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21.
目的 探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-Akt信号转导通路在转化生长因子β1(TGF-β1)引起骨髓间充质干细胞(BMSCs)Snail表达改变中的调控作用. 方法 采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠BMSCs,用免疫荧光法对培养第3代的细胞进行鉴定.应用Western blotting检测TGF-β1对p-ERK1/2及p-Akt表达的影响,以不同浓度ERK特异性抑制剂(PD98059)或PI3K通路特异性抑制剂(Wortmannin)干预后检测BMSCs ERK、Akt磷酸化水平变化,确定PD98059和Wortmannin分别抑制Snail诱导的BMSCs ERK和Akt磷酸化的有效浓度,进而用RT-PCR、Western blotting技术证实TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞Snail mRNA及蛋白表达的影响. 结果 密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠BMSCs,免疫荧光检测显示,培养的细胞CD29、CD44表达阳性,而CD34、CD45表达阴性;Western blotting分析显示,TGF-β1作用6h后BMSCs p-Akt和p-ERK水平较对照组明显增高;Wortmannin和PD98059可分别以剂量依赖性抑制BMSCs p-Akt和p-ERK水平;可有效抑制TGF-β1诱导的BMSCs ERK及Akt的磷酸化,PD98059和Wortmannin相应浓度分别为30 μmol/L和40 nmol/L.PD98059(30 μmol/L)、Wortmannin(40 nmol/L)明显抑制了TGF-β1诱导的Snail mRNA及蛋白水平,而两者联合应用对骨髓间充质干细胞Snail mRNA及蛋白表达的抑制作用具有协同作用,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 TGF-β1能促进BMSCs的Snail的转录及蛋白的表达,且ERK1/2及PI3K转导通路的激活在此过程中具有调控作用. 相似文献
22.
目的 采用模糊综合质量指标分级评定培养基质量.方法 选择大肠埃希菌ATCC25922、鼠伤寒沙门菌ATCC50013、鸭沙门菌ATCC50083、伤寒沙门菌ATCC50097、弗氏志贺菌ATCC12022、肠球菌属ATCC29212标准菌株和3个厂家生产的沙门菌属显色培养基,采用定量稀释方法,观察培养基物理性状、菌落显色特点,测定培养基pH值,计数培养基平均菌落数,测量菌落平均直径,计算各质控菌株对鉴定培养基的生长率PR和选择因子(SF),采用模糊综合质量指标统计分析对培养基质量分级评定.结果 3种培养基模糊综合质量评价得分均为合格,质量等级均为Ⅱ级;1号培养基,综合质量指标P=0.512,质量最优;2号培养基综合质量指标P=0.517;3号培养基综合质量指标P=0.715.结论 模糊综合质量指标评价方法能够用于显色培养基质量的鉴定和评价. 相似文献
23.
本论文合成了多巴胺(DA)和羟基肉桂酸(HCAs)的孪合抗氧化剂(2a–e),即肉桂酰多巴(2a),对香豆酰多巴(2b),咖啡酰多巴(2c),阿魏酰多巴(2d),芥子酰多巴(2e)。所有化合物在p H 1.3,p H 5.0的缓冲液中非常稳定,在p H 7.4的缓冲液中可发生水解。在人血浆中,化合物水解反应进行更快,其水解顺序以半衰期表示:2c(1.21 h)<2e(1.52 h)<2d(1.85 h)<2b(3.38 h)<2a(3.88 h)。稳定性结果表明,化合物具有的供电子取代基越多,其稳定性越低。通过紫外光谱证实了,因为化合物2c,2d,和2e具有更多的羟基和甲氧基取代基,所以相比于2a和2b,产生了50 nm的红移。此外,在浓度40μM和作用时间48 h时,化合物2b–e和DA对人正常HUVEC细胞未表现出毒性,而2a表现了16%的增值抑制作用。通过ABTS?+和超氧阴离子分析,所有化合物均表现出了比水溶性维生素E(trolox)更高的抗氧化活性。有趣的是,孪合物2a–e的抗氧化活性高于HCAs,而低于或者相当于DA的活性。因此,孪合分子的抗氧化活性可能存在"饱和度"。 相似文献
24.
目的对从食物中毒患者粪便标本以及可疑食物中分离到的病原菌,进行表型和毒力基因的鉴定以及同源性分析。方法参照食品卫生微生物学检验中副溶血性弧菌检验方法(GB/T4789.7—2008),分离鉴定副溶血性弧菌。对检出的副溶血性弧菌做血清分型、耐药性、毒力基因(toxR、trh、tdh、tlh)的测定,并用脉冲场凝胶电泳(PulsedFieldGelElectrophoresis,PFGE)测定菌株的同源性。结果从3份食物标本和5份患者粪便标本中检出副溶血性弧菌8株,8株菌分属于不同的血清型。8株菌的生物学性状和药物敏感性试验一致。8株菌的toxR和tlh均阳性,trh均阴性,tdh为粪便标本均阳性,食物标本均阴性。8株菌共产生6种PFGE带型。结论此次食物中毒由副溶血性弧菌引起,但分离于粪便标本和分离于可疑食物标本的菌株之间,其PFGE带型比较分散,可能是由副溶血性弧菌多种O抗原群混合污染引起。 相似文献
25.
26.
齐齐哈尔地区168对自然流产夫妇的细胞遗传研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本文对齐齐哈尔地区168对自然流产夫妇进行了细胞遗传学研究,检出异常染染色体核型30例,阳性率为8.92%,结合临床探讨了异常染色体与自然流产的关系,我们认为对不明原因的自然流产夫妇进行细胞遗传学检查大为有益。 相似文献
27.
毒胡萝卜素诱导大鼠皮层神经元内质网应激及丹红注射液的干预作用 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨毒胡萝卜紊诱导大鼠皮层神经元内质网应激凋亡的机制及丹红注射液的干预作用。方法:体外培养SD乳鼠皮层神经元,免疫组织化学、免疫荧光染色鉴定神经元纯度。流式细胞术Annexin V、PI双标检测凋亡率及活性caspase-3、caspase-8、caspase-7、caspase-9表达,Western Noting免疫印迹分析caspase-12、GRP78、Bcl-2、细胞色素C蛋白表达,Fura-2/AM法荧光分光光度计检测细胞内钙浓度([Ca^2+]i)。结果:SD乳鼠皮层神经元可纯化体外培养。2μmol/L毒胡萝卜素作用神经元24、48h细胞凋亡率分别是17.88%、21.38%,丹红治疗组分别是6.30%、6.11%,两组比较差异有统计学意义(P〈0.05)。毒胡萝卜素诱导神经元GRP78表达上调,剪切活化caspase-3、caspase-8、caspase-9、caspase-12,使细胞色素C表达增加,Bcl-2表达减少。丹红注射液促进细胞Bcl-2表达,抑制细胞色素C释放,减少活化的caspase-3、caspase-8、caspase-9含量,稳定游离钙浓度。结论:毒胡萝卜素诱导神经元内质网应激反应性凋亡。丹红注射液能抑制体外培养神经元内质网应激所致凋亡。 相似文献
28.
遗传性远端肌萎缩症是一种少见的神经肌肉系统遗传性疾病。中年发病,常染色体显性遗传。主要以手小肌萎缩为主,进展慢,也可有胫前肌和腓肠肌萎缩。我们在遗传咨询门诊中发现1家系4代4人发病,呈常染色体延迟显性遗传。现报告如下。 相似文献
29.
神经纤维瘤病患者染色体脆性部位的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用低叶酸的培养条件,对20例神经纤维瘤病患者及正常人的外周血淋巴细胞染色体畸变及脆性部位进行研究。结果发现①神经纤维瘤病患者平均细胞畸变率为15.90%,对照组为2.45%;实验组脆性部位检出率14.5%,对照组为2. 40%。实验组的平均细胞畸变率和脆性部位检出率均高于对照组,差异有高度显著性( P <0.005)。②实验组检出73个脆性部位,有40个与肿瘤相关断裂点对位;21个脆性部位与癌基因位点一致;17个位点上脆性部位、肿瘤相关断裂点及癌基因位点三者是一致的。以上结果提示脆性部位在神经纤维瘤病发病过程中可能起着重要的作用。 相似文献
30.
郑丽芳 《生物医学工程学进展》2011,32(1):42-44
目的探讨小剂量米非司酮对子宫肌瘤的疗效。方法 190例患者随机分为试验组95例和对照组,分别使用米非司酮和射频消融术及单纯使用射频消融术进行治疗,术后随访,观察其疗效。结果所有患者均手术成功,术后均未出现阴道大出血、感染等并发症,均无复发。二组月经量减少、痛经、下腹酸痛坠胀、贫血纠正情况及子宫大小比较,差异有统计学意义。结论与单纯手术相比,米非司酮联合射频消融术治疗子宫肌瘤效果更好。 相似文献