单侧声带运动不良患者嗓音及吞咽功能康复有效性研究

目的:探讨嗓音及吞咽功能康复在单侧声带运动不良患者中的有效性。方法:将40例未行手术治疗的单侧声带运动不良(UVDFP)患者分为对照组和观察组,每组各20例。对照组采用常规嗓音卫生指导干预,观察组采用嗓音及吞咽功能康复联合康复训练。比较两组嗓音声学评分、嗓音障碍指数评估(VHI)评分及吞咽功能。结果:治疗后,观察组平均基频、基频微扰、振幅微扰、噪谐比均低于对照组(P<0.05);VHI各维度评分均低于对照组(P<0.05);吞咽动作启动时间及咽腔收缩率均低于对照组(P<0.05);舌骨喉复合体运动幅度高于对照组(P<0.05)。结论:嗓音及吞咽功能康复训练有助于改善UVDFP患者嗓音质量,提升患者吞咽功能,值得推广应用。     

卒中后认知障碍患者粪便钙卫蛋白测定及其与血清炎性因子的相关性

目的： 探讨卒中后认知障碍（post stroke cognitive impairment,PSCI）患者粪便钙卫蛋白（fecal calprotectin,FC）水平及其与认知状态和血清炎性因子的相关性。方法: 收集2021年3月至2022年3月就诊的PSCI患者32例、卒中后无认知障碍（post stroke with no cognitive impairment,PSNCI）患者44例和无卒中对照者25例,检测并对比3组中FC水平以及PSCI组治疗前后的FC水平。对PSCI组进行简易智力状态检查量表（mini mental state examination,MMSE）和蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive assessment,MoCA）评估,并检测血清C 反应蛋白（CRP）和白介素 6（IL 6）的水平。结果: PSCI组、PSNCI组和对照组的年龄、性别、吸烟史、饮酒史未见明显差异,高血压史和糖尿病史在3组间存在显著差异（P<0.05）,PSCI组FC水平显著高于PSNCI组和对照组（P<0.01）。对PSCI患者改善认知治疗1个月后,PSCI患者FC水平较治疗前显著降低（P<0.01）。在PSCI组中,FC水平与MoCA评分和MMSE评分呈负相关（P<0.01）,与血清CRP水平和血清IL 6水平呈正相关（P<0.01）。结论: PSCI患者FC水平升高,与PSCI患者的认知功能和血清炎性因子具有相关性,在PSCI的发生机制中发挥重要作用。     

放松训练对高考学生身心健康的影响

目的　研究放松训练法对高考学生身心健康的影响 ,为考生心理健康水平的提高 ,减轻考前焦虑提供科学措施。方法　选择同一学校两个高中三年级的班级 ,分别作为对照组 ( n=72 )和放松训练组 ( n=70 )。高考前的 3个月开始进行全身放松训练 ,每天约 2 5分钟 ,连续两个半月。比较训练前后两组考生的心理健康水平 ,并评价放松训练法的作用效果。结果　对照组考生在考前半个月 SCL-90的阳性项目数以及焦虑、强迫、躯体化、人际敏感、抑郁等 5项因子分和 SAS总均分均显著高于 3个月前 ;放松训练组考生经 2个半月的放松训练后 ,其 SCL-90的焦虑、强迫、人际敏感、抑郁、躯体化等 5项因子分和 SAS总均分均显著低于放松训练前 ,且阳性项目数、总均分以及焦虑、强迫、抑郁、躯体化、人际敏感等 5项因子分和 SAS总均分均显著低于对照组高考前半月的相应分值。结论　随着高考的临近 ,考生的心身反应增多且加重 ,心理健康水平明显下降 ;全身放松训练法能有效改善考生的各种心身反应和紧张焦虑状况 ,有利于保护考生的心理健康     

携带肝细胞生长因子基因重组质粒在大鼠体内的组织分布研究

目的 研究携带肝细胞生长因子基因的重组质粒（pUDKH）经肌肉注射给药后在大鼠体内的组织分布及其与大鼠基因组DNA的整合情况。 方法 二级Wistar大鼠雌雄各20只，按体重和取样时间的不同随机分为12h、24h、3d、7d、14d、21d的各实验组（给予pUDKH，2．0mg／kg）和注射后3d取样的对照组（给予PBS，200ul／只），依次将各组大鼠摘眼球取血后脱臼处死，按脑、心、肺、胸腺、肝、肠系膜淋巴结（MLN）、脾、肾、生殖腺、左腿肌肉、右腿肌肉的顺序取样。经典酚／氯仿抽提法提取各组织总DNA，应用紫外分光光度计测定其浓度和纯度，PCR方法检测其中的D肌动蛋白基因；巢式PCR检测各组织总DNA中pUDKH的分布情况；ApnL I酶切分离pUDKH分布阳性各组织中的pUDKHDNA和基因组DNA，巢式PCR检测pUDKHDNA与基因组DNA的整合情况。 结果 各组织总DNA浓度与纯度均符合实验需要，并适于采用PCR或巢式PCR方法进行体内组织分布及基因组DNA整合情况检测。巢式PCR检测显示，在各时间点的右腿肌肉与外周血、注射后3和7d的肝脏、3和14d的生殖腺、7d的胸腺、7和14d的MLN与左腿肌肉等组织中pUDKH分布均呈阳性，而在各时间点的脑、心、肺、脾、肾等组织中pUDKH分布均呈阴性。pUDKH分布阳性的各组织中均未检测到pUDKHDNA与基因组DNA的整合。 结论 pUDKH经肌肉注射给药后，在各时间点大鼠体内各组织中呈现不同的分布谱。在pUDKH分布阳性的各组织中，pUDKHDNA与基因组DNA发生随机整合的概率较低。     

神经元保护蛋白TAT-Bcl-XL的体外高效表达及其功能的初步研究

目的：在原核表达系统中表达对凋亡神经元具有保护作用的重要蛋白Bcl-XL与蛋白质转导序列（PTD）的融合蛋白，并检测重组蛋白对重金属离子所诱导的细胞凋亡的保护作用。方法：通过RT-PCR的方法，用Bcl-XL特异引物从乳腺癌细胞系MCF-7细胞的总RNA中扩增出Bcl-XL基因，构建相应的原核表达载体，体外表达的TAT-Bcl-XL融合蛋白经镍亲和层析介质纯化后，通过免疫荧光方法检测其转导293T细胞的能力；并用流式细胞仪检测融合蛋白抑制细胞凋亡的能力。结果：经RT-PCR从MCF-7细胞总RNA中得到相应的TAT-Bcl-XL基因片段，并将其克隆入pCRT7/CT-TOPO载体中，重组质粒pTBTOPO转化大肠杆菌后，在SDS-PAGE和Western blot的结果中出现了与预期分子量相同的蛋白条带和阳性信号，纯化的TAT-Bcl-XL重组蛋白经免疫荧光检测，主要分布于细胞的细胞质中。流式细胞仪的检测结果显示融合表达蛋白可以有效地抑制Zn2＋离子所诱导的细胞凋亡，使细胞的存活率提高40%。结论：TAT-Bcl-XL融合蛋白在大肠杆菌中获得高效表达，初步的功能性检测表明融合蛋白具有抑制细胞凋亡的功能。     

中国广东人CYP2F1基因遗传多态性研究

目的检测广东地区正常人群和鼻咽癌患者中细胞色素P450酶系CYP2F1基因的多态性，并分析该基因遗传多态性与鼻咽癌易感性的关联。方法采用直接测序法检测40例鼻咽癌患者全血标本中CYP2F1基因全部10个外显子的多态性变化。对于等位基因频率较高的多态性位点，进一步采用错配聚合酶链反应．限制性片段长度多态性检测368例鼻咽癌患者和344名正常对照人群中该位点的等位基因频率。结果在40例鼻咽癌样本中，共检测到CYP2F1基因的35个单核苷酸多态性。其中，10个单核甘酸引起编码的氨基酸改变，1个移码突变，15～16bp之间插入C引起移码突变（15-16ins C），该等位基因频率为25％。但病例-对照分析却未能显示该位点突变与鼻咽癌易感的相关性（P〉0．05）。结论中国广东人的CYP2F1基因遗传多态性位点较多，但暂未发现与鼻咽癌的易感性关联的单一多态位点，多个多态性位点或不同基因多态性位点的协同互补作用可能才是鼻咽癌发生发展的关键影响因素。     

氟尿嘧啶引起大鼠气管损伤修复过程中干细胞的定位

目的 气管干细胞的原位观察。方法 使用5-氟尿嘧啶(5-FU)造成大鼠离体气管环的严重损伤，采用光镜、PCNA免疫组织化学，以及Hoechst33342染色观察气管黏膜的修复过程。结果 5-Fu作用12h后，气管上皮脱落，可见少量间隔分布的类似裸核的细胞呈钉状位于基底膜上，PCNA染色阴性(Go期细胞)，其中少数细胞Hoechst33342染色阴性。去除5-FU6h后，气管黏膜由扁平上皮覆盖；48h后，气管环恢复假复层纤毛柱状上皮。结论 5-Fu能杀死处于细胞周期的气管上皮细胞，对Go期细胞作用很小，残留于基底膜上的裸核样的Go期细胞中含有干细胞，其Hoechst33342染色阴性，并具有排出荧光染料的能力，正是这些细胞的增殖分化，修复了损伤的气管环。     

MTT法评价医用高分子材料的细胞毒性

为研究医用高分子材料的细胞毒性，采用能快速评定细胞增殖率和细胞毒性的比色分析方法-MTT比色法，分别检测三类医用高分子材料的浸提液对小鼠成纤维细胞L929细胞相对增殖率的影响，评价其细胞毒性。参照美国药典的评价标准，三类医用高分子材料均呈现出高的细胞相对增殖率，其细胞毒性为l级，即无细胞毒性。     

针对S基因的siRNA或shRNA表达框对HepG2.2.15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用比较

目的 化学合成针对乙型肝炎病毒（HBV）S基因的siRNA，同时制备针对相同区段的shRNA表达框，并比较二者对HepG2．2．15细胞中HBV基因表达和病毒复制的抑制作用。方法 化学合成针对HBVS基因的带有FITC标记的siRNA，设计合成带有FTrc标记的引物，PCR扩增含有RNA聚合酶Ⅲ启动子H1序列和shRNA编码序列的表达框，并对扩增产物进行纯化，将等摩尔数siRNA和shRNA表达框分别用脂质体转染稳定表达HBV的HepG2．2．15细胞，转染1d后流式细胞仪检测转染效率，转染3d后RT-PCR检测靶基因mRNA的水平，用SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测HBsAg的表达。收集转染前和转染后1、3、5和7d的细胞培养上清，检测HBsAg水平，同时用荧光定量PCR方法检测HBV　DNA的含量。结果成功制备了针对HBVS基因的shRNA表达框，将其与等摩尔数siRNA分别转染HepG2．2．15细胞后，RT-PCR证实细胞中HBV　mRNA水平降低，SDS-PAGE、Westem blot及间接免疫荧光染色检测到HBsAg的表达受到抑制，细胞培养上清中HBsAg和HBV DNA含量下降。与siRNA相比，shRNA表达框对HBV的抑制作用虽然起效较慢，但持续时间更长。结论shRNA表达框和siRNA均可明显抑制HBV的转录和表达，与siRNA相比，shRNA表达框能够更持久地抑制靶基因的表达。     

肝病患者血清T_3、T_4、TSH RIA的变化

我们自1993年6月以来对住院60例成人肝炎、肝硬变患者进行了血清T_3、T_4、促甲状腺激素(TSH)的RIA检测.结果发现肝硬变患者T_3、T_4有明显降低,与正常对照组和肝炎组进行t检验分析具有显著差异(P<0.001),而TSH无明显变化.现将结果报告如下.材料和方法一、对象:肝炎组27例(男24例,女3例),平均年龄40岁;肝硬变组33例(男31例,女2例),平均年龄42岁;正常对照组34例(男26例,女8例),平均年龄39岁.二、方法:TSH测定,RIA双抗体法;T_3、T_4测定,磁性微粒——抗体法.三、统计方法:包括平均数、标准差、t检验.