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肿瘤靶向DNA载体--转铁蛋白-多聚乙烯亚胺体外介导小鼠IL-12基因转染小鼠骨肉瘤细胞的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 评价转铁蛋白-多聚乙烯亚胺(Transferrin-polyethylenimine,Tf-PEI)靶向性转染小鼠骨肉瘤细胞的可行性。以Tf-PEI为载体,将小鼠IL-12基因导入小鼠骨肉瘤细胞。方法 以Tf-PEI为载体,将荧光素酶基因和小鼠IL-12基因分别导入小鼠骨肉瘤细胞,并检测其转染效率。以游离转铁蛋白竞争性拮抗Tf-PEI,并观察其对转染效率的影响。结果 Tf-PEI可以高效的、靶向性的转染小鼠骨肉瘤细胞。当N/P比值为5时,Tf-PEI的转染效率最高。游离转铁蛋白能够显著的拮抗Tf-PEI的转染。Tf-PEI还可以成功地将小鼠IL-12基因导入小鼠骨肉瘤细胞。结论 Tf-PEI是一种高效、低毒、肿瘤靶向性的基因转染载体,它能成功地将mlL-12基因导入骨肉瘤细胞,广泛应用于体内外恶性肿瘤基因治疗的实验。 相似文献
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陈旧性胸腰椎骨折伴后凸畸形的截骨矫形术式选择 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:观测经椎弓根截骨(PSO)与Smith-Petersen截骨(SPO)两种术式治疗胸腰椎陈旧骨折伴后凸畸形的矫形效果和临床疗效,探讨截骨矫形术式选择。方法:2006年3月~2014年12月,对47例创伤性后凸畸形患者进行了截骨矫形手术。其中男30例,女17,年龄22~69岁,平均42.5±15.5岁。均为陈旧性胸腰椎骨折导致的创伤性后凸畸形。47例患者主诉均为腰背部疼痛。针对不同病理特征和畸形程度,32例行PSO矫形,15例行SPO矫形。PSO手术在病椎行经椎弓根楔形截骨矫形,SPO手术在病椎上下及相邻间隙做2~3节段SPO截骨矫形。通过术前、术后和末次随访全脊柱正侧位X线片,测量后凸畸形Cobb角及矢状面平衡(SVA),分析两种方法矫形效果,采用疼痛视觉模拟评分(VAS)评估疼痛情况,应用Oswestry功能障碍指数(ODI)分析两种方法临床疗效。结果:47例中有42例获得随访,其中PSO手术29例,SPO手术13例。随访时间8~48个月,平均29.4±7.8个月。42例均获得骨性融合。后凸畸形Cobb角PSO组术前为41.8°±10.5°,术后为2.6°±1.2°,末次随访时为3.2°±1.3°,矫正率92.3%;SPO组术前为40.2°±9.6°,术后为4.9°±2.3°,末次随访时为5.3°±3.5°,矫正率86.8%。两组术后、末次随访时Cobb角与术前相比均有显著性差异(P0.05)。PSO组SVA术前为5.0±4.1cm,术后为-0.6±2.2cm,末次随访时为1.2±1.5cm;SPO组SVA术前为3.5±2.2cm,术后为0.8±0.6㎝,末次随访时为1.3±1.1cm。两组术后、末次随访时SVA与术前相比均有显著性差异(P0.05)。PSO组VAS术前为6.46±1.72,末次随访时为0.91±0.59,ODI术前为(69.4±12.1)%,末次随访时为(23.7±11.5)%;SPO组VAS术前为6.51±1.87,末次随访时为2.08±0.75,ODI术前为(68.1±16.3)%,末次随访时为(33.1±12.5)%,两组随访VAS和ODI与术前相比有显著性差异(P0.05)。结论:针对不同病理特征和畸形程度的胸腰椎陈旧骨折伴后凸畸形患者,选用PSO或SPO矫治均可取得良好矫形效果及临床疗效。 相似文献
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鼠胚成骨细胞的原代培养与鉴定 总被引:16,自引:1,他引:15
目的 探讨经济、高效的原代成骨细胞培养方法,为进一步的实验研究奠定基础。方法孕龄19天的昆明孕鼠(KM),无菌条件下剖腹取出胎鼠,然后取胎鼠的颅盖骨,剔净、漂洗、剪碎。甩0.25%胰蛋白酶消化10分钟,终止消化后,将碎骨块接种于培养瓶中培养,通过相差显微镜、透射电镜观察,并用碱性磷酸酶染色、骨钙素免疫组化染色和钙结节茜素红染色等方法对所获得的细胞进行鉴定。结果所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态特征,碱性磷酸酶染色、骨钙素染色和钙结节染色均呈阳性。结论改良的组织块培养法可在较短时间内获得大量成骨细胞,所培养的细胞具有典型的成骨细胞形态和功能。 相似文献
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为了解决大型医疗设备实时监测、评价管理、网络安全、数据安全、运维安全等问题,提升大型医疗设备使用效能与效益,在保证网络安全的前提下,采集、解析大型医疗设备运行日志数据,融合相关信息系统业务数据,构建基于真实世界数据的大型医疗设备实时监测与评价管理平台,显著提高了磁共振设备运维效率、动态评价准确度,降低了故障发生率。该平台实现了设备使用全流程的数据闭环,有效地解决了不同品牌和型号大型医疗设备的日志数据接口标准化问题,极大地提升了大型医疗设备使用量化评价和精细管理能力,显著降低了设备潜在安全风险,为大型医疗设备实时监测与评价管理提供了实践依据。 相似文献
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目的:构建人骨形态发生蛋白2与血管内皮生长因子165双基因真核表达质粒。方法:实验于2005-03/2005-10在华中科技大学同济医学院公共实验平台完成。①通过聚合酶链反应对pcDNA3.1-BMP2及pUC-CAGGS-VEGF165的目的基因片段亚克隆并引入新的酶切位点,将其分别定向连入真核双表达载体pIRES,构建同时表达两个目的基因的双顺反子,通过聚合酶链反应、酶切分析及DNA序列测定鉴定重组质粒。②重组质粒经脂质体介导体外转染小鼠骨髓基质细胞,通过反转录-聚合酶链反应检测骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165mRNA的表达。结果:①pIRES-BMP2-VEGF165双基因表达质粒的构建和鉴定:将重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165分别作XhoI/MluI和XbaI/NotI双酶切,经10g/L琼脂糖凝胶电泳可见1.2kbp的人骨形成蛋白2条带和592bp的血管内皮生长因子165条带,酶切条带与聚合酶链反应产物电泳带处于相同位置。经聚合酶链反应、酶切分析及DNA序列测定证实,目的基因插入片段方向正确,DNA序列无突变。②骨形成蛋白2、血管内皮生长因子165mRNA的表达:以转染pIRES空质粒为阴性对照,48h后提取转染细胞的RNA分别用P1,P2和P3,P4作为引物进行反转录-聚合酶链反应。结果表明转染pIRES-BMP2-VEGF165的小鼠骨髓基质细胞扩增出1.2kbp及592bp两条带。证实该重组质粒能在体外同时表达骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165mRNA。结论:成功构建了可同时表达骨形态发生蛋白2及血管内皮生长因子165的双基因真核表达质粒,为进行联合基因治疗骨缺损的实验研究奠定了基础。 相似文献
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目的建立祛风止痛浓缩丸中没食子酸的含量测定方法。方法采用HPLC法测定其中没食子酸的含量。以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇-0.025mol/L磷酸(用三乙胺调pH2.7)(5:95)为流动相;检测波长为266nm。结果在选定的色谱条件下,供试液中没食子酸与相邻组分离度良好,阴性液没有干扰,方法的稳定性、重现性、精密度、回收率试验(RSD%=1.8%,n=6)均符合相关规定,三批样品中每丸含没食子酸分别为4.21mg、4.45mg和3.96mg。结论采用HPLC法可以作为祛风止痛浓缩丸中没食子酸的含量测定方法。 相似文献
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分析了集团化医院多院区后勤机电系统管理信息化的现状,以及医院后勤管理流程存在的问题和挑战。以华中科技大学同济医学院附属协和医院为例,介绍医院后勤一体化综合管理平台对于后勤机电设备的集成管理实践,包括平台的功能框架、部署方式以及数据标准化和流程优化等。通过平台的部署和集成,实现了多院区后勤机电设备和系统的数据共享和协同管理。实践表明,基于综合管理平台的集成管理是解决集团化医院多院区后勤机电系统管理问题的有效途径。 相似文献