异烟肼诱导致单耐异烟肼结核分枝杆菌假定药物外排泵基因表达量变化的初步研究

目的 <\b>检测单耐异烟肼结核分枝杆菌经异烟肼诱导培养前后假定药物外排泵基因表达量的变化,探讨可能导致结核分枝杆菌对异烟胼耐药的外排泵基因及导致基因高表达的原冈.方法 <\b>选取35株单耐异烟肼结核分枝杆菌临床分离株、10株全敏结核分枝杆菌临床分离株和H37Rv(标准对照),对各菌株进行无异烟肼和亚抑菌异烟肼浓度(1/4 MIC)的7H9液体培养基诱导培养,提取RNA后反转录并采用real-time PCR技术分别检测27个假定外排泵基因表达量的变化,用公式2-ΔΔCT计算每个假定基因相对表达量的差异倍数.结果 <\b>耐药株中27个假定外排泵基因有13个基因高表达,高表达Rv1258c基因的菌株数最多为6株,其次是高表达Rv2265和Rv0849的菌株各有5株.35株菌中14株菌(40.00％)有高表达的外排泵基因,6株(17.14％)菌株均只有1个假定外排泵基因高表达；8株(22.86％)菌株有两种及以上基因高表达,其中4、2、1、l株菌株分别有2、4、5、7个基因高表达；10株全敏菌株和H37Rv 27个假定外排泵基因均无高表达.结论 <\b>Rv1258e、Rv2265和Rv0849等基因可能是导致结核分枝杆菌对异烟肼耐药的外排泵基因,异烟肼可能为结核分枝杆菌部分假定外排泵基因的诱导物而导致其激活并高表达.     

四川省川南地区结核分枝杆菌Spoligotyping分型研究

目的 了解四川省川南地区结核分枝杆菌基因型构成情况,为结核病防控提供分子流行病学依据。方法 采用间隔区寡核苷酸分型(Spacer Oligonucletide typing, Spoligotyping)方法对四川省川南地区267株临床分离菌株进行基因分型,结果采用BioNumerics(Version 5.10)软件进行分析,并将Spoligotyping分型结果与SpolDB4.0数据库中的菌株进行比对分析。结果 267株结核分枝杆菌表现出66种基因型,其中51株表现为独特基因型,其余216株可聚为10个基因簇。与SpolDB4数据库比对分析发现,267株结核分枝杆菌中,144株为北京家族菌株(53.93%),79株为T家族菌株(29.59%),9株为H家族菌株,3株为U家族菌株,2株为MANU家族菌株,其余30株表现的基因型为数据库中不存在的基因型。结论 四川省川南地区结核分枝杆菌存在较高的基因多态性,北京家族菌株和T家族菌株为主要的流行菌株,应加强对这两类菌株的流行趋势的监测及生物学特性研究。     

小儿有机磷农药中毒防治体会

1.小儿有机磷中毒并非少见 患儿均来自农村,无一例城镇患儿,本组37例中,皮肤及呼吸道吸收中毒者25例,当地农民有的将农药原液或稍稀释后喷洒床被,有的洒在头部灭虱,还有的用农药和泥抹炕。小儿误服者8例,其他4例原因不明。本组病例经治疗均痊愈。2.详细询问病史 年龄越小病史越不清楚,有的出现明显的有机磷农药中毒症状,但始终问不出     

中西医结合治疗再生障碍性贫血60例观察

我室从1975～1981年6月用中西医结合治疗急、慢性再生障碍性贫血(简称再障)60例,取得了较好疗效,报告如下。一般资料本组60例均系住院患者,其中慢性再障54例,急性再障6例。治疗时间慢性再障三个月,急性再障二个月以上可做疗效统计者。其中男33例,女27例,男与女之比为1.2:1。年龄11～18岁12例,19～30岁21例,31～     

基层医院应用普通肝素治疗不稳定型心绞痛分析

不稳定型心绞痛 (ＵＡＰ)是介于稳定型心绞痛 (ＳＡＰ)与急性心肌梗死 (ＡＭＩ)之间的一组急性心肌缺血征候群 ,易发展为ＡＭＩ或猝死。我们结合基层医院的特点自 2 0 0 0年 5月至 2 0 0 2年 7月应用小剂量普通肝素治疗ＵＡＰ 4 3例 ,取得了较好疗效。现报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料　用肝素治疗ＵＡＰ共 4 3例 (简称观察组 ) ,男 2 8例 ,女 15例 ;年龄 4 5～ 6 7岁 ,平均 6 1 6岁。其中初发劳力型心绞痛 18例 ,恶化劳力型心绞痛 16例 ,心肌梗死后心绞痛 3例 ,自发性心绞痛 6例。未用肝素治疗的ＵＡＰ(对照组 ) 2 4例 ,男 14例 ,女…     

抗结核分枝杆菌特异抗原单克隆抗体的制备和特异荧光染色检测技术的研究

目的对结核分枝杆菌的蛋白抗原进行初步分析，制备抗结核分枝杆菌的特异单克隆抗体，探讨特异性免疫荧光法在痰标本结核分枝杆菌检查上应用的可行性。方法采用丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹技术对结核分枝杆菌的蛋白抗原进行初步分析，确定特异、免疫原性强的蛋白抗原，制备抗特异蛋白抗原的高效价单克隆抗体，采用饱和硫酸铵粗提，Sephadex G-50层析纯化；同时制备高效价的抗结核分枝杆菌免疫血清。用异硫氰酸荧光素（FITC）标记，初步应用于临床痰涂片的检测。结果获得4株针对结核分枝杆菌38×10^3蛋白抗原的单克隆抗体，ELISA检测小鼠腹水单克隆抗体效价达到1：6400～1：12800。建立了直接荧光抗体染色方法，60份临床疑似肺结核病人痰标本，用抗酸染色法、结核分枝杆菌免疫血清和单克隆抗体免疫荧光法三种方法检测，阳性率分别为：36．7％（22／60）、58．3％（35／60）和56．7％（34／60），其中，抗酸染色阳性22份标本，两种免疫荧光法检查均为阳性，符合率100％。结论成功制备出抗结核分枝杆菌38×10^3蛋白的单克隆抗体。免疫荧光法检查痰标本结核分枝杆菌阳性率大大高于抗酸染色，具有良好的应用前景。     

带状疱疹的外治疗法及护理

我院采用中药泥膏外贴并加强护理治疗带状疱疹，效果较好，报道如下。     

乳腺炎奶牛双重感染抗热分枝杆菌和象分枝杆菌的鉴定及药敏试验研究

目的 对疑似分枝杆菌感染乳腺炎奶牛进行病原及药敏谱调查。方法 采集1头患乳腺炎奶牛的牛奶,采用4% NaOH预处理,接种于L-J培养基分离培养。阳性培养物利用抗酸染色和多位点PCR方法进行初步鉴定,采用16S rRNA、hsp65、ITS,和SodA基因的多位点序列分析进行种的鉴定,利用Alamar blue显色法对分离菌株进行27种药物的药敏试验。结果 从1头患乳腺炎奶牛的牛奶中同时分离获得2株抗酸染色阳性培养物,经PCR鉴定为非结核分枝杆菌,多位点序列分析鉴定为抗热分枝杆菌和象分枝杆菌。药敏试验表明这2株菌对利福平和异烟肼等大多数抗结核药物耐药,但对阿米卡星、莫西沙星、左氧氟沙星、乙胺丁醇、链霉素、妥布霉素、环丙沙星和利奈唑胺等敏感。结论 乳腺炎奶牛中分离了抗热分枝杆菌和象分枝杆菌,有其独特的药敏谱特征,为其感染防治提供了科学依据。     

结核分枝杆菌抗原Rv2654c、Rv1985c和Rv3868的克隆表达及血清诊断学初步评价

目的 评价结核分枝杆菌蛋白抗原Rv2654c、Rv1985c和Rv3868的血清诊断价值和潜在应用前景。方法 以结核分枝杆菌H37Rv标准株全基因组DNA为模板扩增得到Rv2654c、Rv1985c和Rv3868基因的完整序列, 并与表达载体pET-32a构建重组质粒。原核表达Rv2654c、Rv1985c和Rv3868蛋白, 利用亲和层析的方法进行纯化。采用棋盘滴定的方法, 确定各抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)最佳反应条件, 并应用190份血清进行血清IgG抗体检测, 结合受试者工作特征曲线(ROC)对其诊断效能进行分析和评价。通过ROC计算各抗原组合的诊断效能, 确定最佳组合方案。结果 成功构建了重组蛋白, 对重组后的片段进行测序, 经BLAST比对与目的基因完全一致, 且能够稳定表达。对经纯化后的3种蛋白进行ELISA检测, 经统计学分析, Rv2654c、Rv1985c和Rv3868抗原的诊断效能分别达到73.16%、56.84%和71.05%。结合ROC得到最佳的抗原组合方案为Rv2654c+Rv3868, 其敏感性、特异性和诊断效能分别达到78.95%、72.63%和75.79%。结论 结核分枝杆菌重组抗原Rv2654c、Rv1985c和Rv3868具有作为结核病诊断抗原的潜力, 可以作为结核病免疫学快速诊断的候选蛋白。抗原组合Rv2654c+Rv3868具有较高的诊断效能, 有较好的潜在应用价值。     

山东省青州市城区小儿偏头痛流行病学调查

偏头痛是小儿头痛中比较常见的一种．表现为反复发作性头痛伴前驱期视觉异常、厌食及恶心呕吐,有时伴精神及心理状态异常．约10％可延续至成年。为探讨本病患病率、病因及防治方法,我们于1996年3～5月对青州市城区学龄儿童偏头痛进行了流行病学调查。