TGF-β1抑制缺氧无血清诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的研究

目的 观察转化生长因子β1(TGF-β1)对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外模拟缺血性损伤的保护作用.方法 采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs,对培养第3代的MSCs进行鉴定;用TGF-β11、2、5 rig/m1分别预处理细胞6 h,然后用血清剥夺和缺氧(SOD)处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术评价MSCs的凋亡及存活情况;采用Western blot方法检测2 ng/ml TGF-β1对Bcl-xL表达的影响.结果 密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs,免疫荧光检测显示培养的细胞CD29表达阳性,而CD34表达阴性;AnnexinV/PI双染流式细胞仪结果显示用2 ng/ml TGF-β1预处理MSCs后,可抑制SOD诱导的细胞凋亡,其凋亡率明显下降,和其它组比较具有显著性差异(P<0.01);Western blot显示2-g/ml TGF-β1可升高Bcl-xL的表达,Bd-xL/GAPDH(1.06±0.15)在6 h达到高峰,和其它时间点比较具有显著性差异(P<0.01或P<0.05).结论 TGF-β1对SOD诱导的MSCs的凋亡具有抑制作用,其抗凋亡作用可能是通过促进Bcl-xL表达实现的.     

拟青霉素代谢提取物对慢性应激抑郁大鼠免疫功能的影响

目的：观察一种拟青霉代谢物提取物对慢性应激抑郁模型大鼠24h糖水消耗量、脾淋巴细胞增殖和血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平的影响。 方法：实验于2005—08在安徽医科大学药理学教研室完成。①选用健康成年雄性SD大鼠48只，按随机数字表法分为6组：对照组、模型组、吗氯贝胺组、拟青霉代谢物提取物高、中、低剂量组，每组8只。用药组与模型组大鼠造成抑郁模型：单只孤养，每天随机给予不同的刺激，包括：电击足底、4℃冷水刺激5min、45℃热刺激5min、高速水平摇晃10min、夹尾60s、禁水24h、禁食48h、悬吊5min和昼夜颠倒，平均每种刺激各2次，共21d。用药组于造模结束后灌胃给药，1次／d，共21d。模型组及对照组按10mL／kg灌胃蒸馏水；吗氯贝胺组：按40mg／kg剂量灌胃吗氯贝胺混悬液（单胺氧化酶抑制剂；上海信谊百路达药业有限公司，批号：031001，0．15g／片）；拟青霉代谢物提取物高、中、低剂量组：分别按80，40，20mg／kg剂量灌胃拟青霉代谢物提取物混悬液（安徽农业大学虫生真菌研究所提供，1．25kg／L，批号：20050112）。②给药第21天，计算大鼠24h糖水消耗量，以反映大鼠快感缺乏情况。用四甲基偶氮唑盐法检测大鼠脾淋巴细胞增殖情况；用放射免疫法测定血清中自细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平。 结果：SD大鼠48只均进入结果分析。①24h糖水消耗量：模型组明显低于对照组，分别为（40．1&;#177;9．0），（66．2&;#177;15．7）mL，（P〈0．01）。拟青霉代谢物提取物高、中剂量组和吗氯贝胺组明显高于模型组，分别为（57．4&;#177;12．6），（54．6&;#177;11．5），（59．4&;#177;16．7）mL，（P〈0．05～0．01）。②细胞增殖：模型组大鼠脾细胞淋巴细胞对刀豆蛋白A刺激的T淋巴细胞增殖、脂多糖刺激的B淋巴细胞增殖均有明显的抑制作用，A值明显低于对照组（P〈0．01）。高、中、低剂量拟青霉代谢物提取物和吗氯贝胺（40mg／kg）可使T淋巴细胞增殖的抑制状态得到明显改善，高、中剂量拟青霉代谢物提取物和吗氯贝胺（40mg／kg）可使B淋巴细胞增殖的抑制状态得到明显改善，A值明显高于模型组（P〈0．05～0．01）。③血清细胞因子水平变化：模型组大鼠血清白细胞介素1β、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平明显高于对照组（P〈0．05-0．01）。拟青霉代谢物提取物高、中剂量组血清肿瘤坏死因子α水平明显低于模型组（P〈0．05），拟青霉代谢物提取物各剂量组血清白细胞介素6、白细胞介素1β水平明显低于模型组（P〈0．05），吗氯贝胺组血清白细胞介素6水平明显低于模型组（P〈0．05）。 结论：拟青霉代谢物提取物可改善抑郁大鼠快感缺乏，该作用的发挥可能与调节免疫功能和细胞因子水平有关；该提取物的上述作用以80，40mg／kg的高、中剂量较为明显，且与吗氯贝胺作用效果相当。     

神经生长因子与奥拉西坦联合治疗对高血压脑出血患者的应用效果

目的观察高血压脑出血患者应用神经生长因子与奥拉西坦联合治疗的临床疗效。方法选取82例高血压性脑出血患者,按照随机数字表法,将患者分为观察组(n=42)和对照组(n=40)。对照组给予奥拉西坦治疗,观察组在此基础上,联合神经生长因子治疗。观察两组患者治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经功能缺损情况(NIHSS量表)及运动功能及日常生活能力[巴氏指数(BI)]。患者均随访半年,比较两组患者神经功能恢复情况[改良Rankin量表(mRS]]以及患者的并发症情况。结果观察组治疗前与对照组治疗前患者CRP、NSE、NIHSS、BI、mRS比较,均差异无统计学意义(P 0. 05);治疗后,两组患者CRP、NSE及NIHSS评分均有改善作用,但观察组各个评分均优对照组(P 0. 05);治疗后,两组患者BI、mRS评分均较治疗前有所改善,但两组间评分差异无统计学意义(P 0. 05);观察组并发症发生率与对照组差异无统计学意义(P 0. 05)。结论高血压脑出血患者应用神经生长因子与奥拉西坦联合治疗能够显著改善神经功能损伤、血清CRP水平、NSE水平,但对于患者的日常生活能力和神经功能的恢复效果有限。     

骨髓干细胞动员治疗脑梗死

脑梗死时的神经细胞损伤以神经元死亡最为突出。骨髓干细胞动员是新兴的细胞治疗方法,利用细胞因子使主要位于骨髓中的干细胞进入外周血,并通过血液循环到达损伤组织,修复受损神经元。文章就骨髓干细胞动员、归巢和治疗机制的研究进展做了综述。     

血管性痴呆患者的CT影像特征

目的 探讨血管性痴呆(vascular demential，VD)患的CT影像特征，为临床诊断和治疗提供帮助。方法 选择符合美国精神病协会的精神障碍诊断统计手册第4版有关VD的诊断标准的患45例和非痴呆患33例完成简易精神状态检查(MMSE)测试及头颅CT检查，对两组的CT表现进行分析。结果 VD患CT表现多累及皮质(额叶、颞叶)，以及半卵圆中心、基底核，丘脑多发性病灶，左侧和／或双侧病灶，大容积，大多伴有脑萎缩表现。结论 头颅CT检查有助于VD的诊断。     

120对反复流产夫妇的染色体分析

120对夫妇中17例有染色体异常(女14例、男3例)。异常率7.08％(17/240)。其中染色体平衡易位11例,随体改变5例,缺失1例。5例有阳性家族史。证明染色体异常是反复流产的重要因素之一。并对有关问题进行了分析和讨论。     

Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞体外模拟缺血性损伤保护作用的实验研究

目的观察Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞（MSCs）体外模拟缺血性损伤的保护作用，从而为下一步Bcl-2基因修饰的MSCs移植治疗脑缺血的实验研究奠定基础。方法采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs，对培养第5代的MSCs进行鉴定；用脂质体转染法对MSCs行人Bcl-2（hBcl-2）基因转染，转染后用G418进行筛选，然后用免疫荧光细胞化学技术检测其蛋白的表达；采用血清剥夺和缺氧（SOD）处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型，通过流式细胞术和TUNEL原位细胞凋亡检测评价转染hBcl-2基因的MSCs和未转染的MSCs的凋亡及存活情况。结果密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs，免疫组化检测显示培养的细胞CD44、CD71表达阳性，而CD45表达阴性；转染hBcl-2基因的MSCs经G418筛选后有hBcl-2蛋白的稳定、高效的表达；流式细胞术检测显示和MSCs相比，转染hBcl-2基因的MSCs在SOD后及9h凋亡细胞较少，存活细胞较多。TUNEL原位细胞凋亡检测也显示转染hBcl-2基因的MSCs的凋亡明显减少（P〈0．05）。结论转染hBcl-2基因的MSCs有其蛋白的稳定表达，hBcl-2基因转染可对抗MSCs体外模拟缺血性损伤引起的细胞凋亡，从而具有保护性作用。     

血管性痴呆患者的CT影像特征

目的探讨血管性痴呆(vasculardemential,VD)患者的CT影像特征,为临床诊断和治疗提供帮助。方法选择符合美国精神病协会的精神障碍诊断统计手册第4版有关VD的诊断标准的患者45例和非痴呆患者33例完成简易精神状态检查(MMSE)测试及头颅CT检查,对两组的CT表现进行分析。结果VD患者CT表现多累及皮质(额叶、颞叶),以及半卵圆中心、基底核,丘脑多发性病灶,左侧和/或双侧病灶,大容积,大多伴有脑萎缩表现。结论头颅CT检查有助于VD的诊断。     

320例孕早期绒毛细胞染色体分析

对296例人工流产及6例产前诊断的孕早期绒毛细胞采用直接法进行染色体分析,共有正常染色体290例,占96.02％,其中男性核型137例,女性核型153例,男女之比为1:1.12,男略少于女。共发现异常染色体12例,发生率为3.97％,其中数目异常11例,结构异常1例。30岁以上的孕妇染色体异常发生率明显高于30岁以下者,产前诊断组异常染色体发生率高于人工流产组,