抗霉素A抑制PCI2细胞线粒体COⅡ基因表达

采用不同浓度的抗霉素A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂)处理PC12细胞，利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及MTT法进行细胞活性检测。实验证明，当抗霉素A的浓度达到150μmol／L时，PC12细胞开始出现损伤；进一步采用RNA斑点杂交和RT—PCR技术分析发现抗霉素A所致的细胞损伤和线粒体内细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ(COⅡ)基因表达下降有关。本研究证实线粒体介导的活性氧的产生能早期诱导线粒体细胞色素氧化酶的活性的改变，逐步引起PC12细胞损伤。     

Nix和miR-520h对神经胶质瘤发生的影响及相互作用

目的　通过综合分析肿瘤标本中基因和蛋白表达,及体外生物学作用的检测,来评价胶质瘤中Nix蛋白的作用以及Nix蛋白与miR-520h的关系。 方法　选取46例胶质瘤标本,RT-PCR检测miR-520h基因的表达,Western blotting检测Nix 蛋白的表达;培养U251胶质瘤细胞,Western blotting检测Nix蛋白的表达;构建靶向Nix基因的shRNA敲除U251细胞中Nix基因（Nix-kn）, Western blotting检测Nix, IKKα, i-κBα和p-NF-κB/p65 等蛋白的表达水平; has-miR-520h抑制剂转染U251细胞,Western blotting检测Nix, IKKα, i-κBα和p-NF-κB/p65 等蛋白的表达水平。 结果　胶质瘤标本的基因和蛋白检测表明,miR-520h的高表达伴随着Nix蛋白的高表达;体外实验结果表明,与正常培养的U251相比,缺氧培养的U251细胞Nix表达较高;与Nix-kn组相比,Nix-wt组胶质瘤细胞Nix和p-NF-κB/p65表达均明显增高,而NF-κB活性抑制剂蛋白i-κBα表达降低;200 nmol/L的has-miR-520h抑制剂处理细胞后,与正常对照组比较, Nix蛋白表达显著减少,而p-NF-kappaB/p65蛋白表达显著增加。 结论　在神经胶质瘤的发生发展中miR-520h与Nix蛋白的表达相关;miR-520h可能通过促进Nix合成,从而成为一个强大的肿瘤激活剂。     

不同基质材料修饰的Sylgard184与C2C12细胞的相容性

目的 筛选能提高硅酮橡胶弹性体(Sylgard184)与C2C12相容性的理想基质材料. 方法Sylgard184双组分以10:1的比例均匀混合,倒入6孔板的其中4孔,室温下静置固化,其余2孔做为空白对照培养组(A组);固化后的Sylgard184表面依次经过以下处理:I型胶原包被(B组)、层黏连蛋白包被(C组)、多聚赖氨酸包被(D组);未经包被(E组),每组共6个样本.在不同基质材料修饰的Sylgard 184表面培养C2C12细胞,利用倒置显微镜观察5组C2C12细胞的增殖、分化状态,流式细胞术(FCM)检测增殖培养48h后C2C12细胞的分裂增殖情况,RT-PCR检测增殖和分化培养48h后C2C12细胞内MyoD、myogenin mRNA的表达.结果 Sylgard184材料存在细胞毒性,E组接种的C2C12细胞在24h内全部漂浮死亡;D组的大多数细胞出现死亡,仅少数贴壁存活;而B、C两组材料包被后明显减少Syhgard 184的毒性,增强其表面与C2C12细胞的相容性,且C组细胞处于合成期的百分比以及增殖期的MyoD和分化期Myogenin基因mRNA的表达水平均显著高于A、B两组(P<0.05). 结论 经层黏连蛋白包被后的Sylgard184表面更有利于C2C12细胞的增殖及分化活性的表达.     

阿尔茨海默病与线粒体DNA变化的氧应激

阿尔茨海默病 (ＡＤ)的研究已成为医学研究的一个热点 ,各国学者从不同角度对ＡＤ进行了多方位的研究 ,然而 ,引起ＡＤ的最终机制仍还在探索之中[1 3 ] 。线粒体内的氧化磷酸化过程是体内氧自由基的主要来源 ,自由基在ＡＤ发生中的作用 ,已日益受到关注 ;近几年来 ,ＡＤ与线粒体脱氧核糖核酸 (ｍｔＤＮＡ)氧应激关系的研究 ,成为探讨ＡＤ发病机理的新动向[1] 。一、β 淀粉样沉积蛋白 (β ａｍｙｌｏｉｄ ,Ａβ)与氧应激ＡＤ的自由基损伤的事实包括ＡＤ病人中出现了较高的蛋白质氧化作用和脂质过氧化作用 ,并且Ｃｕ/Ｚｎ ＳＯＤ(超氧化物歧…     

乳兔窦房结的定位及其取材和纯化培养

目的　定位乳兔窦房结的位置并取材和纯化培养 ,观察并初步判断培养窦房结细胞中起搏细胞的光镜、电镜结构特点。方法　新生 2 4h内乳兔心脏连续石蜡切片 ,HE染色 ,光镜下判断窦房结的位置并测定、计算其大小 ;差速贴壁结合BrdU处理行窦房结组织原代细胞纯化培养 ,观察培养窦房结细胞形态变化 ,搏动频率及光镜、电镜结构。结果　乳兔窦房结位于上腔静脉根部前壁向下至界沟后外约 0 .32mm处 ,呈倒置的三角形 ,大小 1 .51mm× 0 .68mm× 0 .0 7mm ;培养的窦房结细胞主要有3种形态细胞 :梭形、蜘蛛形、多边形 ,其中梭形细胞最多 (59.6 %± 7.3 % ) ,搏动频率最快 (1 4 5± 9)次 /min ,肌原纤维稀少 ,细胞器不发达 ;而心房肌细胞培养无此特征细胞。结论　培养的乳兔窦房结细胞中 ,细胞体积小 ,搏动频率快 ,所占比率高的梭形细胞是窦房结的起搏细胞。     

C2C12细胞诱导构建三维骨骼肌组织

目的 利用修饰并铸型后的Sylgard 184凹槽与C2C12细胞复合培养、诱导分化,获取三维极性骨骼肌组织. 方法 Sylgard 184双组分以10∶1的比例均匀混合并倒板,室温下静置固化并对其表面压槽铸型,Hank液冲洗凹槽,Matrigel和胶原的混合液均匀铺被凹槽底部,置生物安全柜待细胞基质自然干燥、紫外线照射消毒1h以上时接种C2C12细胞悬液,细胞增殖约80%汇合时改用分化培养基进行分化诱导,倒置显微镜下观察肌管的分化状态, RT-PCR方法检测肌管内myogenin和desmin基因mRNAs的表达,免疫荧光检测生肌转录因子myogenin和desmin蛋白的表达,扫描电镜观察肌管形态和肌管间的连接. 结果 C2C12细胞在Sylgard 184弹性体铸型压槽中培养分化7d后,倒置显微镜下可见肌管呈极性分化,且肌管之间融合紧密;21d后,扫描电镜检测可见肌管之间排列紧密且相互重叠,形成膜样结构,厚度可达0.15mm,具有三维性;RT-PCR、免疫荧光检测证实极性分化肌管内具有myogenin和desmin的阳性表达. 结论 修饰并铸型的Sylgard 184凹槽具有一定的方向引导效应,能促进C2C12细胞分化形成多核肌管,且肌管呈极性重叠排列,形成三维极性骨骼肌组织结构.     

用激光扫描三维重建骨的图像

人体解剖学是一门形态科学,给学习者以直观性强的感受,特别重要。传统教学中采用方法有：教科书插图、彩色图谱、挂图、模型、投影、录像、实体标本等。多媒体教学目前正逐步取代传统的教学手段,成为人体解剖学教学的     

γ射线照射诱导大鼠肝细胞线粒体自噬与再生的研究

目的 探讨线粒体自噬在细胞损伤后再生中的作用。方法 在体外利用γ射线照射诱导大鼠肝细胞损伤，在亚细胞水平上观察肝细胞的损伤修复情况与线粒体自噬的关系，并利用分子生物学技术进行DNA凋亡片段的分析和线粒体RNA的RT-PCR分析。结果 受损线粒体清除过程存在线粒体自噬，随着修复过程的进行细胞DNA凋亡程度下降，细胞自噬现象减少，细胞凋亡和线粒体自噬同时存在于损伤细胞中，通过RT-PCR分析发现肝组织的损伤修复与线粒体自噬后的线粒体再生有关。结论 线粒体自噬可能为组织的损伤修复提供某种分子信号，促使新的线粒体再生。     

《外科与放射解剖学》杂志文题摘要（2005年第27卷第3期）

1Neurovascular relationships of the approaches for arthroscopictotal trapeziectomy with ligamentous stabilization S.Durand·O.Gagey·A.C.Masquelet·P.Thoreux大多角骨全切除并韧带成形术关节镜入路与神经血管的关系研究汤普森悬吊成形术大多角骨全切除的关节镜入路与神经血管关系。选择15例术前摄片确诊患有腕掌关节炎的新鲜尸体,其中男性12例、女性3例(平均年龄87岁),使用小关节用关节镜。两种入路用于大多角骨-掌骨关节,尺侧入路定位于拇短伸肌肌腱的尺侧缘;桡侧入路定位于桡侧腕屈肌肌腱与拇长展肌连线的中点。还研究了…     

脑缺血大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的细胞构筑

目的：观察大鼠尾壳核一氧化氮合酶神经元的分布，以及脑缺血后其免疫阳性神经元细胞构筑学的变化。 方法：实验于2004／2005在南方医科大学和暨南大学进行。取36只SD大鼠随机分为对照组和脑缺血组，每组18只。脑缺血组用双侧颈总动脉阻塞法建立脑缺血模型，对照组行假手术，不结扎颈总动脉。分别于造模后3，7，30d处死动物取材，每个时间点6只。ABC法显示神经元型一氧化氮合酶神经元，图像分析系统测尾壳核阳性神经元数目和大小（神经元以〉25μm为大型，25～15μm为中型，〈15μm为小型）。 结果：经补充后36只大鼠进入结果分析。④神经元型一氧化氮合酶阳性神经元大小和分布不均一，尾壳核背外侧胞体相对较小，数目较多，而腹内侧体积虽大，但较稀疏。②神经元型一氧化氮合酶阳性神经元数目：对照组各时间点无明显变化，脑缺血组缺血后7，30d显著低于对照组（P〈0．01）。③神经元型一氧化氮合酶阳性神经元大小：对照组以中型细胞为主，其次为小型神经元，大型细胞少，三类神经元在不同的时期比例恒定。脑缺血组在缺血后3和7d，中小型神经元变化较明显，其中大型和中型神经元逐渐下降，在缺血30d时中型神经元比例显著低于对照组和缺血后3，7d（P〈0．01），而小型神经元比例显著高于对照组和缺血后3，7d（P〈0．01）。 结论：脑缺血后尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元减少，而且中型细胞减少为主，小型细胞所占比例相对增多。