蛋白酶体抑制剂bortezomib对胆道梗阻大鼠肝脏的保护作用

目的探讨蛋白酶体抑制剂bortezomib对胆道梗阻大鼠肝脏的保护作用.方法将30只大鼠随机分为假手术组(SO组)、胆道梗阻对照组(Con组)和bortezomib实验组(Bor组).Con组通过胆总管结扎建立大鼠胆道梗阻模型,Bor组同法结扎胆总管并于术前1 d、术后第3天腹腔注射bortezomib,假手术组仅行剖腹和胆总管游离.所有大鼠均于术后7 d处死,处死前采集血清测定血清丙氨酸转氨酶(ALT),总胆红素(TB)和总胆汁酸(TBA)水平.免疫组化染色测定肝组织NF-κBp65含量.逆转录-聚合酶联反应测定肝脏组织中TNF-α mRNA水平.结果Con组与Bor组的TB和TBA水平并差异无统计学意义(P＞0.05),而Bor组的ALT水平[(92.4±21.4)μmo1/L]明显低于Con组[(145.7±33.5)μmol/L],P＜0.05.Bor组的NF-κB p65亚基阳性染色率(11.6%±2.7%)明显低于Con组(15.5%±4.3%),P＜0.05.而逆转录-聚合酶联反应发现,Bor组TNF-αmRNA相对表达量(1.0±0.2)明显低于Con组(1.3±0.4),P＜0.05.结论bortezomib可以通过抑制NF-κB的活化减少炎症反应的发生,从而减轻因胆道梗阻引起的肝脏损害.     

肝叶段切除治疗肝内胆管结石237例

目的 探讨肝内胆管结石的术前诊断、肝叶段切除的部位和范围以及联合术式的应用与疗效.方法 回顾性研究分析该院1995年1月～2006年12月237例肝内胆管结石肝叶段切除的病例,在237例中,根据肝内胆管结石的分布及胆管狭窄的部位,行左肝外叶切除+T管引流98例.左肝外叶切除+肝门胆管修复整形+T管引流19例,左肝外叶切除+肝门胆管整形+肝门胆管空肠Roux-en-y吻合术47例,左半肝切除+肝门胆管整形+肝门胆管空肠Roux-en-v吻合术14例,左肝外叶切除+左肝断面胆管空肠Longmire吻合3例,肝方叶切除+肝门胆管整形+肝门胆管空肠Koux-en-y吻合术17例,Ⅴ、Ⅵ肝段切除+T管引流术11例,Ⅵ、Ⅶ肝段切除+T管引流术28例.结果 术后随访时间8个月～11年(平均82个月),优良率达96.6%.1例于术后10 d死于多器官功能衰竭,4例发生术后残石(1.7%),3例偶有胆管炎发作.结论 重视术前诊断的准确性,根据肝内胆管结石的分布及胆管狭窄的部位.合理选择肝叶段切除的部位和范围及合理应用联合术式,可以获得良好的治疗效果.     

腹腔镜胆囊切除术中胆囊床肝中静脉及其属支损伤的预防和处理

目的探讨腹腔镜胆囊切除术中胆囊床肝中静脉及属支损伤出血的预防及处理。方法回顾分析17例腹腔镜胆囊切除术中胆囊床肝中静脉及属支出血处理的临床资料。结果 17例肝中静脉及其属支术中出血,16例在腹腔镜下成功止血,1例中转开腹止血,术后无再出血。结论腹腔镜胆囊切除术中应重视肝中静脉及其属支的存在,避免其发生损伤。术中一旦发生肝中静脉及其属支损伤出血,应判断清楚出血血管的粗细和走行方向,决定钳夹止血或缝合止血。对合并肝硬化,出血量大的病例,最好中转开腹止血。     

地震伤后挤压综合征154例报告

目的：探讨地震伤后挤压综合征有效的诊断和治疗方法。方法：对154例地震伤后挤压综合征患者依据病史、症状、体征及实验室检查结果进行诊断，并主要针对急性肾损伤和局部创伤给予综合治疗。结果：154例中，128例基本治愈，26例行血液透析患者肾功能明显改善，无一例发生持续性肾功能损害和死亡。结论：采用以补液、利尿、血液透析、局部切开减压和全身营养支持为主的综合方法治疗挤压综合征并急性肾功能损伤患者可很好地控制病情发展，促进转归。     

乳痈方对4T1乳腺癌小鼠胸腺上皮细胞表型变化的作用及机制研究

目的:探讨乳痈方对4T1乳腺癌小鼠胸腺上皮细胞表型变化的作用及机制。方法:①选用BALB/c小鼠,建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型。模型动物随机分为模型组、环磷酰胺(CTX,30 mg/kg)组和乳痈方低、中、高剂量(0.145,0.29,0.58 g/kg)组,每组4只。各组给予相应干预,连续20 d。末次给药后,采集小鼠胸腺、肺、脾、肿瘤、淋巴结组织,计算脏器指数和抑瘤率;观察肺表面结节情况,计算肺转移率。HE染色后光镜下观察胸腺形态学变化,免疫组化检测胸腺组织钙黏附蛋白E(E-cadherin)和波形纤维蛋白(Vimentin)的表达。②体外分离小鼠原代胸腺上皮细胞(TECs),通过转染SV40T基因构建永生化TECs(iTECs)并验证。采用不同浓度(0、25、50、100、200、400μg/ml)乳痈方提取液处理iTECs。细胞培养48 h后,MTT法检测细胞增殖率,结晶紫染色观察细胞增殖情况。将iTECs分为空白组、TGF-β_1组(10 ng/ml TGF-β_1)、乳痈方低剂量组(10 ng/ml TGF-β_1+50μg/ml提取液)、乳痈方中剂量组(10 ng/ml TGF-β_1+100μg/ml提取液)、乳痈方高剂量组(10 ng/ml TGF-β_1+200μg/ml提取液)。先加入TGF-β_1诱导48 h后,再给予相应浓度的乳痈方提取液干预24 h。免疫荧光和PCR检测细胞表型标志物E-cadherin、Vimentin、α-微管蛋白(α-tubulin)及相关转录因子Zeb 1、Snail 1的表达水平。建立Smad转染的iTECs,荧光素酶报告基因检测乳痈方对TGF-β_1诱导的转染iTECs细胞Smad通路活化的影响。结果:①与模型组相比,乳痈方低、中、高剂量组的肿瘤指数均显著降低(P0.05),抑瘤率分别为33.45%、31.43%和6.49%;肺转移总数以及直径2 mm转移灶数均明显减少(P0.05,P0.01),肺转移率分别为75%、75%和100%。HE染色观察显示,模型组小鼠胸腺组织皮质和髄质交界模糊,细胞排列紊乱,皮质萎缩;乳痈方各剂量组小鼠的胸腺组织皮质区和髄质边界较明显,皮质区细胞总数较模型组显著增多(P0.05,P0.01),髄质区细胞总数较模型组显著减少(P0.05,P0.01)。免疫组化检测显示,乳痈方干预后,模型小鼠胸腺组织上皮细胞标记物E-cadherin阳性表达增多,间质细胞标记物Vimentin阳性表达减少。②成功构建iTECs,iTECs与TECs形态相似,且高表达SV40基因和CK5蛋白。MTT检测和结晶紫染色观察显示,100、200、400μg/ml乳痈方干预可促进iTECs增殖(P0.01)。③TGF-β_1诱导后,iTECs逐渐变为长梭形,E-cadherin表达和mRNA水平降低(P0.05),Vimentin表达和mRNA水平上调(P0.05),且相关基因Snail 1和Zeb 1的mRNA水平显著升高(P0.01)。乳痈方干预可抑制TGF-β_1诱导的细胞形态向长梭形变化,上调E-cadherin表达和mRNA水平(P0.01),下调Vimentin表达和mRNA水平(P0.05,P0.01),且显著降低Snail 1和Zeb 1的mRNA水平(P0.01)。④TGF-β_1诱导可引起iTECs细胞Smad mRNA水平明显上调(P0.01),不同剂量乳痈方作用均可使Smad mRNA水平显著下调(P0.01),且低剂量组的信号通路活化程度较TGF-β_1组明显降低(P0.05)。结论:乳痈方可有效逆转乳腺癌小鼠胸腺上皮细胞的表型变化,其作用机制与抑制TGF-β_1/Smad通路有关。     

顺铂联合异甘草酸镁对原发性肝癌小鼠疾病进展影响及相关机制研究

目的 了解顺铂联合异甘草酸镁调控ERK1/2信号通路干预原发性肝癌小鼠疾病进展及对PGE2及γδT细胞表达水平的影响。方法 建立45只原发性肝癌小鼠模型,随机分为对照组﹑顺铂组﹑联合用药组,各15只,分别腹腔注射给予生理盐水﹑顺铂﹑顺铂联合异甘草酸镁。比较其治疗效果,血清肝功能指标﹑前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)水平,肝脏核因子-κB(nuclear facto-κB,NF-κB)p65和炎症因子,细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)及p-ERK1/2蛋白相对表达量,γδT细胞百分比。结果 联合用药组肿瘤质量小于顺铂组,顺铂组肿瘤质量小于对照组(P<0.05);联合用药组抑瘤率大于顺铂组(P<0.05);联合用药组血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)﹑PGE2水平低于顺铂组,顺铂组低于对照组(P<0.05);联合用药组肝脏肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)﹑血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)﹑NF-κB p65蛋白量低于顺铂组,顺铂组低于对照组(P<0.05);三组肝脏ERK1/2蛋白相对表达量无差异(P>0.05);联合用药组肝脏p-ERK1/2蛋白相对表达量﹑γδT细胞百分比低于顺铂组,顺铂组低于对照组(P<0.05)。结论 顺铂联合异甘草酸镁可调控ERK1/2及NF-κB信号通路从而干预原发性肝癌小鼠疾病进展,并且可降低γδT细胞百分比,调节免疫机能。     

夏枯草颗粒质量标准提高的实验研究

目的建立夏枯草颗粒的质量控制方法,为其质量标准提高提供依据。方法建立夏枯草颗粒的薄层鉴别方法,采用高效液相色谱法测定夏枯草颗粒中的迷迭香酸含量。结果薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰,含量测定中迷迭香酸在0.2069~1.2414μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为100.52%(RSD=2.0%)。结论所建立的方法简便、准确,可以有效地控制夏枯草颗粒的质量。     

大鼠“二袖套法”原位肝移植模型的手术体会

目的：建立稳定的大鼠原位肝移植模型。方法：选用健康雄性Wistar大鼠,参考Kamada建立的＂二袖套法＂原位肝移植模型,并加以改良,统计手术各步骤时间以及受体的生存率情况。结果：共进行移植手术86例。供体手术时间为（29.0±0.8）min,受体手术时间为（42.0±0.7）min,无肝期为（15.0±0.3）min。受体术后24h、1周、1个月和3个月的生存率为分别94.2%、91.7%、88.3%、83.7%。结论：改良＂二袖套法＂原位肝移植模型是器官移植基础研究的稳定的动物模型,重视供体的准备是手术成功的关键。     

HER2、STRT1及PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达及对预后的影响

目的 观察人表皮生长因子受体2(HER2)、沉默信息调节因子1(SIRT1)及人第10号染色体缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物基因(PTEN)在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达及对预后的影响.方法 选择2018年2月—2019年3月收治的124例膀胱尿路上皮细胞癌的癌组织标本设为研究组,并选取距癌组织3 cm处的正常组织作为对照...