呈负相关（r=-0．705,P〈0．01）,Tb3．1细胞Notch1阳性表达,DMSO组（A值155．4±2.3）与DAPT组（A值154．7±1．2）吸光度值差异无统计学意义（P〉0．05）,而DMSO＋Cisplatin组（A值33．9±1.3）与DAPT＋Cisplatin组（A值26．6±1．1）吸光度值差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：Notch1在头颈鳞癌中表达,且表达水平与顺铂的敏感性呈负相关。Notchl可用于预测头颈鳞癌顺铂的敏感性：DAPT阻断Notch1信号通路可提高Tb3．1细胞顺铂的敏感性。     

ER、PTEN在不同类型子宫内膜组织中的表达及意义

目的 检测ER、PTEN在不同类型子宫内膜腺上皮细胞中的表达.方法采用免疫组化检测ER、PTEN的表达.结果⑴ER的表达:在正常子宫内膜腺上皮细胞增生期显著高于分泌期(P＜0.01).增殖症中显著高于正常宫内膜(P＜0.05),而内膜癌中明显低于增殖症和正常宫内膜(P＜0.05).在增殖症中:单纯＞复杂＞不典(均P＜0.05).内膜样腺癌中:＜50岁和≥50岁年龄组、＞1/2和≤1/2肌层浸润组和不同的手术病理分期间ER的表达均无显著性差异(P＞0.05).而在高、中和低分化程度之间均有显著性差异(均P＜0.05);⑵PTEN的表达:在增生期和分泌期无差异(P＞0.05).不典与单纯、不典与复杂相比均有显著性差异(均P＜0.01).内膜样腺癌中:PTEN表达在＜50岁和≥50岁组,不同分化程度的癌组织,不同肌层浸润深度和不同分期之间均无显著性差异(P＞0.05);⑶ER、PTEN在不典型增生和子宫内膜样癌组织中表达均无相关性(r=0.315,r＝0.422,P＞0.05);结论⑴ER参与了正常宫内膜的变化,ER表达降低与内膜样癌的发生有一定关系,且ER表达减少与癌细胞恶性程度增加有关,故可以作为病理诊断的一项指标;⑵PTEN表达降低促使了癌前病变的发生,可能是引起内膜细胞癌变的机制之一,但是PTEN表达与临床病理学特征关系不大;⑶雌激素对PTEN的表达影响不大.     

MAGE在5种上皮性肿瘤中的表达特点

目的：为探讨MAGE（melanoma antigens gene）肽疫苗在消化系统肿瘤生活治疗的应用前景,本文对消化系统中的5种上皮性肿瘤的MAGE表达进行了检测,并对其分布特点进行了分析。方法：本研究采用RT-PCR法检测了111例消化系统不同肿瘤的MAGE基因的表达。结果：MAGE-1、MAGE-2、MAGE-3的阳性率分别为7.01%、14.91%、37.71%。48.65%的消化系统上皮性肿瘤表达MAGE-1、-2、-3其中一种。结论：MAGE家庭中以MAGE-3在消化系统中皮性肿瘤的表达最高。     

乳腺癌隐匿转移淋巴结的RT-PCR方法检测及临床意义

目的：采用优化的以CK19作为基因标志的RT－PCR方法,检测乳腺癌淋巴结的隐匿微转移,并探讨其临床意义。方法：1）优化CK19基因表达的RT－PCR检测方法,避免假基因干扰,并进行灵敏度和可靠性验证;2）乳腺癌隐匿转移淋巴结检测：将常规病理诊断为转移阴性淋巴结分为两组,其一为外侧组组成的LⅠ组,其二为由后组、锁上、腋尖和肌间组成的LⅡ组,共检测45例的317个淋巴结,包括45例LⅠ组淋巴结268个和其中15例LⅡ组淋巴结49个。结果：1）方法可靠性验证无假阳性和假阴性,通过双重PCR扩增灵敏度可达1×10－7。2）采用此方法,乳腺癌淋巴结微转移阳性病例的检出率为40．0％（18／45）,其中检出的阳性淋巴结均位于LⅠ组,阳性率为40．0％（18／45）,LⅡ组检出率为0（0／15）,两组之间差异具有非常显著性（P＜0．01）;微转移阳性淋巴结的检出率为22．1％（70／317）,其中LⅠ组阳性率为26．1％（70／268）,LⅡ组阳性率为0（0／49）,两组之间差异具有非常显著性（P＜0．01）;乳腺癌淋巴结隐匿微转移的检出率与临床分期呈正相关（P＜0．05）,与组织学分级呈正相关（P＜0．05）,与病理组织学类型无关（P＞0．05）。结论：乳腺癌早期的淋巴结转移首先出现在外侧组,提示该方法用于临床常规淋巴结的隐     

MAGE-3/CEA(HLA-A2/A24+)肽疫苗冲击树突状细胞诱导消化道肿瘤患者CTL的研究

目的:树突状细胞(DC)是一种重要的抗原递呈细胞,在T细胞参与的HLA限制性免疫应答中起重要作用.已证实在动物模型中DC递呈抗原可以诱导出T细胞介导的免疫反应.我们在体外扩增获得肿瘤患者DC,观察其特点,并以MAGE-3/CEA(HLA-A2/A24+)肽疫苗冲击DC诱导特异性CTL,研究其杀伤活性.方法:选择MAGE-3-HLA-A2/A24+或CEA-HLA-A24+肿瘤患者,收集PBMNC中的贴壁细胞,在含有rhGM-CSF、rhIL-4的1640中培养诱导DC细胞,第7天加入HLA-A2-MAGE-3、HLA-A24-MAGE-3、HLA-A24-CEA肽冲击.以肽冲击后的DC与未经纯化的T细胞混合培养(T-DC-P)诱导的CTL作为效应细胞,Mel526,803,Raji,K562作为靶细胞,以LDH法检测特异性CTL的杀伤力.结果:体外扩增可获得高纯度的DC,高表达DC特异性表面标志CD40(74.18%±15.76%)、CD86(94.6%±3.80%)、HLA-DR(88.6%±10.94%).不同肿瘤患者DC得率表现出较大差异(7.07%±3.24%),反映出免疫功能的不同.T-IL-2细胞与T-DC-P细胞对Mel526和803细胞株的杀伤活性有显著性差异(P＜0.01),可以将特异性杀伤力提高25%～35%,而对Raji和K562细胞株的杀伤活性无显著性差异(P＞0.01).结论:rhGM-CSF、rhIL-4体外联合应用可扩增出高纯度DC,肽疫苗冲击后的DC可诱导出MAGE、CEA特异性的CTL应答.表明DC为基础的疫苗是肿瘤免疫治疗重要的新方法,因其具有简便、快速的特点,有良好的前景.     

hMAM mRNA在检测乳腺癌外周血微小转移中的应用

目的 探讨乳腺组织特异性基因hMAM mRNA作为检测乳腺癌血道微小转移指标的可能性。方法 采用巢式PCR结合荧光定量PCR,对63例乳腺癌患者、8例乳腺增生患者、5例乳腺纤维腺瘤患者、25例其他癌患者以及31例健康志愿者的外周血进行检测。结果63例乳腺癌患者外周血中hMAM mRNA阳性率30．2％（19／63）,手术后阴转率为31．6％（6／19）。乳腺良性疾病、胃癌、大肠癌、食管癌、肺癌、卵巢癌患者外周血中均阴性,而31例健康献血员中有1例阳性。hMAM mRNA表达随肿瘤分期进展阳性率增高,但与肿瘤分期、ER和PR状态无关（P＞0．05）。结论 hMAM mRNA特异表达于乳腺癌患者外周血,有可能作为检测乳腺癌血道微小转移的指标。     

胰头癌联合门静脉区域切除的临床价值

目的探讨胰腺癌联合门静脉区域切除的临床价值,及评价区域切除术中肿瘤侵犯门静脉后以颈内静脉替代门静脉的效果。方法回顾性分析2000年1月-2003年1月间天津医科大学附属肿瘤医院6例行胰头癌联合门静脉切除并用颈内静脉替代门静脉修复的患者的临床资料。结果本组6例行胰头癌联合门静脉切除并用颈内静脉替代门静脉修复,术后病理均证实肿瘤侵犯累及门静脉和／或肠系膜上静脉,术后生存时间17～49个月,平均23．2个月,其中2例存活超过3年,最长的1例术后无瘤生存达4年1个月。结论对于胰头癌局部浸润肠系膜上静脉和／或门静脉,但无远处转移的患者,应积极行手术切除。胰腺癌联合门静脉切除后,行颈内静脉替代门静脉修复是一种有效的方法,可以提高手术切除率,减少术后并发症,延长患者生存期。