放射损伤,烧伤和放烧复合伤心肌线粒体脂质过氧化的加强效应

Ｗｉｓｔａｒ大鼠经６Ｇｙ＾６０Ｃｏ γ线和／或３０％总体表面积（ＴＢＳＡ）Ⅲ度烧伤致放射损伤（ＲＩ）、烧伤（ＢＩ）和放烧复合伤（ＲＢＩ）。观测伤后１、３、８、１６和２４ｈ大鼠心肌线粒体脂质过氧化和抗氧化酶活力的改变，发现三种伤类均表现为脂质过氧化代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）含量伤后１ｈ即明显升高，２４ｈ降至对照组（Ｃ）水平；超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力在整个实验过程中维持在明显低于Ｃ组的水平；ＢＩ组和     

Cardiotoxin肌损伤模型的形态学观察

目的 建立由Cardiotoxin所致的肌损伤模型并了解损伤部位自然修复的情况，为研究肌损伤的再生及修复作用奠定基础。方法 将Cardiotoxin按8μg／g体质量局部注入SCID小鼠股四头肌中，分别观察不同时相点(24h、7d、2周、4周和6周)损伤部位的病理改变。结果 注射24h后可见肌细胞变性坏死，胞浆内有空泡形成；7d后肌纤维发生明显断裂，变性坏死加重，并出现钙化；2周后变性坏死钙化加重达到顶峰；4周后变性坏死钙化依然存在，但已可见部分肌纤维再生；6周后变性坏死已不明显，钙化仍存在，肌细胞大部分再生。结论 成功地建立了Cardiotoxin所致的肌损伤模型，该模型稳定、简便、易控制，且重复性好。     

葡萄糖水平对CEES染毒16 HBE细胞能量代谢的影响及其机制

目的：比较在高糖和低糖培养条件下,经半硫芥（CEES）染毒后支气管上皮细胞（16HBE）能量代谢的变化。方法采用高糖（4．5 mg/ml）和低糖（1．1 mg/ml）两种不同培养基培养16HBE细胞。 MTS法比较细胞增殖和CEES染毒后6 h细胞活性差异;用不同剂量CEES染毒两组细胞,24 h后HPLC检测胞内ATP、ADP、AMP含量,并计算ATP/ADP比值、腺苷酸池（总腺嘌呤核苷酸, total adenine nucleotides , TAN）及能荷值（能量负荷值,energy charge, EC）,Western印迹检测线粒体能量代谢功能酶COX-10和ISCU变化;流式细胞仪检测0．5 mmol/L CEES染毒后5、8、12、24 h时相点线粒体膜电位（MMP）变化。结果低糖培养的16HBE细胞的增殖明显增加,能量代谢指标ADP、TAN、COX-10和ISCU显著高于高糖组。高于0．5 mmol/L染毒剂量的CEES能显著降低高糖、低糖培养的16HBE细胞的活性,且在1．0 mmol/L下两组间差异有显著意义。高糖组在0．5、1．0 mmol/L染毒24 h后,ATP、ADP、TAN显著增高,而ATP/ADP比值及EC显著降低。低糖组在1．0 mmol/L染毒24 h后,ADP、AMP、TAN显著低于染毒前,而ATP/ADP比值及EC显著高于染毒前。在0．5 mmol/L CEES染毒下,高糖组线粒体膜电位在8～12 h显著增加,其后至24 h时恢复至正常水平。低糖组MMP在5 h有一过性显著降低,8 h后与染毒前已无显著差异。高糖培养时,16HBE细胞的氧化磷酸化相关蛋白COX-10和ISCU蛋白水平显著低于低糖培养的细胞;0．5～1．0 mmol/L CEES染毒24 h后,两者的水平显著升高,与低糖组已无显著差异。1．0 mmol/L CEES染毒24 h后,低糖组COX-10和ISCU水平显著降低。结论糖浓度差异会影响16 HBE细胞的能量代谢、增殖和CEES损伤后能量应激反应。高糖可能通过增加细胞的应激反应能力抵抗CEES的细胞毒性作用。     

以创新和应用能力为目标的防原医学教学改革探索

根据军事医学教学以培养适应现代化建设和国防卫生事业需要的高素质人才为目的,在防原医学教学中,以学员为认知主体,充分突出“四个结合、四个为主”的军事医学特色,综合应用多种教学方法,有效提高了教学质量,为培养高素质的现代化医学人才打下良好基础。     

汶川大地震后遗体处理中卫生防疫工作的体会

2008年5月12日,四川省汶川县发生了8级特大地震,给灾区人民生命和财产造成了特别重大的损失.由于时值初夏,地震灾区午间温度高,人和动物尸体在细菌作用下很快发生腐败,产生恶臭.其中尸碱(包括尸胺、腐胺、神经碱、草毒碱等)可致人体中毒、污染水源,为防止由于饮用被腐烂尸体污染的水而致中毒,水源周围必须彻底清除掩埋的尸体,并进行消毒处理.     

芥子气损伤机制研究进展

芥子气在第一次世界大战作为化学战剂使用,造成大量的人员死伤,是外国军队装备主要的毒剂之一.芥子气中毒机理虽早有研究,但迄今尚未完全阐明[1].目前对芥子气损伤机制主要集中在DNA烃化和DNA链断裂、多聚ADP核 糖聚合酶(PARP)激活、谷胱甘肽耗竭、炎症反应、蛋白水解酶激活、细胞凋亡、钙紊乱、蛋白水解酶激活和免疫反应等几方面.为全面认识芥子气的损伤效应及制订相应的防治策略提供科学依据,本文对近年在芥子气损伤机制方面的研究进展综述如下.     

基因捕获成体干细胞及鉴定的初步研究

目的 探讨基因捕获技术应用于成体干细胞的可行性. 方法 线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY,利用Lipofectamine2000转染包装细胞PA317,LacZ染色证明转染效率后,收集病毒上清,感染种植于24孔板的小鼠成肌干细胞系C2C12、人骨髓间充质干细胞(hBMSC).为排除潮霉素B筛选的假阳性干细胞,以C2C12、hBMSC细胞基因组DNA为模板,PCR 扩增ROSAFARY上LacZ部分序列(560 bp)进行鉴定. 结果 ROSAFARY脂质体转染PA317细胞后LacZ染色, 400倍镜下可见2-5个蓝色细胞/视野.病毒上清感染种植于24孔板的C2C12和hBMSC, 4 d后经LacZ染色,C2C12可见6个蓝色细胞/孔,400倍镜下hBMSC可见4-5个蓝色细胞/视野.最佳PCR鉴定参数为基因组模板量2 μg, 退火温度55.5 ℃,Mg2 浓度3 mmol/L. 结论 逆转录病毒基因捕获载体感染多种成体干细胞后 LacZ染色显示可成功捕获激活状态启动子驱动的基因,为基因捕获应用于成体干细胞分化及恶性转化分子机制的研究奠定了基础.     

JAB1表达下调对LPS诱导炎性因子TNF-α和IL-6的影响

目的 初步探讨JAB1基因表达下调对炎症反应的影响.方法 构建特异性针对小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体,转染到RAW264.7细胞中降低其JAB1基因的表达,观察LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度变化.结果 成功得到小鼠JAB1基因的RNA干扰真核表达载体(pPUR/U6-siJAB1),将其转染RAW264.7细胞后使JAB1的蛋白表达水平显著下降,经LPS刺激后培养上清中炎性因子TNF-α和IL-6的浓度较正常细胞明显降低.结论 小鼠JAB1基因的低表达使RAW264.7细胞在经LPS诱导后的炎性因子产生降低,推测其在炎症反应中对致炎因素的影响更大.     

人骨髓间充质干细胞的分离培养及部分生物学特性的实验研究

目的 建立一种体外分离和培养人骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法，并探讨其部分生物学特性。方法 无菌条件下抽取正常健康人骨髓3-5ml，经密度梯度离心得到单个核细胞，接种入含10％胎牛血清的IMDM培养液，测定其生长曲线，并观察其贴壁率、细胞周期和超微结构变化。结果 培养的MSCs3-4h开始贴壁，贴壁率为60％-80％，2-3d即可见集落形成，14d左右融合90％以上，基本上为梭形成纤维细胞状形态，流式细胞检测显示有70．03％的细胞处于G0/G1期，电镜观察表现出早期细胞的特点。结论 成功地建立了一种分离培养人骨髓MSCs的方法，获得的细胞形态单一、生长稳定、增殖较快，为进一步应用MSCs促进创伤修复提供了实验基础。     

多用途基因捕获C3H/10T1/2细胞阳性克隆库的构建及鉴定

目的: 以10T1/2细胞为间充质干细胞模型,构建用于间充质干细胞分化及恶性转化分子机制等研究的基因捕获阳性克隆库.方法: Dra I线性化逆转录病毒基因捕获载体ROSAFARY后,与pIRES2-EGFP用脂质体共转染phoenix细胞,LacZ染色证明转染成功后收集病毒上清感染10T1/2细胞.经潮霉素筛选获得阳性克隆,为排除假阳性克隆用LacZ部分片段PCR进行鉴定.结果: ROSAFARY脂质体转染phoenix细胞后48 h,GFP指示的转染效率约为20%～30%,LacZ染色有大约10%的阳性率.150 mg/L潮霉素筛选病毒感染的10T1/2细胞,挑取药物抗性克隆,PCR鉴定后获得43个阳性克隆,LacZ染色5个为捕获基因高表达细胞克隆.结论: 基因捕获技术建立非胚胎干细胞的克隆是可行的,成功建立的基因捕获阳性克隆库为应用基因捕获技术揭示成体干细胞分化及恶性转化分子机制奠定了基础.