人骨髓来源内皮祖细胞的分离培养及生物学特性的鉴定

目的建立人骨髓来源的内皮祖细胞（EPCs）分离、培养、诱导分化与鉴定的方法,并探讨其生物学特性。方法收集腰椎间盘退变性疾病患者的髂骨骨髓24例,密度梯度离心法分离的单个核细胞接种于纤维连接蛋白包被的培养瓶,贴壁培养,EGM-2培养基诱导扩增EPCs。Dil-ac-LDL、FITC．UEA—I荧光双标、流式细胞术鉴定EPCs,计算纯度。透射电镜和管腔形成实验鉴定EPCs向血管内皮细胞（ECs）分化的能力。结果培养72h换液时可见贴壁细胞形成明显细胞克隆集落,第5天集落数增加,1周后细胞融合达80％,至第14天细胞呈铺路石样排列。培养至第7天细胞Dil-ac-LDL、FITC-UEA-I双荧光染色阳性率为（95．1±4．0）％,CD133、CD34、KDR、VE。Cadherin标记阳性率分别为（18．5±4．4）％、（45．4±7．8）％、（66．7±7．2）％、（20．5±5-3）％。培养第10天细胞透射电镜显示成熟血管ECs特有的Weibel-Palade小体。管腔形成实验表明,体外ECMatrix上培养7至12d的EPCs具有较强的管腔形成能力。结论采用密度梯度离心与贴壁培养法分离、培养的人髂骨骨髓来源的单个核细胞在特定诱导条件下可分化为EPCs,纯度较高,稳定性和重复性好。EPCs培养7至12d,具有良好的管腔形成能力。     

自体骨移植替代方法：一个古老而又年轻的话题

长期以来,自体骨移植是脊柱融合、创伤或肿瘤切除后骨缺损修复的金标准,但自体骨移植存在取材有限、失血、延长手术时间、增加病人痛苦等缺点,而且会引起取材部位并发症。为了减少自体骨供区并发症,提高骨缺损修复能力,各种具有骨传导／骨诱导潜能的自体骨替代材料应运而生,主要包括成骨性、骨传导性和骨诱导性三类产品。     

乙醇对胃癌细胞缺氧与抗凋亡蛋白的影响

目的探讨乙醇对胃癌细胞缺氧诱导因子与抗凋亡蛋白Survivin的影响。方法将人胃癌细胞BGC823分组培养,加入5%-30%终浓度的乙醇培养1-4h,并设空白对照组,提取蛋白后采用免疫印迹法检测HIF-1α蛋白及Survivin蛋白的表达。结果在BGC823细胞中HIF-1α蛋白的表达随着乙醇浓度和时间的加大而增加;Survivin蛋白表达在乙醇处理1h后随着乙醇浓度的增加表现为先增加后减少,在乙醇处理4h后随着乙醇浓度的增加反而减少。结论在胃癌细胞BGC823中乙醇通过HIF-1α途径引起细胞缺氧,通过抑制抗凋亡蛋白Survivin促进细胞凋亡。     

114例胰十二指肠切除术后早期并发症相关的危险因素分析

目的：分析胰十二指肠切除术后早期并发症的相关危险因素。方法：选择114例行胰十二指肠切除术的患者,根据术后30d内是否发生并发症,分为术后并发症组和术后非并发症组,并根据并发症严重程度不同分为轻度并发症和严重并发症。分别对术后早期并发症与严重并发症的相关因素进行统计分析。结果：共有29．8％（34／114）的病例出现术后早期并发症,11．4％（13／114）的病例发生严重并发症。术前血糖水平（≥110mg／dl）和总胆红素水平是与并发症发生相关的独立危险因素。结论：在行胰十二指肠切除术时,应加强术前胆红素和血糖的控制,以改善患者的早期预后。     

脑脊液乳酸、蛋白含量和酶活性测定在脑梗死的临床意义

目的探讨脑梗死患者的脑脊液乳酸、蛋白含量和酶活性变化的临床价值。方法应用全自动生化分析仪检测96例脑梗死患者和30例健康人的脑脊液乳酸（LA）、总蛋白、CRP含量和酶（LDH、ADA、AST）活性,并进行统计学分析。结果对照组脑脊液LA、总蛋白、CRP、LDH、AST明显低于脑梗死组（P〈0.01）,对照组脑脊液ADA低于脑梗死组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;与小梗死组、中等梗死组比较,大梗死组脑脊液LA、总蛋白、CRP、LDH、AST明显高于小梗死组、中等梗死组（P〈0.01）;小梗死组与中等梗死组比较,中等梗死组脑脊液LDH、AST明显高于小梗死组（P〈0.01）。结论脑脊液乳酸、蛋白含量和酶活性变化对脑梗死患者的梗死体积的估计、疗效观察以及预后判断有重要的临床意义。     

30例乳腺癌患者级联激活的免疫细胞治疗后细胞免疫功能变化

目的观察乳腺癌患者CAPRI细胞治疗前后T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义.方法采用流式细胞术（FCM）检测30例乳腺癌患者化疗6周期后接受CAPRI细胞治疗1周期前后的淋巴细胞亚群并进行对比研究.结果接受CAPRI细胞治疗1周期后乳腺癌患者的外周血中的CD3＋细胞、CD4＋细胞、NK细胞的数量与接受CAPRI细胞治疗前相比均有较明显的提高（P〈0.05）,而CD8＋细胞的数量与接受CAPRI细胞治疗前相比没有较明显的改变（P〉0.05）.结论乳腺癌患者化疗结束后应用CAPRI细胞治疗对乳腺癌患者的细胞免疫功能具有明显改善作用.     

大鼠胚胎神经干细胞的分离培养及鉴定研究

目的探讨大鼠胚胎神经干细胞（NSCs）的分离、培养、分化及鉴定的条件与方法。方法分离孕14～16dSD大鼠胚胎脑皮质及皮质下区域NSCs,无血清培养基（DMEM／F12,含bFGF、EGF、B27等）条件下培养,通过有限稀释法克隆、传代,含血清培养基诱导分化,免疫组织化学法鉴定NSCs及诱导分化后的细胞。结果体外培养的NSCs能稳定增殖成神经干细胞球并传代（nestin染色阳性）,经诱导可分化为神经元细胞（NSE染色阳性）、星形胶质细胞（GFAP染色阳性）和少突胶质细胞（CNP染色阳性）。结论采用无血清培养基中加入特定生长因子的培养技术,可在体外大量培养出稳定增殖并具有多向分化潜能的大鼠胚胎NSCs,为进一步研究NSCs的生物特性及应用奠定了基础。     

预防性抗菌药物应用对乙型脑炎患儿预后的影响

目的：研究并确定抗菌药物的预防性应用对乙型脑炎患儿预后的影响。方法：72例乙型脑炎患者被随机分为治疗组和对照组,治疗组给予对症支持等常规治疗,而对照组除常规治疗外,给予抗菌药物预防可能发生的细菌感染,观察患儿预后、发热和意识障碍持续时间、发生感染的数量等有无差异。结果：治疗组和对照组在预后、发热和意识障碍持续时间,总的感染例次上没有显著性差异．而对照组发生真菌感染例次显著高于治疗组。结论：抗菌药物的应用不能改变乙型脑炎病人的预后、也不能减少细菌感染的发生率,还可能增加真菌感染的机会,在乙型脑炎的治疗中没有必要预防性应用抗菌药物。     

不典型脾外伤一例误诊原因分析

脾脏是最易受损的实质性脏器,脾外伤居腹腔内脏器损伤的30％～60％,以往常因诊治的延误而导致患者死亡,病死率高达10％～25％。脾破裂在病理上可分为中央破裂、被膜下破裂和真性破裂3种。中央破裂是脾实质内部破裂出血,甚少见。被膜下破裂相对比较多见,由于脾被膜保持完整,血液积于被膜下而不发生腹腔内出血的临床表现。