骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化中电磁场激活ERK通路的作用

背景：研究表明电磁场可调节骨髓间充质干细胞的增殖和分化,但其具体机制尚不清楚。 目的：从ERK信号途径探讨电磁场诱导大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨的作用。 方法：取第3代生长良好的大鼠骨髓间充质干细胞,暴磁组给予15 Hz、1 mT的正弦波电磁场刺激,PD98059+暴磁组在电磁场刺激前给予20 μmol/L ERK阻断剂PD98059,PD98059组仅给PD98059不进行电磁场刺激,对照组正常培养。电磁场刺激后,收集各组细胞,Western blot法检测ERK通路的活性,MTT法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性。 结果与结论：电磁场刺激后,细胞ERK1/2磷酸化水平、细胞的增殖活性、及碱性磷酸酶活性均明显升高(P < 0.01);PD98059可明显抑制ERK1/2磷酸化水平及细胞增殖活性的升高(P < 0.01),而在一定程度上提高细胞的碱性磷酸酶活性(P < 0.01)。说明电磁场刺激可通过激活骨髓间充质干细胞ERK信号通路,并且主要通过该途径促进骨髓间充质干细胞的增殖;而在脉冲电磁场促进骨髓间充质干细胞分化成骨的过程中,激活ERK信号通路所起的作用较小。     

雷米普利对心肌梗死后心衰大鼠非梗死区胶原的抑制作用

目的 研究心肌梗死后心衰大鼠非梗死区心肌血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及其Ⅰ型受体(AT1-R)表达对心室重构的影响及雷米普利的干预作用.方法 结扎大鼠左冠状动脉前降支并饲养6 w的16只存活大鼠,随机分为模型组及雷米普利组,每组8只,另取8只大鼠为假手术组,连续灌胃给药4 w后测定大鼠血流动力学参数,ELISA方法检测血清及左心室非梗死区AngⅡ的含量,RT-PCR 法测定左心室非梗死区心肌组织AT1-R mRNA表达水平,Masson染色观察非梗死区心肌胶原的沉积.结果 雷米普利能明显升高左心室内压最大上升和最大下降速率(±dp/dt_(max)),降低左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)(P<0.05或P<0.01),但对心率(HR)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)无明显影响(P>0.05),同时明显降低血清及左心室非梗死区AngⅡ的含量及下调AT1-R mRNA 表达水平(P<0.01或P<0.001),Masson染色可见非梗死区心肌胶原沉积明显减轻.结论 雷米普利对梗死后心衰大鼠非梗死区心肌间质胶原重构有显著的抑制作用,其作用机制与下调AT1-R表达水平及减轻胶原沉积有关.     

AFP对正常肝细胞和肝癌细胞生物钟基因表达的影响

目的 探讨甲胎蛋白(AFP)对正常肝细胞和肝癌细胞生物钟基因表达的影响.方法 将AFP过表达的慢病毒载体感染正常肝细胞L02细胞和肝癌细胞株SMMC-7721细胞构建AFP过表达的正常肝细胞系和肝癌细胞系,分别通过real-time PCR法和Western blotting法检测细胞中生物钟基因Clock、Bmal1...     

鱼罐头中重金属残留及评价

随着工业的飞速发展,每年含有重金属的废水进入各海域,有毒重金属物质在水生生物体中经富集作用而蓄积,达到一定浓度,使本来为人们提供丰富蛋白的鱼类成为可能浓缩毒物的载体,进而危害人类的健康.对海洋经济鱼类的重金属残留量的研究调查已有报道,但对市售的鱼类罐头重金属含量的研究则少见报道.     

维拉帕米在应力对体外骨髓间充质干细胞早期反应基因蛋白表达中作用的研究

[目的]研究维拉帕米(Verapamil)在周期性牵张应力对体外骨髓间充质干细胞(MSCs)早期反应基因蛋白表达中的作用,从而进一步推断出Ca2+ 通道在细胞响应力学的信号传导途径中的作用.[方法]分离并培养骨髓间充质干细胞,利用体外细胞牵张应力装置对第3～6代细胞加载力学信号,在应力干预细胞前加及不加钙离子拮抗剂(维拉帕米),受力结束后,流式细胞术检测细胞内钙离子荧光强度,用RT-PCR以及免疫组化的方法检测各组细胞内c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白表达的情况.[结果]加载力学信号后,细胞内钙离子浓度发生改变,c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白的表达明显增强(P<0.01),经维拉帕米预处理后,以上生物学效应受到抑制(P<0.01).[结论]在牵张应力作用下骨髓间充质干细胞Ca2+内流发生了变化,并且这种变化在骨髓间充质干细胞对周期性牵张应力的早期应答反应中起到了部分作用,可能依赖钙离子通道的活化来调控.     

碳酸镧对骨化三醇冲击治疗慢性肾衰竭持续非卧床腹膜透析继发性甲状旁腺功能亢进患者血钙、血磷影响的研究

目的探讨碳酸镧在慢性肾衰竭持续非卧床腹膜透析(CAPD)患者应用骨化三醇治疗继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)时对血钙和血磷的影响。方法将2013年3~6月青岛市市立医院东院腹膜透析中心的CAPD导致SHPT的患者随机分为两组。碳酸镧组予以口服碳酸镧和骨化三醇冲击治疗,碳酸钙组给予碳酸钙和骨化三醇治疗,观察患者血清钙、磷、iPTH的变化。统计分析采用SPSS 17.0软件。结果共纳入40例患者,两组各20例。治疗12周后,碳酸镧组患者血磷(t=5.095,P=0.000)和iPTH(t=1.225,P=0.000)水平均明显下降,且碳酸镧组血钙(t=1.127,P=0.001)、血磷(t=2.035,P=0.000)水平明显低于碳酸钙组。结论碳酸镧能有效治疗CAPD患者应用骨化三醇冲击治疗SHPT时的高钙血症和高磷血症。     

老年高血压患者神经肽Y与神经降压素的改变及比值变化的临床意义

目的 观察老年高血压病患者神经肽Y（NPY）和神经降压素（NT）水平及其比值的变化在高血压发病中的作用.方法 采用同位素放射免疫法对176例老年高血压患者和84例健康人进行血浆NPY和NT含量的检测.结果 ①高血压患者血浆NPY水平高于对照组（P＜0.01）、NT水平低于对照组（P＜0.01）、NPY/NT比值高于对照组（P＜0.01）.②高血压1、2、3级患者间血浆NPY、NT水平及NPY/NT比值差异明显（P＜0.01）,NPY水平逐渐升高、NT水平逐渐下降、NPY/NT比值逐渐升高.结论 NPY及NT参与了高血压的发病过程,并且与高血压的分级相关,二者可能协同作用,促进高血压的发生、发展.血浆NPY和NT水平及NPY/NT比值在一定程度上可作为评估老年高血压患者病情的指标之一.     

黄芩苷对心力衰竭大鼠心律失常及心室肌细胞内质网应激-肌电稳定性的影响

目的　探究黄芩苷对心力衰竭大鼠室性心律失常及心室肌细胞内质网应激-肌电稳定性的影响。方法　雄性6周龄Wistar大鼠72只,随机分为对照组,模型组,美托洛尔组,黄芩苷低、中、高剂量组,每组12只。模型组给予异丙肾上腺素（ISO）后颈部皮下注射5 mg/（kg·d）,对照组给予等体积0.9%NaCl注射液后颈部皮下注射,连续注射7 d;美托洛尔组及黄芩苷低、中、高剂量组在模型组基础上分别给予美托洛尔10 mg/（kg·d）及25、50、100 mg/（kg·d）黄芩苷灌胃,对照组给予药物等体积0.9%NaCl注射液灌胃,连续给药4周。于4周末行心电图及多普勒超声检测各组大鼠心率、室性早搏发生情况及测定左心室射血分数（LVEF）、左心室舒张末期内径（LVEDd）、左心室收缩末期内径（LVESd）;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组大鼠血清人基质裂解素2（ST2）、脑钠肽（BNP）含量。每组取6只大鼠制备Langendorff离体心脏灌注模型,记录和测量心肌单相动作电位复极90%的时程（MAPD90）、心室肌细胞有效不应期（ERP）及ERP/MAPD90比值;另外6只大鼠行心室肌TUNEL染色后检测其心肌细胞凋亡情况;Western blot检测各组大鼠心室肌细胞葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、肌醇需酶1（IRE1）、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白（CHOP）及缝隙连接蛋白43（Cx43）蛋白表达。结果　与对照组比较,模型组大鼠心率增快,易发生室性早搏,LVESd、LVEDd升高,LVEF降低,血清ST2、BNP含量升高,心室肌细胞ERP/MAPD90降低,凋亡指数（AI）升高,GRP78、IRE1、CHOP表达升高,Cx43表达降低（均P＜0.05）;与模型组比较,黄芩苷低、中、高剂量组上述指标均明显改善,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论　黄芩苷具有改善ISO所致心力衰竭大鼠室性心律失常及心功能的作用,其机制可能与抑制心室肌细胞内质网应激及细胞凋亡、提高肌电稳定性相关。