烟酰胺对体外培养兔椎间盘细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响

目的 观察烟酰胺(Nia)对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的体外培养的退变兔椎间盘组织内细胞凋亡及能量代谢相关基因表达的影响.方法 构建兔椎间盘组织凝胶培养模型,分为正常对照组(不加入药物),烟酰胺组(加入0.5 mg/ml烟酰胺),退变组(加入10 ng/ml IL-1β)和治疗组(加入10 ng/ml IL-1β及0.5 mg/ml烟酰胺).培养2周后对各组标本分别行TUNEL染色,Fas、Caspase 3、Bcl-2、HIF-1α、GLUT-1及VEGF免疫组化染色.结果 TUNEL染色示治疗组阳性细胞染色率较退变组有所下降.Fas、Bcl-2染色示治疗组阳性细胞率均与退变组接近(均P>0.05).Caspase 3染色示治疗组阳性细胞率较退变组明显降低(P<0.05).HIF-1α、VEGF染色示治疗组阳性细胞率较退变组均明显降低(均P<0.01).GLUT-1染色示治疗组阳性细胞率较退变组轻微下降(P>0.05).结论 烟酰胺可以抑制IL-1β诱导的椎间盘细胞凋亡,改善IL-1β导致的椎间盘能量代谢障碍.     

p16ink4a/hRb1对骨肉瘤细胞周期协同的调控作用

目的 观察外源性p16ink4a／hRb1基因联合导入骨肉瘤细胞后，对其细胞周期的协同调控作用。方法 利用本室构建的pIRES-p16ink4a-hRb1、pIRES-p16ink4a与pIRES-hRb1质粒，脂质体介导转染p16缺失，hRb1表达阳性的骨肉瘤细胞株MG63，G418筛选获得抗性克隆，通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot半定量分析外源基因表达；SubG1法流式细胞术分析细胞周期特异性和凋亡率，噻唑蓝（MTT）比色法与细胞生长曲线观察细胞增殖情况。结果 外源基因在靶细胞mRNA和蛋白水平分别有独立表达。与对照组比，所有外源性基因导入组细胞周期均显著阻滞在G1期（P〈0．01）并存在凋亡，且双基因导入组凋亡率分别比单基因组高4．04和6．94倍（P〈0．01）；所有外源性基因导入组各时间点细胞生长抑制率均显著上升，且双基因导入组细胞高于单基因组（P〈0．01）。结论 p16ink4a／hRb1联合导入骨肉瘤细胞后，干扰了p16ink4a-CyclinD1／CDK-hRb1负反馈循环，比单基因导入更能抑制肿瘤细胞生长和杀灭肿瘤细胞。     

中华长城椎弓根螺钉系统治疗胸腰椎爆裂骨折

目的 介绍中华长城椎弓根螺钉系统(CGWS)在胸腰椎爆裂性骨折治疗中的效果。方法 隙采用中华长城惟弓根螺钉系统治疗胸腰椎爆裂性骨折18例。结果 术后及随访期间拍X线片测定Cobb角、椎体成角、上下终板成角、椎体前缘高度与正常高度的比值均明显改善，随访期间测量以上结果与术后相比无明显变化。结论 中华长城椎弓根螺钉系统足一种新型的多功能脊椎三维矫形内固定器械，具有材料优良、矫正效果显著、安装操作方便、固定确切、安全可靠等优点。     

骨质疏松性骨折外科治疗新进展

骨质疏松性骨折好发于桡骨远端、椎骨及髋部.外科治疗的难点在于复位固定困难和再骨折.近年外科治疗方法已有新进展,主要表现在桡骨远端骨折治疗方面的髓内骨水泥、外固定联合拱形支撑钉的应用;椎骨骨折等治疗方面经皮椎体成形术、经皮椎体后凸成形术、经皮气囊辅助椎体成形术的进展提高了手术的安全性和有效性,及新型骨水泥的研制应用;髋部骨折治疗方面,经皮微创加压钢板、羟基磷灰石涂层钉、近端股骨钉等的应用.这些治疗方法符合加强固定、向微创发展、减少并发症、支持早期功能锻炼等要求.该文就近年骨质疏松性骨折外科治疗的一些最新观点和进展作一综述.     

中华长城椎弓根螺钉系统对胸腰椎骨折后脊髓功能的恢复作用

目的观察中华长城椎弓根螺钉系统(ChinaGreat-WallSpinaSystem)在胸腰椎爆裂性骨折中的应用效果,以探讨其对骨折后脊髓功能的恢复作用。方法采用中华长城椎弓根螺钉系统治疗胸腰椎爆裂性骨折18例,并用X线检查评估Cobb角、椎体成角、上下终板成角椎体前缘高度。结果术后及随访期间拍X片测定Cobb角(由术前平均7.8°到术后平均1.3°)、椎体成角(由术前平均-17.2°到术后平均-3.2°)、上下终板成角(由术前平均-15.6°到术后平均3.9°)、椎体前缘高度与正常高度的比值均明显改善,随访期间测量以上结果与术后相比无明显变化。最后一次随访按Frankel分级评估,4例A级Frankel分级无改变,其余均改善1～2级。3例C级和4例D级恢复到E级,2例B级和3例C级恢复到D级,1例B级恢复到C级,1例A级恢复到级,4例A级Frankel分级无改变,但感觉平面有所下降。结论中华长城椎弓根螺钉系统(CGWS)能有效减轻胸腰骨折后的脊椎移位,促进脊髓功能的恢复。     

非接触共培养脊索细胞诱导骨髓间充质干细胞向类软骨细胞分化的实验研究

目的:分离兔髓核脊索细胞(notochordal cells,NC)及骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),通过非接触共培养探讨NC对MSC细胞表型的影响。方法:4～6周龄新西兰兔8只,取胸腰段脊柱的髓核,用密度梯度离心提取NC,同时取其股骨骨髓用FICOLL液分离MSC,将NC和MSC等比例(1∶1)通过transwell培养板进行非接触共培养作为实验组,单纯MSC细胞培养作为对照组,光镜下观察细胞的生长情况。对两组的MSC行免疫组化及RT-PCR、Western-blot检测MSC细胞表型的改变情况。结果:原代NC呈圆形或椭圆形,细胞体积大,细胞增殖不明显;MSC贴壁生长,呈三角形或梭形,漩涡状排列。甲苯胺蓝染色:对照组MSC细胞核淡染,胞体染色不明显,染色阴性;实验组MSC可见从第3天开始胞体及胞外基质出现紫红色,第5天染色更加明显。Ⅱ型胶原免疫组化对照组MSC淡染,细胞形态不清楚;实验组第3天出现MSC内出现棕黄色深染,随着时间推移细胞染色加深呈阳性表现。RT-PCR检测,经过5d非接触共培养后实验组蛋白聚糖的基因表达为对照组的2.35倍(P<0.05),Ⅱ型胶原的基因表达为对照组的1.61倍(P<0.05),对照组Ⅰ型胶原的基因表达为实验组的2.56倍(P<0.05)。Western-blot检测后发现:经过5d非接触共培养,实验组蛋白聚糖的含量为对照组的1.61倍(P<0.05),Ⅱ型胶原的表达为对照组的10.04倍(P<0.05)(P<0.05)。结论:在非接触共培养条件下脊索细胞可以诱导骨髓间充质干细胞表型发生变化,向类软骨细胞方向分化,这将为组织工程化髓核的种子细胞筛选提供新选择。     

采用下腹正中切口手术治疗骨盆前环复杂骨折

目的探讨采用下腹正中切口（Stoppa入路）手术在治疗骨盆前环复杂骨折中的临床经验与治疗效果。方法对2008年2月～2009年5月应用Stoppa入路治疗的11例骨盆前环复杂骨折患者临床资料进行总结。按照Tile分类：B2型6例,B3型3例,C2型2例。手术采用Stoppa入路,其中4例采用前环钢板固定,4例采用前环钢板和外固定器固定,3例采用前环钢板和骶髂螺钉固定。结果 Stoppa入路平均切口长度12cm（10～14cm）,平均手术时间100min（80～120min）,平均出血500ml（300～800ml）。11例前环损伤均复位满意,无手术并发症。9例术后获得8～10个月随访,均获骨性愈合。结论 Stoppa入路具有操作简单、解剖清晰、切口小、并发症少、恢复快的特点。在治疗骨盆前环复杂骨折时,Stoppa入路是非常合适的选择。     

老年骨质疏松骨折血清铁水平的测定及临床意义

目的：探讨老年骨质疏松骨折患者血清铁水平并分析其临床意义。方法：分别检测121例老年（60岁以上）骨质疏松骨折患者,120例中青年（50岁以下）外伤骨折患者以及70例正常人腰椎骨密度T值和血清铁蛋白水平。结果：骨质疏松骨折患者血清铁蛋白均值为253．8ng／ml,明显高于中青年骨折组（79．9ng／m1）和健康人群组（92．4ng／m1）（P〈0．01）;骨质疏松骨折患者腰椎T值为～2．26,亦明显高于中青年骨折组（0．36）和健康人群组（-0．16）（P〈0．01）。结论：老年骨质疏松骨折患者中血清铁水平明显升高,提示血清铁水平升高是老年骨质疏松的重要相关因素。     

反义转化生长因子β1表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞增殖活性的影响

目的:构建反义TGFβ1基因,探讨阻断肿瘤细胞TGFβ1自分泌环对细胞增殖活性的影响.方法:采用RT-PCR获取人TGFβ1 cDNA后,构建反义TGFβ1表达载体pcDNA3-TGFβ1(-).将pcDNA3-TGFβ1(-)转染骨肉瘤细胞MG-63,采用流式细胞仪检测阻断TGFβ1自分泌环对肿瘤细胞增殖活性的影响.结果:pcDNA3-TGFβ1(-)转染骨肉瘤细胞后,反义基因转染细胞MG-TGFβ1(-)的G0/G1期细胞从56.2%和60.1%增至71.6%,S期细胞从19.1%和17.8%降至12.9%,细胞增殖活性明显降低.结论:通过阻断TGFβ1自分泌环以降低骨肉瘤细胞表达的TGFβ1,可以明显抑制肿瘤细胞增殖活性.进一步的深入研究,必将为骨肉瘤疗效的提高开辟新的研究方向.     

透明质酸与不同剂量塞莱希布并用改善膝骨关节炎疼痛及僵硬症状的效果评估

目的：观察透明质酸与不同剂量塞莱西布联用后对膝骨关节炎疼痛，僵硬及日常活动的总体疗效，探讨其合理联用方式。方法：150例膝骨关节炎患者随机分成5组，每组30例。分别接受单纯透明质酸，透明质酸+小剂量塞莱希布，透明质酸+自主剂量塞莱希布，常规剂量塞莱希布和自主剂量塞莱希布5种方案的治疗，于治疗开始，第1，2，4，6，8，10，12，14，16周纪录患者的WOMANC评分值，每周服用的塞莱希布剂量，治疗结束时塞莱希布的总用药量及患者对治疗方案的总体满意程度。结果：透明质酸组有7例因疗效不佳中止治疗，其余患者均完成治疗，透明质酸组在第4周，透明质酸+小剂量塞莱希布组在第2周，其余3组在第1周症状有明显改善，其后一直到第16周，各组患者症状都能得到良好控制，总体用药量透明质酸+自主剂量塞莱希布组明显低于其余使用塞莱希布的3组。治疗满意度优良率除透明质酸组外，其余4组均&;gt;90％，满意度达优率常规剂量塞莱希布组明显低于透明质酸+小剂量塞莱希布组和透明质酸+自主剂量塞莱希布组。结论：透明质酸与自主剂量塞莱希布并用后，能迅速缓解膝骨关节炎症状，在维持良好疗效的同时，还能明显降低患者对塞莱希布的常规需要量，最大限度的降低在治疗骨关节炎的长期过程中可能出现的毒副作用。