SA-hTNF-α膜锚定修饰治疗表浅膀胱癌的实验研究

目的 探讨一种新型蛋白质锚定技术与人肿瘤坏死因子α(hTNF-α)相结合在小鼠表浅膀胱癌治疗中的作用.方法 将120只雌性C57BL/6j小鼠分为5组:正常未处理组(空白对照组)、PBS对照组、可溶hTNF-α治疗组、SA-GFP锚定组、SA-hTNF-α锚定治疗组,每组22只小鼠.建立小鼠正位表浅膀胱癌模型,24 h后,将小鼠膀胱内膜生物素化,继而将hTNF-α融合蛋白灌注人小鼠膀胱中.每4 d重复膀胱灌注锚定治疗1次,共6次.免疫组化检测SA-hTNF-α融合蛋白在生物素化的小鼠膀胱黏膜的存留时间及膀胱黏膜和肿瘤组织中CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞的分布,观察肿瘤生长情况及小鼠的生存期.检测肿瘤特异性淋巴细胞的杀伤活性.用MB49细胞再次攻击对SA-hTNF-α融合蛋白治疗有效的小鼠,观察肿瘤生长情况及小鼠的存活期.结果 免疫组化显示:SA-hTNF-α融合蛋白可以在膀胱黏膜表面上稳定存留7d;MB49肿瘤细胞膀胱内种植后第60天,SA-hTNF-α锚定治疗组有18只小鼠存活(18/22),其中9只小鼠体外无触及肿瘤;PBS组全部死亡.对9只无瘤存活的小鼠再次用MB49细胞皮下攻击,60d后5只小鼠仍存活(5/9),与对照组有显著性差异(P<0.05).膀胱癌病灶中CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞,SA-hTNF-α锚定治疗组较PBS对照组明显增多(P<0.05).SA.hTNF-α锚定治疗组小鼠的杀伤效应明显强于正常组小鼠(P<0.05).结论 SA-hTNF-α稳定的原位锚定于小鼠膀胱黏膜表面,可有效抑制小鼠表浅膀胱癌进展,显著延长荷瘤小鼠的生存时间,有效抵抗同源肿瘤细胞的再次攻击.     

采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源抗肾癌抗体基因库

目的 采用哺乳动物细胞表面展示技术构建全长人源抗肾癌抗体基因库.方法 分离肾癌患者的外周血淋巴细胞(PBMC),提取PBMC的总RNA,采用RT-PCR的方法 扩增抗体全长Kappa型轻链(LCκ)和重链可变区(VH)基因,分别插入载体pDGB-HC-TM,电击转化感受态大肠杆菌TOP010,构建轻、重链抗体基因库,然后将轻、重链抗体基因库联合转染293T细胞,流式细胞仪分析全长人源抗体在293T细胞表面的表达.结果 成功构建IgG1-Kappa型抗肾癌抗体基因库,随机挑选的克隆经DNA序列分析显示轻、重链库的序列正确性达90%(9/10)和80%(8/10),流式细胞仪分析显示来自轻、重链库的上述克隆各有7个可检测到相应基因在293T细胞表面的表达,可表达抗体库库容量高达7.5×1010.结论 IgG1-Kappa型抗肾癌抗体基因库转染293T细胞后能够在细胞表面表达全长人源抗体,抗体的多样性为下一步筛选特异性抗体奠定良好的基础.     

建构主义理论与临床医学教学模式革新

本文对建构主义的渊源与内涵进行了探讨,旨在为临床医学教学模式革新提供理论支持。通过与传统教学模式的对比,对建构主义在临床医学教学模式革新中的合理应用进行了探讨。研究认为,建构主义教学模式强调以学生为中心,在教师的引导下,通过情境创设和协作学习由学生自主完成对所学知识的意义建构,并对学习效果进行有效评价,这一教学模式发挥了学生的主观能动性,有利于学生创新精神和实践能力的培养。     

保留肾单位手术治疗早期小肾癌21例临床分析

目的 探讨保留肾单位手术治疗早期小肾癌的临床效果。方法 1999年4月~2004年3月,行保留肾单位手术治疗小肾癌21例,其中孤立肾1例,对侧肾有病变或肾功能受损3例,对侧肾正常17例。肿瘤直径1.5~6.0 cm,平均直径2.8cm;其中对侧肾正常者直径均<4cm,平均2.5cm;对侧肾有病变或受损者平均直径为4.2cm。TNM分期:T₁期16 例,T₂期4 例,T₃期1例。4例行肿瘤剜除术,10例行肾极切除术,7例行肿瘤楔形切除术。结果 21例随访7~66个月,平均随访40.8个月。1例3年后发现右肺及纵隔转移,1例术后27月因慢性肾小球肾炎接受透析治疗。其余19例未见并发症及肿瘤局部复发。结论 保留肾单位手术是早期局限性肾癌的安全有效治疗方法,可作为治疗对侧肾正常直径<4cmT₁~T₂期局限性肾癌的金标准。     

尿液中膀胱肿瘤标记物的研究进展

联合检测几种膀胱癌肿瘤标志物或改进现有的检测方法来提高膀胱癌肿瘤标志物的特异度,将是近阶段膀胱癌诊断的重要研究方向.     

腔镜技术在泌尿外科教学中的应用

随着现代医学观念的改变,外科手术和器械、设备改进及医学科学技术的不断发展,减少创伤、外科微创化的观念已经逐步渗透到外科学的各个方面,以腔镜技术为代表的微创外科手术技术应运而生.在泌尿外科领域,这一技术更是发展迅速,一些常规的诊断和治疗方法已经转变为利用为内窥镜进行操作.我科在开展各项腔镜手术的基础上,充分发挥其优势,将腔镜技术运用到教学中,取得了较好的效果,现总结如下.     

腺病毒介导的CD-TK融合基因联合GCV和/或5-Fc对人膀胱癌细胞的杀伤作用

目的：研究腺病毒介导的CD—TK融合基因联合前体药物对人膀胱癌细胞的杀伤作用。方法：利用含有CD—TK融合基因及绿色荧光蛋白（GFP）基因的复制缺陷腺病毒转染人膀胱癌细胞株T-24细胞,GFP表达可作为转染是否成功的间接标志,PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳检测转染后细胞CD及TK基因序列的表达情况。用丙氧鸟苷（GCV）和／或5氟胞嘧啶（5-FC）,作为前体药物,以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测其对转染后T-24细胞的杀伤作用及旁观者效应。结果：腺病毒在体外能高效转染T-24细胞,72h转染效率可接近100％。GCV和／或5-FC均能有效杀伤转染后膀胱癌细胞,给予相同浓度前体药物时,联合用药组显示出较强的肿瘤杀伤作用。0．5mg／ml GCV、0．1mg／ml 5-Fc和GCV＋5-Fc作用于转染后T-24细胞72h细胞生存率分别为23．30％、20．63％、10．10％。旁观者效应杀伤实验表明5-Fc组较GCV旁观者效应明显,而联合用药组显示出更强的旁观者效应。利用Hoechst-PI双染色法检测经前体药物作用后转染细胞,各组均可见凋亡细胞,但联合用药组凋亡细胞较单一用药组多。结论：CD—TK融合基因联合应用GCV和／或5-Fc能有效杀伤膀胱肿瘤细胞,并存在较强的旁观者效应,其杀伤机制可能与凋亡相关,为适用于人膀胱癌的治疗提供一条新思路。     

睾丸横过异位的诊断和治疗（附一例报告并文献复习）

目的 探讨睾丸横过异位的病因、诊断和治疗.方法 报告一例睾丸横过异位,行精索松解并将异位睾丸通过阴囊纵隔进行复位固定.结果 随访6个月,患儿双侧睾丸位置良好,血流正常.结论 睾丸横过异位是一种非常罕见的男性生殖系统先天性畸形,病因不明,宜采用手术治疗.

Abstract：

Objective To study the etiology,diagnosis and treatment of transverse testicular ectopia(TTE).Methods A case of TTE was treated with orchidopexy.Results Six months after the operation,both of the two testes were in proper positions with normal vascular supply.Conclusion TTE is a rare congenital abnormality of the male reproductive system with unknown etiology,and surgical correction remains the best option for treatment.     

先天性阴茎缺如1例

患儿,男,13岁。因先天性阴茎缺如、异位排尿13年于2006年1月入院。患儿出生时被父母发现阴茎缺如,尿液从肛门内与大便分别排出,一直未到医院求治。体检:阴茎缺如,阴囊大小正常,双侧精索、睾丸、附睾未见异常,在会阴部未查到尿道出口。入院诊断:先天性阴茎缺如。入院后检查:睾酮     

逆转录病毒载体介导HyTK基因治疗人膀胱癌体外实验研究

目的探索用逆转录病毒作载体介导HyTK基因转移入人膀胱癌细胞中表达以及HyTK基因转移联合丙氧鸟苷(GCV)对体外人膀胱癌细胞的杀伤作用。方法含HyTK基因的逆转录病毒载体LHyTKN,经包装细胞PA317包装后,获得重组逆转录病毒;病毒感染人膀胱癌细胞株EJ并进行潮