Cox7a2荧光载体构建及其在小鼠睾丸Leydig细胞表达和定位研究

目的构建Cox7a2的荧光表达载体,研究其在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达和定位。方法原代培养小鼠睾丸Leydig细胞并利用3β-HSD染色法鉴定,应用PCR方法研究Cox7a2在小鼠睾丸Leydig细胞中的表达。利用BglⅡ和EcoRⅠ酶切位点把Cox7a2克隆到pEYFP-N1。细胞转染和细胞荧光显微镜技术观察YFP-Cox7a2定位。结果Cox7a2表达在原代培养的小鼠睾丸Leydig细胞中。绿色荧光的YFP-Cox7a2和红色荧光的线粒体标记物- Mitotracker有完全的共定位。结论Cox7a2在小鼠睾丸Leydig细胞表达,成功构建Cox7a2真核荧光蛋白表达载体,明确YFP-Cox7a2定位在Leydig细胞的线粒体。这些结果将对老年男性睾丸间质细胞合成功能障碍的研究提供重要的信息。     

中老年男子雄激素部分缺乏综合征机制研究进展

随着人类社会生活水平和医疗保健水平的提高,全球人口平均寿命快速增长。据WTO预测,今后25年超过65岁的老年人将增加82％。我国老年人口所占比例也正在显著增加,估计2025年将超过人口总数的10％。衰老使老年人群中各种疾病的发生比率增高,关注老年疾病,提高老年人生活质量,以延长健康寿命已成为全球关注的医学重要课题。 睾丸作为男性主要生殖器官,主要功能是生成精子、合成并释放雄性激素—睾酮。老年人睾丸功能的     

老年人睾丸组织退化的基因表达谱研究

目的：研究老年人睾丸组织基因表达谱变化，为研究老年人睾丸功能衰退机制奠定基础。方法：知情同意下获取正常青年人和老年人睾丸组织标本各3例，采用QIAGEN RNA提取试剂盒提取总RNA，分别等量混合后制备探针。利用ClonTech公司生产的包含8000个已知基因的人类cDNA基因芯片[Atlas Plastic Human 8K Microarray(cat．#7905—1)]筛选差异表达基因。按基因功能分类方法对老年睾丸组织中差异表达的基因进行归类分析。用RT—PCR、T—A克隆测序等方法选择目的基因，验证基因芯片结果。结果：筛选到差异表达基因117个(1．46％)，83个基因在老年睾丸组织中表达下调，34个基因表达上调。在表达下调的基因中，代谢相关基因16个(19．3％)，与基因和蛋白表达相关的基因18个(21．7％)，信号通路相关基因16个(19．3％)，细胞分化相关基因19个(22．9％)，细胞结构和运动相关基因6个(7．2％)，细胞或内环境稳态相关基因4个(4．8％)，未知功能基因4个(4．8％)。在表达上调的基因中，代谢相关基因3个(8．8％)，与基因和蛋白表达相关的基因10个(29．4％)，信号通路相关基因2个(5．9％)，细胞分化相关基因11个(32．4％)，细胞结构和运动相关基因8个(23．5％)。RT—PCR及T—A克隆测序进一步证实呼吸链相关的基因cox7a2在老年睾丸组织显著上调，atp50显著下调。结论：老年人的睾丸组织中基因表达谱发生了明显变化，老年人睾丸功能衰退与多种基因表达变化有关，其中呼吸链功能相关cox7a2、atp50基因的显著差异表达可作为重要目的基因，可能对进一步研究睾丸功能衰退的机制具有重要意义。     

重组蛋白Cox7a2原核表达及鉴定

目的:从原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞中克隆Cox7a2基因,构建pGEX4T-1-Cox7 a2载体,表达和鉴定重组蛋白。方法:应用RT-PCR方法从原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞中克隆Cox7 a2,利用BamH I和EcoR I酶切位点把Cox7a2克隆到pGEX4T-1载体,酶切和测序鉴定后,诱导重组蛋白的表达,进行纯化后,利用蛋白免疫印迹进行鉴定。结果:从原代培养的小鼠睾丸Leyd ig细胞克隆到Cox7a2完整的编码序列,构建了pGEX4T-1-Cox7 a2载体,表达了预期相对分子质量的融合蛋白,并经免疫印迹检测鉴定。结论:成功克隆Cox7a2,表达纯化了其融合蛋白,为基因的功能研究奠定了前期基础。     

原发动脉性阴茎勃起功能障碍1例报告及文献复习

目的: 探讨阴茎动脉畸形与原发动脉性勃起功能障碍(ED)的关系,提高对原发动脉性ED的认识与诊治水平。　方法: 报告 1例原发动脉性ED患者诊治资料。　结果: 动脉血管造影提示阴茎背动脉直径较细,而双侧阴茎海绵体动脉缺如。行阴茎三件套假体植入术,术后患者可正常勃起。　结论: 原发动脉性ED临床少见,应提高对原发动脉性ED的认识,明确诊断和治疗手段。     

勃起功能障碍的研究进展

勃起功能障碍的基础与临床研究近20年来取得了突破性发展，本文对阴茎勃起的分子生物学机制，勃起功能障碍的定义和流行病学，发病原因，危险因素，诊断与治疗进展作了扼要的介绍。     

冻干脱细胞膀胱黏膜下基质在尿道下裂修复中的临床应用

目的在动物实验的基础上,将异体脱细胞膀胱黏膜下基质用于修复阴茎型尿道下裂患者,以初步了解其临床疗效。方法我们采用反复冻融—酶法获得了同种异体人脱细胞膀胱黏膜下基质,于2004年将其试用于3例尿道下裂患者的治疗。结果一期手术2例,尿线粗、直,无尿瘘,无散射;术后1年随访,阴茎无下弯,无尿痛、尿瘘,尿线粗,尿流测定仪及尿道镜检查未见异常。二期手术1例,远端尿道未见狭窄及闭锁。结论同种异体脱细胞膀胱黏膜下基质是一种有前途的较为理想的尿道组织修复替代材料,远期效果还有待继续进行严密仔细的观察。     

cklfsf 2a在小鼠睾丸发育中的基因表达和蛋白定位

目的研究趋化素样因子2a（cklfsf 2a）在小鼠睾丸中的基因调控和蛋白定位。方法采用RT-PCR方法检测cklfsf 2a基因在不同周龄小鼠睾丸组织中的表达情况，制备cklfsf 2a多克隆抗体，分别采用免疫组织化学和原位杂交方法检测cklfsf 2a蛋白和mRNA在小鼠睾丸组织中的定位。结果cklfsf 2a mRNA在出生后14d内出现，表达量逐渐增加，在成年前达到高峰并持续表达。cklfsf 2a蛋白和mRNA均特异性的表达于睾丸初级精母细胞。结论cklfsf 2a基因存在发育的表达调控，随着睾丸发育的日趋成熟，表达量逐渐增加，其作用可能和精母细胞的发育有关。     

睾丸鞘膜恶性间皮瘤一例报告

目的 探讨睾丸鞘膜恶性间皮瘤临床表现、病理特征、治疗方法和预后情况.方法 睾丸鞘膜恶性间皮瘤患者1例,34岁,因右侧阴囊肿大5年,进行性增大15d入院.查体:右侧阴囊肿大、囊性,于睾丸上方可触及质硬肿物,表面光滑、轻压痛,与睾丸、附睾界限尚清.β-人绒毛膜促性腺激素和甲胎蛋白检测正常.阴囊超声于右侧睾丸鞘膜上方探及2.05 cm×1.97 cm混合回声的实性肿物,边界毛糙,内部回声欠均匀.结果蛛网膜下腔麻醉下手术切除鞘膜及肿物.病理报告:肿物切面灰白色,质硬,边界欠清晰.镜下可见鞘膜间皮细胞向上皮细胞和间质细胞双向分化,以上皮细胞增殖为主,上皮细胞有明显异形性,可见有丝分裂相;免疫组化染色角蛋白和波形蛋白呈强阳性.病理诊断为低度恶性的睾丸鞘膜间皮瘤.1个月后行右侧睾丸根治加右侧阴囊切除术,肿瘤未浸润临近的精索、睾丸、微血管和淋巴管等.随访38个月,患者生存良好,肿瘤无复发.结论睾丸鞘膜恶性间皮瘤多表现为鞘膜积液,确诊需依靠病理检查,本病易发生浸润和远处转移,患者生存期较短,术后需密切随访.低度恶性的间皮瘤患者经早期治疗生存期可明显延长. :肿物切面灰白色,质硬,边界欠清晰.镜下可见鞘膜间皮细胞向上皮细胞和间质细胞双 分化,以上皮细胞增殖为主,上皮细胞有明显异形性,可见有丝分裂相;免疫组化染色角蛋白和波形蛋白呈强阳性.病理诊断为低度恶性的睾丸鞘膜间皮瘤.1个月后行右侧睾丸根治加右侧阴囊切除术,肿瘤未浸润临近的精索、睾丸、微血管和淋巴管等.随访38个月,患者生存良好,肿瘤无复发.结论睾丸鞘膜恶性间皮瘤多表现为鞘膜积液,确诊需依靠病理检查,本病易发生浸润和远处转移,患者生存期较短,术后需密切随访.低度恶性的间皮瘤患者经早期治疗生存期可明显延长. :肿物切面灰白色,质硬,边界欠清晰.镜下可见鞘膜间皮细胞向上皮细胞和间质细胞双 分化,以上皮细胞增殖为主,上皮细胞有明显异形性,可见有丝分裂相;免疫组化染色角蛋白和波形蛋白呈强阳性.病理诊断为低度恶性的睾丸鞘膜间皮瘤.1个月后行右侧睾丸根治加右侧阴囊切除术,肿瘤未浸润临近的精索、睾丸、微血管和淋巴管等.随     

高流量型阴茎异常勃起六例报告

高流量型阴茎异常勃起是一种少见病,2000年至2007年我院共收治6例,