黄芩苷对心力衰竭大鼠心律失常及心室肌细胞内质网应激-肌电稳定性的影响

目的　探究黄芩苷对心力衰竭大鼠室性心律失常及心室肌细胞内质网应激-肌电稳定性的影响。方法　雄性6周龄Wistar大鼠72只,随机分为对照组,模型组,美托洛尔组,黄芩苷低、中、高剂量组,每组12只。模型组给予异丙肾上腺素（ISO）后颈部皮下注射5 mg/（kg·d）,对照组给予等体积0.9%NaCl注射液后颈部皮下注射,连续注射7 d;美托洛尔组及黄芩苷低、中、高剂量组在模型组基础上分别给予美托洛尔10 mg/（kg·d）及25、50、100 mg/（kg·d）黄芩苷灌胃,对照组给予药物等体积0.9%NaCl注射液灌胃,连续给药4周。于4周末行心电图及多普勒超声检测各组大鼠心率、室性早搏发生情况及测定左心室射血分数（LVEF）、左心室舒张末期内径（LVEDd）、左心室收缩末期内径（LVESd）;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组大鼠血清人基质裂解素2（ST2）、脑钠肽（BNP）含量。每组取6只大鼠制备Langendorff离体心脏灌注模型,记录和测量心肌单相动作电位复极90%的时程（MAPD90）、心室肌细胞有效不应期（ERP）及ERP/MAPD90比值;另外6只大鼠行心室肌TUNEL染色后检测其心肌细胞凋亡情况;Western blot检测各组大鼠心室肌细胞葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、肌醇需酶1（IRE1）、C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白（CHOP）及缝隙连接蛋白43（Cx43）蛋白表达。结果　与对照组比较,模型组大鼠心率增快,易发生室性早搏,LVESd、LVEDd升高,LVEF降低,血清ST2、BNP含量升高,心室肌细胞ERP/MAPD90降低,凋亡指数（AI）升高,GRP78、IRE1、CHOP表达升高,Cx43表达降低（均P＜0.05）;与模型组比较,黄芩苷低、中、高剂量组上述指标均明显改善,且呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论　黄芩苷具有改善ISO所致心力衰竭大鼠室性心律失常及心功能的作用,其机制可能与抑制心室肌细胞内质网应激及细胞凋亡、提高肌电稳定性相关。     

老年高血压患者神经肽Y与神经降压素的改变及比值变化的临床意义

目的 观察老年高血压病患者神经肽Y（NPY）和神经降压素（NT）水平及其比值的变化在高血压发病中的作用.方法 采用同位素放射免疫法对176例老年高血压患者和84例健康人进行血浆NPY和NT含量的检测.结果 ①高血压患者血浆NPY水平高于对照组（P＜0.01）、NT水平低于对照组（P＜0.01）、NPY/NT比值高于对照组（P＜0.01）.②高血压1、2、3级患者间血浆NPY、NT水平及NPY/NT比值差异明显（P＜0.01）,NPY水平逐渐升高、NT水平逐渐下降、NPY/NT比值逐渐升高.结论 NPY及NT参与了高血压的发病过程,并且与高血压的分级相关,二者可能协同作用,促进高血压的发生、发展.血浆NPY和NT水平及NPY/NT比值在一定程度上可作为评估老年高血压患者病情的指标之一.     

碳酸镧对骨化三醇冲击治疗慢性肾衰竭持续非卧床腹膜透析继发性甲状旁腺功能亢进患者血钙、血磷影响的研究

目的探讨碳酸镧在慢性肾衰竭持续非卧床腹膜透析(CAPD)患者应用骨化三醇治疗继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)时对血钙和血磷的影响。方法将2013年3~6月青岛市市立医院东院腹膜透析中心的CAPD导致SHPT的患者随机分为两组。碳酸镧组予以口服碳酸镧和骨化三醇冲击治疗,碳酸钙组给予碳酸钙和骨化三醇治疗,观察患者血清钙、磷、iPTH的变化。统计分析采用SPSS 17.0软件。结果共纳入40例患者,两组各20例。治疗12周后,碳酸镧组患者血磷(t=5.095,P=0.000)和iPTH(t=1.225,P=0.000)水平均明显下降,且碳酸镧组血钙(t=1.127,P=0.001)、血磷(t=2.035,P=0.000)水平明显低于碳酸钙组。结论碳酸镧能有效治疗CAPD患者应用骨化三醇冲击治疗SHPT时的高钙血症和高磷血症。     

Ca2+在电磁场刺激骨髓间充质干细胞增殖与分化过程中的内流变化

背景:已证实电磁场可通过cAMP-蛋白激酶A信号转导系统调控骨髓间充质干细胞的增殖与分化,但同样作为第二信使的Ca2 相关作用报道较少。目的:观察钙拮抗剂维拉帕米对电磁场刺激骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响,以推断Ca2 在此过程中的内流变化。设计、时间及地点:电刺激细胞学体外观察,于2005-04/06在同济医院矫形外科实验室完成。材料:清洁级4~5周龄SD大鼠6只,维拉帕米为Sigma公司产品,Helmholtz线圈式磁场发生器由海军工程大学电机系设计制造。方法:贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,胰蛋白酶消化传代。取生长良好的第4代细胞,调节密度至1×107L-1,将其分种于4块96孔板内,200μL/孔。正常对照组不进行任何干预;暴磁组接种第2天将细胞放于置有Helmholtz线圈式磁场发生器的37℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度细胞培养箱中进行暴磁,磁场强度0.8mT,频率50Hz,每次暴磁30min,间隔12h,共6次;维拉帕米组加入20μmol/L维拉帕米;联合组加入20μmol/L维拉帕米后进行暴磁。主要观察指标:MTT法检测细胞增殖活性,向成骨细胞分化碱性磷酸酶的含量,改良Gomori氏钙钴法染色定性观察。结果:暴磁3d后,与正常对照组比较,暴磁组细胞增殖活性明显升高(P<0.01),加入维拉帕米进行药物干预后这种促细胞增殖效应消失。未经暴磁的正常对照组、维拉帕米组细胞碱性磷酸酶含量基本相似,均明显高于其余2组(P<0.01);联合组细胞碱性磷酸酶含量高于暴磁组(P<0.01)。碱性磷酸酶染色定性分析结果与上述数据基本一致。结论:在50Hz、0.8mT电磁场作用下,骨髓间充质干细胞Ca2 内流发生变化,且该变化在骨髓间充质干细胞向成骨方向分化过程中产生部分抑制作用,在促其增殖过程中起主导作用。     

电磁场激活细胞外信号调节激酶通络在骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨中的作用

目的探讨电磁场作用于大鼠骨髓间充质干细胞对细胞外信号调节激酶（ERK）信号通路的影响，并进一步研究电磁场诱导所致ERK信号通路变化在骨髓间充质干细胞增殖与分化成骨中的作用。 方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞，取第3代细胞，分为对照组、暴磁组、PD98059组和PD98059+暴磁组。采用Western blotting法检测ERK通路的活性变化，采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞的增殖活性，按照碱性磷酸酶（ALP）试剂盒说明书步骤检测各组细胞ALP活性。 结果①暴磁后5 min，ERK1/2磷酸化水平即明显高于对照组，1 h后仍处于较高水平（P<0.01）；PD98059作用可明显抑制ERK1/2磷酸化水平的升高，提示PD98059可有效阻断ERK通路的激活。②MTT法检测结果提示，暴磁后细胞的增殖活性明显升高，PD98059可明显抑制这种效应。③暴磁组ALP活性明显高于对照组，PD98059+暴磁组ALP活性较暴磁组高（P<0.01），差异有统计学意义。 结论在15 Hz、1 mT的正弦波电磁场作用下，骨髓间充质干细胞ERK信号通路很快被激活，引起细胞增殖活性和ALP活性的改变，这为进一步研究磁场对骨髓间充质干细胞的促增殖和分化成骨机制提供了指导意义。     

维拉帕米在应力对体外骨髓间充质干细胞早期反应基因蛋白表达中作用的研究

[目的]研究维拉帕米(Verapamil)在周期性牵张应力对体外骨髓间充质干细胞(MSCs)早期反应基因蛋白表达中的作用,从而进一步推断出Ca2+ 通道在细胞响应力学的信号传导途径中的作用.[方法]分离并培养骨髓间充质干细胞,利用体外细胞牵张应力装置对第3～6代细胞加载力学信号,在应力干预细胞前加及不加钙离子拮抗剂(维拉帕米),受力结束后,流式细胞术检测细胞内钙离子荧光强度,用RT-PCR以及免疫组化的方法检测各组细胞内c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白表达的情况.[结果]加载力学信号后,细胞内钙离子浓度发生改变,c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白的表达明显增强(P<0.01),经维拉帕米预处理后,以上生物学效应受到抑制(P<0.01).[结论]在牵张应力作用下骨髓间充质干细胞Ca2+内流发生了变化,并且这种变化在骨髓间充质干细胞对周期性牵张应力的早期应答反应中起到了部分作用,可能依赖钙离子通道的活化来调控.