RNA干扰靶向抑制三磷酸甘油醛脱氢酶表达对鱼藤酮所致神经毒性的影响

目的研究RNA干扰（RNAi）技术能否有效抑制三磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）的表达以及对鱼藤酮所致神经毒性的影响。方法体外化学合成针对GAPDH基因的小干扰RNA（siRNA）,通过脂质体Lipofectamine2000瞬时转染后采用实时荧光定量PCR（real—time PCR）和蛋白免疫印迹分析（Western blot）进行干扰效果的鉴定;使用激光共聚焦荧光显微镜观察干扰对鱼藤酮诱导的GAPDH定位和结构改变的影响;用流式细胞仪检测线粒体膜电位变化。结果实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹分析显示,化学合成的siRNA可有效抑制细胞内GAPDH mRNA和蛋白水平的表达;激光共聚焦荧光显微镜观察显示,干扰GAPDH表达的细胞可减少鱼藤酮所致的GAPDH的聚集及核转位;流式细胞仪检测发现干扰GAPDH的表达可部分抵抗鱼藤酮所致的细胞线粒体膜电位的下降。结论下调GAPDH的表达可以减少鱼藤酮所致的细胞内GAPDH的聚集和核转位,减少线粒体膜电位的下降,提示GAPDH可能是鱼藤酮所致神经毒性的重要分子靶点。     

CGI-58抵抗5-FU诱导的巨噬细胞凋亡

目的 观察CGI-58对5-FU诱导的巨噬细胞凋亡的影响,并探讨其作用及机制.方法 用5-FU处理巨噬细胞(PLKO)与CGI-58敲低(knockdown)的巨噬细胞(CGI-58 KD)后分别用CCK-8法检测其细胞增殖能力;流式细胞术检测其细胞周期与凋亡;Westem blot检测其凋亡蛋白(cleaved Caspase-3)的表达水平;Seahorse Assays检测其线粒体功能.结果 CCK-8检测发现CGI-58 KD+ 5-FU组细胞活力降低更明显(P＜0.01);流式细胞术结果显示经5-FU处理后,CGI-58 KD组的细胞凋亡率明显高于PLKO组(P＜0.01),Western blot检测发现CGI-58 KD+ 5-FU组cleaved Caspase-3的表达水平明显高于PLKO+ 5-FU组(P ＜0.01);Seahorse Assays检测发现CGI-58 KD组其基础耗氧率OCR明显降低(P＜0.0l),ATP生成减少(P＜0.05),ROS表达增加(P＜0.01);抗氧化剂NAC处理可拮抗巨噬细胞CGI-58缺失诱导的ROS增加(P＜0.05)、5-FU杀伤作用(P＜0.05)及cleaved Caspase-3表达水平.结论 CGI-58缺失可增强5-FU对巨噬细胞的杀伤作用并损伤巨噬细胞的线粒体功能,其作用机制可能是通过增加ROS的产生来实现的.     

临床护士工作满意度调查分析

近年来,我们对6所二级医院的300名护士进行工作满意度调查,取得满意效果.现报告如下.     

脑梗死伴失语症的SPECT/CT脑血流灌注断层显像和MRI的对比分析

目的探讨单光子发射计算机断层/X线计算机断层扫描（SPECT/CT）在脑梗死失语症的定位及定性诊断中的意义。方法 26例经磁共振成像（MRI）诊断为脑梗死的患者按有无失语分为两组,行SPECT/CT脑血流灌注断层显像,采用感兴趣区（ROI）技术进行局部脑血流定量分析。结果 SPECT/CT可准确检出脑梗死病灶,对病灶范围的显示比MRI更广泛;脑梗死伴失语症与MRI定位有关,但SPECT定位更准确;局部脑血流灌注量的降低程度与失语症关系密切（P〈0.01）。结论 SPECT/CT可探查到脑血流及功能损伤和形态学改变,对失语症的临床诊断有参考意义。     

~(13)C尿素呼气试验检测幽门螺杆菌732例临床分析

幽门螺杆菌(helicobacter pylori)是一种革兰阴性细菌,能够以独特的尿素代谢方式在酸性环境中生存.这使得它成为人的胃中存在的唯一一种细菌,是定植于胃黏膜内的微需氧螺旋杆菌属,其发现是消化性溃疡治疗史上的一块里程碑.     

流行性出血热的观察与护理

流行性出血热是一种自然疫源性疾病,尚无特效疗法,由黑线鼠传播,本病起病急,病情变化快,危重者病死率高,如能对患者细心观察,针对不同情况采取相应的护理措施,可为预防性治疗提供依据。1　临床资料本组106例患者,男84例,女22例,大多为青壮年,全部病例免疫荧光抗体( );季节:秋冬59例,春夏35例,散发12例,除1例患者入院时已肾衰经抢救无效死亡外,余均痊愈出院。2　观察与护理21　心理护理:因本病发病突然,住院初期患者常高热不退,加之对本病认识不足,出现精神紧张、焦虑不安,针对这一情况我们应向患者及家属讲解有关本病的一些基本知识及病理变…     

Kallmann综合征的诊断与鉴别诊断

目的:研究Kallm ann综合征的诊断与鉴别诊断。方法:对Kallm ann综合征男性患者进行染色体核型分析、性激素检测、促性腺激素释放激素(GnRH)兴奋试验和磁共振成像(MR I)检查。结果:患者外周血淋巴细胞染色体检查为正常男性核型,兴奋试验提示对GnRH反应良好。睾酮、促卵泡生成素、促黄体生成素水平低下,MR I显示嗅球部缺失。结论:染色体核型分析、性激素检测、GnRH兴奋试验和MR I检查对于Kallm ann综合征的诊断和鉴别诊断是很重要的。     

1例与Y染色体畸变相关的无性腺症、矮身材和蹠骨畸形

目的:报告1例与Y染色体畸变相关的无性腺症、矮身材和蹠骨畸形的罕见病例。方法:对患者进行常规的染色体核型分析;选用X/Y着丝粒探针和Y染色体上性别决定基因(SRY)探针对患者进行原位荧光杂交(FISH);对SRY基因的HMG进行序列分析;应用多重PCR检测Y染色体微缺失;进行矮身材同源框基因(SHOXY)微卫星多态性分析;进行人绒毛膜促性腺激素(HCG)兴奋试验。结果:染色体核型分析显示患者核型为46,X del(Y)(q11.23);患者FISH显示只有1个X染色体和Y染色体杂交信号,但SRY有2个信号,分别位于Y染色体的短臂和长臂上。结合染色体核型和FISH结果,患者核型疑为46,X del(Y)(q11.23)(pter→p11.3::q11.23→p11.3:).ish del(Y)(SRY++,DYZ3+);Y染色体微缺失检测发现有AZFc的缺失;患者的SRY的HMG序列分析结果未显示有突变;SHOXY微卫星多态性分析未发现父亲来源的基因有缺失;兴奋试验显示HCG刺激后,雄激素、雌激素无升高反应,提示为无性腺症。结论:患者的无性腺症、矮身材和蹠骨畸形与Y染色体结构畸变有关,推测与SRY基因,SHOXY基因相关。     

1例与Y染色体畸变相关的无性腺症、矮身材和踱骨畸形

目的：报告1例与Y染色体畸变相关的无性腺症、矮身材和踱骨畸形的罕见病例。方法：对患者进行常规的染色体核型分析；选用X／Y着丝粒探针和Y染色体上性别决定基因（SRY）探针对患者进行原位荧光杂交（FISH）；对SRY基因的HMG进行序列分析；应用多重PCR检测Y染色体微缺失；进行矮身材同源框基因（SHOXY）微卫星多态性分析；进行人绒毛膜促性腺激素（HCG）兴奋试验。结果：染色体核型分析显示患者核型为46，Xdel（Y）（q11．23）；患者FISH显示只有1个x染色体和Y染色体杂交信号，但SRY有2个信号，分别位于Y染色体的短臂和长臂上。结合染色体核型和FISH结果，患者核型疑为46，Xdel（Y）（q11．23）（pte—p11．3：：q11．23→p11．3：）．ishdel（Y）（SRY＋＋，DYZ3＋）；Y染色体微缺失检测发现有AZFc的缺失；患者的SRY的HMG序列分析结果未显示有突变；SHOXY微卫星多态性分析未发现父亲来源的基因有缺失；兴奋试验显示HCG刺激后，雄激素、雌激素无升高反应，提示为无性腺症。结论：患者的无性腺症、矮身材和踱骨畸形与Y染色体结构畸变有关，推测与SRY基因，SHOXY基因相关。