恶性疟原虫环子孢子蛋白在无细胞表达系统的表达及纯化研究

目的:应用麦胚无细胞表达系统(Wheat Germ Cell-Free System),表达及纯化恶性疟原虫环子孢子蛋白(Circumsporozo-ite protein,CSP),以便用于免疫学评价。方法:根据从PlasmoDB检索获得的恶性疟原虫CSP基因序列,设计一对特异引物,以从ATCC获得的恶性疟原虫3D7基因组质粒(P.f.3D7 genomic DNA)为模板,经PCR反应扩增目的片段。PCR产物经NcoI与Sma I双酶切后,与经过同样酶切的pIVEX 1.3WG载体连接,随后转化大肠杆菌DH5а,经筛选获得pIVEX WG1.3-CSP重组质粒。将该重组质粒加入到麦胚表达试剂盒并按照说明书进行表达,表达产物经亲和层析柱纯化,最终获得CSP蛋白。结果:PCR反应成功扩增CSP基因序列,并成功构建pIVEX WG1.3-CSP重组质粒;经WB试验证明,麦胚无细胞表达系统可成功表达并纯化CSP蛋白。结论:麦胚无细胞表达系统可高效表达恶性疟原虫CSP,为CSP用于后续的诊断试剂和疫苗评价方面的研究打下了坚实的基础。     

黄连解毒汤不同组分群对热毒血瘀证大鼠的影响

目的:探讨黄连解毒汤各组分群对热毒血瘀证大鼠的影响。方法:采用内毒素与角叉菜胶联合制备大鼠热毒血瘀模型,分别灌胃黄连解毒汤水提物、总生物碱、总黄酮和总环烯醚萜后,观察不同组分群对热毒血瘀模型大鼠一般状态、血象和血液流变学的影响。结果:造模后大鼠一般状态差,有便溏等表现,白细胞有升高,全血粘度、红细胞压积、全血低切相对指数均明显升高(P0.05或P0.01);各预防给药组可明显改善大鼠的一般状态,使模型大鼠的血液全血粘度、压积明显降低,总生物碱还能明显降低全血高切还原粘度(P0.05或P0.01)。结论:黄连解毒汤水提物、总生物碱、总黄酮和环烯醚萜均对热毒血瘀证大鼠具有一定治疗作用,可改善其热毒症状,改善血液流变性,其中总生物碱是主要活性组分群。     

HPLC方法研究葛根素混合胶束在Beagle犬体内的药代动力学(英文)

采用高效液相色谱法测定Beagle犬口服葛根素原料药及自制葛根素混合胶束后葛根素的血药浓度, 并计算其药代动力学参数, 比较两者的生物利用度。Beagle犬随机分为两组, 采用单剂量灌胃给予葛根素原料药与葛根素混合胶束, 于不同的时间点取血并用HPLC法测定葛根素的血浆药物浓度。HPLC条件: 色谱柱为DIKMA ODS C18柱 (150 mm×4.6 mm, 5 μm), 保护柱为DIKMA ODS C18柱 (8 mm×4 mm); 流动相甲醇-水 (25:75, v/v); 柱温30 °C; 流速1 mL/min; 检测波长250 nm, 内标物为茶碱。采用WinNonlin 6.1软件求算药代动力学参数。葛根素原料药与葛根素混合胶束在Beagle犬体内的药物动力学参数Tmax分别为61.48和202.91 min, AUC分别为515.96和2796.43 min·μg/mL, CL/F分别为232.58和42.91 mL/min/kg。Beagle犬口服葛根素混合胶束与葛根素原料药的相对生物利用度为542.0%。混合胶束制剂明显提高了葛根素在Beagle犬体内的生物利用度, 且减缓消除速率, 延长达峰时间, 起到了长效、缓效的作用。     

民族药紫丹参的本草考证

紫丹参为彝族、苗族等少数民族民间常用药物,应用广泛,但其药用历史及本草考证资料有限。该文通过系统查阅历代本草文献,结合我国几种鼠尾草属植物的形态描述和野外实地调查,对民族药紫丹参的基原、名称、药用历史、功能主治、民间应用、药理作用等进行了系统考证和整理,以期为紫丹参资源合理利用和开发提供科学依据。研究认为古代本草记载的紫丹参与今用紫丹参物种一致,为云南鼠尾草Salvia yunnanensis的根,其药用历史约600年,具有广泛的民间临床应用基础。主要用于经闭、痛经、月经不调、跌打肿痛、肢体麻木及多种血瘀证。紫丹参的相关临床应用与与现代药理学证据是相互支撑的,表明基于临床经验总结的传统医学具有较高的挖掘价值。基于本草文献考证的证据表明,紫丹参在妇科、血瘀等领域具有较高的研究开发价值,应充分挖掘紫丹参的民间临床应用经验,在此基础上,进一步加强其物质基础、药效、作用机制等相关研究,促进紫丹参的资源利用和产品开发,使其更好服务于人类。     

76例尖锐湿疣疗效观察

尖锐湿疣常为多发,有治疗后易复发的特点.病程过久易转化为鳞状上皮癌.自2000年10月～2004年10月新疆昌吉回族自治州疾病预防控制中心妇幼中心收治了76例尖锐湿疣患者,疗效较为满意,现报告如下.     

足月头位胎膜早破102例分析

胎膜早破是产科最常见的分娩并发症,其发生率近年有增高趋势,与难产及产墀感染有密切联系。发生胎膜早破后,95％的孕妇将在24小时内分娩,若临床处理不当,易并发官腔感染、产后出血、围产儿感染及剖宫产率升高,因此应引起重视。现将我院102例头位足月胎膜早破病例进行回顾性分析。     

新型冠状病毒肺炎疫情期间临床试验工作现状的调查与研究

新型冠状病毒肺炎疫情蔓延下,临床试验工作的节奏遭受巨大挑战,南京大学医学院附属鼓楼医院基于疫情期间临床试验工作指引和相关法规,通过设计调查问卷,调研临床试验工作开展现状并进行分析,对在研项目的研究者、临床监查员(clinical research associate,CRA)、研究协调员(clinical resear...     

α-细辛脑治疗癫痫32例

本文报道α-细辛脑治疗癫痫大发作及精神运动性发作共32例,剂量90-270mg/d,有效率为59％,其中15例单独接受α-细辛脑(另17例接受α-细辛脑加其它抗癫痫药)有效率为59％;另一组15例单独用苯妥因治疗具同样发作类型的癫痫病人进行对照观察,有效率为53％。后者与上述2组比较均无显著差异,而且不良反应小,说明α-细辛脑控制癫痫的疗效可与苯妥因相媲美,是一新型抗癫痫药。     

赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响

目的 探究赶黄草水煎液在体外对金黄色葡萄球菌(SA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物膜(MRSA)形成的影响。方法 采用微量肉汤稀释法测定赶黄草水煎液对金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),根据MIC和MBC绘制杀菌曲线,采用结晶紫染色法和激光共聚焦观察赶黄草水煎液对SA和MRSA生物膜形成的影响,并通过测定胞外多糖和胞外DNA的含量研究赶黄草水煎液破坏SA和MRSA生物膜的作用方式。结果 赶黄草水煎液对SA的MIC和MBC分别为1.36和2.71 mg/mL,对MRSA的MIC和MBC为2.71和5.73 mg/mL;赶黄草水煎液可使SA和MRSA均生长受到抑制,抑制生物膜的形成、减少胞外多糖和胞外DNA的释放。结论 赶黄草水煎液对SA和MRSA具有良好的抑菌作用,可通过抑制胞外多糖和DNA的分泌破坏生物膜的形成。     

初免-加强免疫方案在黑猩猩中诱导强的抗恶性疟原虫TRAP抗原的细胞免疫应答

恶性疟原虫所致的疟疾是热带国家死亡率和发病率极高的疾病之一。耐药疟原虫的出现和蚊媒控制方法的失败 ,使得人们急需研究和开发疟疾疫苗。本文作者对两只黑猩猩通过肌肉注射疫苗来预防恶性疟原虫感染。　　疫苗是表达恶性疟原虫红细胞前期抗原血小板反应蛋白相关粘附蛋白 ( Pf TRAP)和肝细胞期特异性抗原 - 1 ( Pf LSA- 1 )的质粒DNA。 4次免疫后 3个月 ,用 EL ISAPOT或细胞毒性 T细胞 ( CTL )试验未能检出疟疾特异性 T细胞。然后用表达 Pf TRAP的重组安卡拉痘苗病毒 ( MVA)加强免疫 3次。6周后 ,用 ELISAPOT和 ELISA…