磁性壳聚糖微球的释药和靶向研究

目的：利用改变pH值法制备磁性壳聚糖微球,并对微球的载药量、缓释特性和磁靶向特性进行测试.方法：采用紫外光谱吸收法测定载药量,渗透袋扩散技术测试微球的释药速度,体外模拟法测定微球的磁靶向性.结果：载药量为37%,包封率62%.微球10h内药物释放约为75%,连续释放78h.外加磁场应在2000～3000Gs左右,施加时间在2h为宜.结论：使用改变pH值法制备的壳聚糖微球,具有较高的载药量和包封率,微球缓释效果明显,并实验测出了适合微球靶向控制的磁场施加方式.     

超临界提取东北刺人参挥发性成分分析

目的:研究东北刺人参中挥发性成分.方法:采用二氧化碳超临界的提取方法并用气相色谱-质谱(GC/MS)联用技术鉴定其成分测定其含量.结果:超临界提取刺人参挥发性成分效率高,与水蒸气蒸馏提取出的挥发性成分有差异.     

冷冻保存人鼻中隔软骨

目的:探讨不同冷藏温度下保存成人鼻中隔软骨块活性的可行性。方法:实验于2005-03/09在解放军第四军医大学基础部病理与病理生理博士后流动站完成。取临床常规手术切除的成人鼻中隔软骨15块,切成大小约15mm×10mm,随机分成3组,每组5块。分别置入4℃,-20℃和-80℃冷冻保存,在保存24h,7d,14d,20d和30d时取材,进行软骨活性比较。①软骨样品于质量浓度为40g/L甲醛固定后制备石蜡切片,组织切片经苏木精-伊红染色和阿尔辛蓝染色后于光学显微镜下观察软骨细胞及软骨基质。②锥虫蓝排斥试验检测软骨细胞活性,根据下式求细胞活力:活细胞率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%。结果:①软骨石蜡切片经苏木精-伊红染色和阿尔辛蓝染色后于光学显微镜下观察可见:冷冻保存24h时,各组软骨中大部分为活的软骨细胞充填软骨陷窝,软骨基质无明显变化,鼻中隔软骨活性程度较好。-80℃冷冻保存7d,-20℃保存14d及各组保存30d后,软骨细胞基本变性坏死,胞核消失,基质成份断裂、强度降低。4℃保存20d软骨中部有较多变性细胞,但软骨基质中酸性黏多糖及胶原成分无明显断裂现象。②-80℃冷冻保存软骨在保存24h时,软骨细胞活性为80%;保存7d时软骨基本失去活性,软骨细胞及基质变性坏死。-20℃保存软骨在保存24h时,软骨细胞活性为85%;14d后软骨基本失去活性。4℃保存软骨在保存24h至20d时仍保持较好活性,软骨细胞活性保持在60%以上,软骨细胞及基质成分无明显变化;保存30d时软骨活性降为20%左右。结论:4℃和-20℃在2周内保存是较好的鼻中隔软骨保存方法,而4℃保存法更具优越性,有望为临床提供一种较好的活性软骨保存方法。     

保存人鼻中隔软骨活性的3种体外方法比较

背景:软骨损伤后难以自身修复,以活性软骨进行修复效果较好,但活性软骨的可靠来源尚未根本解决。目的:以3种不同方法体外保存成人鼻中隔软骨块的活性比较。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2007-06/2008-03在解放军第四军医大学唐都医院耳鼻喉科实验室及西京医院全军耳鼻咽喉-头颈外科中心实验室完成。材料:材料为临床常规手术中切除的成人正常鼻中隔软骨20块,按国务院2006年《医疗机构管理条例》规定,已与患者签订知情同意书。方法:将所取软骨,块剪成大小约15mm×10mm×2mm软骨块,分别置于4,-20,-80℃冷冻及RPMI-1640液于37℃培养保存,于保存24h,7,14,21d和30d时取样品。主要观察指标:以苏木精-伊红、AB/PAS及Masson三色染色和锥虫蓝排斥试验检测软骨活性。结果:用RPMI-1640培养液保存的成人鼻中隔软骨,在整个保存期中均能保持较好活性,软骨细胞活性率保持在80%左右。以-80℃冷冻保存7d及-20℃保存14d时,软骨基本失去活性,当4℃保存在21d时,软骨可保持较好活性,保存30d时,软骨活性明显降低。结论:与低温保存方法相比,用组织培养法保存成人软骨块能较好地保持其活性,有望为临床治疗提供一种取材方便、新型有效的软骨修复材料。     

响应面法优化金鉴灵软膏成型性工艺及其对小鼠湿疹的影响

目的:采用Box-Behnken响应面法对金鉴灵软膏剂的成型性工艺进行优化及验证,并考察其对湿疹的影响。方法:以药物对皮肤的刺激性为评价指标,确定基质种类为蜂蜡;以稳定性实验与均匀性实验结果为评价指标;以麻油与基质比例、融化温度、加热时间为影响因素进行响应面优化设计筛选出最佳成型性工艺;对小鼠进行湿疹造模后,以其耳肿胀度、细胞因子水平及炎症因子病理情况等指标考察最佳成型性工艺下制备出的不同剂量组的样品对小鼠湿疹的疗效。结果:最优成型性工艺为:基质种类为蜂蜡,麻油与基质比例为7.5∶1,融化温度为71℃,加热时间为11min;最佳成型性工艺制备的样品可缓解湿疹中出现的炎症症状。结论:通过响应面分析法筛选出的成型性工艺稳定可靠,最佳成型性工艺下制备的样品对小鼠湿疹的治疗效果显著,抗炎作用效果良好。     

单个电极接触不良对腹部电阻抗断层成像的影响

目的:研究单个电极接触不良和电阻抗断层成像之间的关系,以便为长期监护提供必要的理论和现实依据. 方法:采用电阻抗成像监护仪对14人采用16电极法进行监护,对比电极接触良好和其中某一个电极接触不良时监护图像的差别. 结果:发现某一电极接触不良,则对应它的那一部分图像的灰度会发生明显的变化,而图像其他部分的灰度则变化很小. 结论:得出了单个电极接触不良对成像的影响的规律,对长期监护中电极接触不良问题的监测提供了依据.     

超快速液相色谱-质谱法测定鲜人参晶及林下山参中的39个人参皂苷成分

目的：通过超快速液相色谱-质谱法(UFLC-MS/MS)同时测定鲜人参晶和林下山参中主要活性成分人参皂苷的含量,探讨鲜人参晶及林下山参中人参皂苷的差异变化,为阐明鲜人参晶物质基础提供参考。方法：室温下,用70%甲醇水溶液对鲜人参晶及林下山参药材进行超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC?BEH Shield RP C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.5 mmol·L^–1甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱。在电喷雾离子源负离子、多反应监测模式下,通过UFLC-MS/MS外标对照品法测定鲜人参晶及林下山参中39个人参皂苷的含量。结果：经方法学验证,建立的分析方法符合定量分析要求。4批林下山参和1批鲜人参晶中的总人参皂苷质量分数分别为27.59～52.63、52.26 mg·g^–1,稀有人参皂苷质量分数分别为3.79～6.65、7.42 mg·g^–1。林下山参中人参皂苷Rg₁和人参皂苷Re总质量分数为0.72%～0.94%,人参皂苷Rb     

PI3K/Akt/eNOS通路介导山药蛋白对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍的改善作用

目的:探讨山药蛋白(DP1)对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍(erectile dysfunction, ED)的改善作用及机制。方法:建立氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠模型,分成对照组、模型组、DP1低剂量组(0.6 mg·kg^-1)、DP1高剂量组(0.9 mg·kg^-1)。检测大鼠体质量变化;采用ELISA法检测促性腺激素释放激素(GnRH)、促黄体生成素(LH)和睾酮(T)含量;通过皮下注射阿扑吗啡测定大鼠阴茎勃起次数和勃起率;以苏木素-伊红染色观察阴茎海绵体组织形态;采用Western blot检测勃起关键信号通路蛋白表达水平、ELISA测定一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量,探索DP1改善肾阳虚大鼠ED的机制。结果:与模型组相比,DP1组大鼠体质量显著增加;GnRH、LH和T含量升高;阴茎勃起次数及勃起率显著提高;海绵体组织形态完整性恢复。DP1的干预能够增加磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白磷酸化水平,显著提高NO和cGMP含量。结论:DP1能够改善肾阳虚大鼠ED,且与激活...     

HPLC法测定血复生片中芍药苷的含量

目的 建立血复生片中芍药苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定。色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1 ％磷酸溶液(21 ∶ 79),检测波长:230 nm,柱温:30 ℃,流速:1.0 mL·min-1。结果 芍药苷进样量在0.066~0.396 μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9994);平均加样回收率为98.72 %,RSD为1.88 %(n=6)。结论 该方法操作简便易行,专属性强,准确可靠,可用于血复生片的质量控制。     

基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ序列位点特异性聚合酶链反应鉴别鹿茸及其伪品

目的:基于细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)序列建立一种新的PCR鉴定方法,以快速鉴别出梅花鹿、马鹿茸片与驯鹿茸片。方法:采集不同来源的鹿茸片共60批。通过比较梅花鹿、马鹿与驯鹿等其他伪品的COⅠ基因序列差异,根据SNP鉴别位点设计梅花鹿茸、马鹿茸同驯鹿茸的鉴别引物Cne-F、Rt-F、Co-R,并对影响聚合酶链反应(PCR)结果的主要因素变性时间、退火温度、退火时间、延伸时间等进行方法学考察和优化。结果:该实验构建的双位点特异PCR鉴别体系,基于COⅠ的鉴别位点,可通过PCR扩增获得294 bp的梅花鹿、马鹿特异片段,而产生514 bp的驯鹿特异片段,伪品及阴性对照无条带。结论:该实验建立对梅花鹿、马鹿及驯鹿等其他伪品鹿茸的PCR鉴别方法简便、可靠。