孔石莼化学成分的研究

 目的研究石莼属海藻孔石莼(Ulva pertusa Kjellm)的化学成分。方法利用硅胶柱和凝胶柱色谱法分离纯化,并根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从孔石莼石油醚部位分得5个化合物,分别鉴定为(2,4-二氯苯基)-2,4-二氯苯甲酸酯[(2,4-dichlorophenyl)-2,4-dichlorobenzoate,Ⅰ]、N-苯基-2-萘胺(N-phenyl-2-naphthylamine,Ⅱ)、5-羟基-3,6,7,3′,4′-五甲氧基黄酮(5-hydroxy-3,6,7,3′,4′-pentamethoxyflavone,Ⅲ)、5-羟基-6,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(5-hydroxy-6,7,3′,4′-tetrame-thoxyflavone,Ⅳ)和对乙氧基苯甲酸(4-ethoxybenzoic acid,Ⅴ)。结论化合物Ⅰ为首次从自然界分离得到,迄今为止未见其NMR数据报道;化合物Ⅱ～Ⅴ为首次从该属植物中分离得到。     

外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化

目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。     

四肢主要动脉挫伤合并血栓形成12例

目的：探讨四肢主要动脉挫伤合并血栓形成的诊断和治疗方法。方法：对12例四肢主要动脉挫伤合并血栓形成患者,9例行血栓取出、动脉损伤段切除断端吻合术,3例行血栓取出、动脉损伤段切除自体大隐静脉移植术,7例血管修复后行骨筋膜室切开减张术。结果：12例中,8例肢体完全成活,术后恢复良好;1例术后小腿肌肉小部分坏死,遗留轻度跛行;3例截肢。结论：四肢主要动脉挫伤合并血栓形成,早期易漏诊,诊断明确应尽快行血管修复,恢复肢体血运。     

滇重楼种子休眠破除及植株形态发生的研究

目的:在无菌培养条件下探讨植物激素对滇重楼种子休眠破除及植株形态发生的影响.方法:以滇重楼成熟种子为试验材料,在无菌培养条件下采用正交试验设计研究赤霉素(GA3)、玉米素核苷(ZR)、吲哚乙酸(IAA)及活性炭(AC)对滇重楼种子休眠破除的影响,并对无菌萌发过程中植株形态发生进行观察.结果:滇重楼种子无菌培养过程中种子萌动的最佳配比是GA3-ZR-IAA-AC(1.0 mg·L-1∶1.0 mg·L-1∶0.1 mg·L-1∶0.5 g·L-1),种子萌动率达80.00％,4种因子对滇重楼种子萌动率作用大小为IAA＞ GA3＞ZR ＞AC;滇重楼种子无菌培养过程中种子萌发的最佳配比是GA3-ZR-IAA-AC(1.0 mg·L-1∶1.0 mg·L-1∶0.1 mg·L-1∶0.5 g·L-1),种子萌发率达66.66％,4种因子对滇种楼种子发芽率作用大小为AC＞IAA ＞ZR＞GA3.结论:培养基添加植物激素GA,ZR,IAA,AC对滇重楼种子休眠破除、种子萌动及萌发有重要影响.     

紫花列当化学成分的研究

采用硅胶、Sephadex LH-20等色谱技术分离紫花列当(Orobanche coerulescens Steph)中的化学成分,通过波谱分析及理化性质鉴定化合物的结构:甘露醇(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、琥珀酸(Ⅲ)、咖啡酸(Ⅳ)、原儿茶醛(Ⅴ)、β-胡萝卜苷(Ⅵ)。以上化合物均为首次从该植物中分得。     

扬子毛茛中的化学成分研究

目的研究扬子毛茛的化学成分.方法应用多种色谱方法和色谱材料进行提取、分离和纯化,用各种现代光谱方法并结合文献对分得的化合物进行结构解析.结果从扬子毛茛的95%乙醇提取物中分到十三个化合物,其中五个为黄酮苷类化合物,分别命名为芹菜素-4'-O-α-L-鼠李糖苷(1),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷-4'-O-α-L-鼠李糖苷(2),芹菜素-8-C-α-L-阿拉伯糖苷(3),芹菜素-8-C-β-D-半乳糖苷(4),小麦黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷(5);其余八个分别为小麦黄素(6),木犀草素(7),东莨菪内酯(8),秦皮乙素(9),滨蒿内酯(10),阿魏酸(11),原儿茶酸(12)和小毛茛内酯(13).此外还对这些化合物的体外抗癌活性进行了初步的测试.结论化合物1-12为首次从该属植物中分到,化合物13为首次从该种植物中分到,其中化合物1为新的天然产物,化合物2和3首次报道了其碳谱数据.生物活性测试结果表明化合物1对BEL-7407及A549细胞的IC50值分别为43及77μg·mL-1,化合物8和10对KB细胞的IC50分别为78和44μg·mL-1,对HL-60细胞的IC50均为85μg·mL-1.化合物7对所测试的四种肿瘤细胞株均显示一定的细胞毒活性,其对KB,BEL-7407,A549及HL-60细胞的IC50分别为51,55,44和10μg·mL-1.     

常染色体显性遗传性听神经病基因突变筛查

目的针对一个常染色体显性遗传性非综合征性听神经病谱系障碍家系进行已知致病基因筛查分析,了解是否存在可能致病的基因突变。方法选择本课题组收集到的一个家系4代24人作为研究对象,采集受试者外周静脉血提取基因组DNA,应用在线引物设计软件Primers进行引物设计,采用直接测序法对已知听神经病相关基因进行测序,使用DNAMan软件对序列进行比对分析。结果该家系遗传方式符合显性遗传特征,患者听力学特征符合非综合征型听神经病谱系障碍,对家系中全部患者及部分听力正常成员完成DIAPH3、OTOF、PJVK、GJB2基因外显子及线粒体DNA12SrRNA1494、1555位点的测序分析,未发现可疑致病突变。结论该家系未检测到已知相关基因致病突变,高度提示新基因突变致病的可能,有待于进一步研究。     

毛茛科植物石龙芮的化学成分研究

目的 :对毛茛科植物石龙芮Ranunculussceleratus的化学成分进行分离和结构鉴定。方法 :采用溶剂提取和各种色谱法分离得到 6个化合物 ,运用多种波谱技术 (EI-MS ,¹H-NMR ,¹³C-NMR ,DEPT谱 ,NOE差谱 )鉴定其化学结构。结果 :6个化合物分别鉴定为豆甾-4-烯 3,6-二酮 (stigmasta-4- ene 3,6 dione ,Ⅰ )、豆甾醇 (stigmasterol,Ⅱ )、6 羟基 7 甲氧基香豆素 (isoscopoletin ,Ⅲ )、七叶内酯二甲醚 (scoparone,Ⅳ )、原儿茶醛 (protocatechuicaldehyde ,Ⅴ )和原儿茶酸 (protocatechuicacid ,Ⅵ )。结论 :化合物Ⅰ ,Ⅲ ,Ⅳ ,Ⅴ ,Ⅵ为首次从毛茛属植物中分离得到。     

开郁清热法治疗肥胖2型糖尿病降糖疗效研究

目的:针对中医治疗糖尿病的临床难题--降糖疗效不佳,在全面分析肥胖2型糖尿病病因病机的基础上,提出开郁清热法治疗肥胖2型糖尿病.本研究旨在观察开郁清热法治疗肥胖2型糖尿病的降糖疗效.方法:采用自身对照、开放研究,对248例肥胖2型糖尿患者进行降糖疗效观察,观察周期为12周,观察空腹血糖和餐后2h血糖.结果:观察组降糖有效率为75.1%.并将248例患者按血糖水平分为3个等级,治疗前后自身对照均有显著性差异,且在入选观察范围内,降低空腹血糖最大限度范围为(5.43±2.34)mmol/L,餐后2h血糖下降最大限度范围为(6.65±2.88)mmol/L.治疗期间均未见明显不良反应.结论:开郁清热法降糖疗效显著,组方用药符合肥胖2型糖尿病证治规律,肥胖2型糖尿病血糖不同水平患者均可应用.     

消炎片的指纹图谱分析及多指标成分含量测定

目的 采用HPLC建立消炎片的指纹图谱分析方法,并测定秦皮乙素、黄芩苷、蒙花苷、黄芩素、汉黄芩素的含量,为其质量控制提供依据。方法 采用ACE C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为321 nm。运用“中药色谱指纹图谱相似度评价软件”（2004 A版）对11批消炎片进行相似度评价。结果 11批消炎片相似度均>0.90,确定25个共有峰,指定秦皮乙素、黄芩苷、蒙花苷、黄芩素、汉黄芩素为特征峰并测定其含量。结论 该方法建立的消炎片HPLC指纹图谱特征性强、多指标成分含量测定方法重复性好、方法简便、准确,可为产品综合评价和质量控制提供依据。