23-羟基白桦脂酸的30位羟基衍生物的合成及其抗肿瘤活性

目的:对天然活性化合物23-羟基白桦脂酸进行结构修饰,寻找新的抗肿瘤候选化合物。方法:将23-羟基白桦脂酸3,23位羟基经乙酰化保护以及28位酯化得23-羟基白桦脂酸酯,再与间氯过氧苯甲酸进行环氧化反应,开环及脱保护得到目标化合物。用MTT法进行抗肿瘤活性的测定。结果:所合成的新化合物6a-e和7a其结构均经过红外光谱,质谱和核磁共振氢谱确证。目标化合物6a-e的抗肿瘤活性在多个细胞系中高于23-羟基白桦脂酸。结论:23-羟基白桦脂酸的衍生物6e可作为比较有潜力的候选化合物进一步进行抗肿瘤活性研究。     

C—反应蛋白在慢性乙型肝炎中的表达

目的了解慢性乙型肝炎时，Ｃ－反应蛋白（ＣＲＰ）在肝细胞中的表达。方法用本室建立的ＬＢＡ法检测４０例ＨＢｓＡｇ阳性慢性肝炎的肝组织和１５例ＨＢｓＡｇ阴性的正常肝组织的ＣＲＰ原位表达；用免疫双标记染色检测肝细胞中ＣＲＰ、ＨＢｓＡｇ的表达。结果４０例肝炎标本ＣＲＰ均呈阳性，表达位置和形态与ＨＢｓＡｇ相似；免疫双标记染色显示肝细胞中ＣＲＰ与ＨＢｓＡｇ有重叠。此外，Ｔ淋巴细胞也表达ＣＲＰ。结论ＣＲＰ可与ＨＢｓＡｇ形成复合物。ＣＲＰ可能与慢性乙型肝炎的发病机制有关     

人胆管癌裸鼠移植瘤模型的建立

目的：建立人胆管癌裸鼠移植瘤1号和2号模型。方法：将人胆管癌组织接种于裸鼠皮下和肝脏，逐代观察移植瘤的生长情况，绘制其生长曲线，进行形态学和生物学特性鉴定。结果：建立了人胆管高分化粘液腺癌裸鼠移植瘤1号和中分化乳头状腺癌裸鼠移植瘤2号模型。皮下移植瘤生长率为40％；1、2号模型移植成功率分别为97．7％和100％，潜伏期分别为26d和217d。移植瘤在形态和生物学上仍保持人胆管癌的特点。结论：裸鼠移植瘤1、2号模型是一种接近人体的胆管癌模型，可为胆管癌研究提供实验平台。     

麦冬皂苷药理作用研究进展

麦冬作为一种滋阴药,在传统中药中占有重要地位。随着对麦冬研究的不断深入,其主要有效成分皂苷类的药理活性也不断被发现。综述近年来麦冬皂苷在抗心脑血管疾病、抗衰老、改善学习记忆障碍、抗肿瘤、抗辐射、抗炎、免疫调节、镇咳、改善肝肺病理性损伤等方面的药理作用研究进展,以期为今后对麦冬及其皂苷类活性成分的深入研究和开发利用提供参考。     

骨桥蛋白启动子区报告基因的构建

目的 克隆和构建带人骨桥蛋白(OPN)启动子区基因的载体pGL3-OPN.方法 一步法提取人脐静脉内皮细胞(HUVEC)总DNA,PCR扩增 OPN全长基因,克隆入T载体,测序,双酶切连入真核表达载体pGL3-vector,酶切鉴定.将构建好的pGL3-OPN瞬时转染到人乳腺癌细胞MDA-MB-435中,利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测,通过计算两种质粒荧光素酶活性的比值来筛选药物.结果 扩增出人OPN基因全长,测序结果和GenBank记载一致,成功克隆入真核表达载体.p47可一定程度激活OPN启动子活性.结论 成功构建带有人OPN基因的真核表达载体pGL3-OPN.     

锌指蛋白对肿瘤干细胞调控作用的研究进展

肿瘤干细胞是一种具有自我更新潜能的肿瘤细胞,发现于多种类型肿瘤中,其与肿瘤的发生、发展、复发及耐药等密切相关。多项研究证实,锌指蛋白可在转录和翻译层面对肿瘤干细胞进行调控。本文主要探讨锌指蛋白在肿瘤干细胞中的研究进展,旨在进一步阐明肿瘤干性的发生和维持机制,为肿瘤的临床治疗提供依据。     

沉默CC型趋化因子受体5对人乳腺癌细胞黏附及迁移的影响

构建CC型趋化因子受体5(CCR5)基因shRNA的真核表达载体,探讨沉默CCR5对乳腺癌细胞黏附与迁移能力的影响。在多种人乳腺癌细胞中检测CCR5的基因表达,选择CCR5表达较高的MDA-MB-231细胞做为基因沉默的研究对象;设计并合成2对靶向人CCR5基因的RNA沉默序列,连入基因沉默载体pSilencer 2.1-U6中,构建沉默质粒shCCR5-1 和shCCR5-2,定量PCR和蛋白印迹法检测CCR5基因沉默的效率;以细胞黏附实验和Transwell趋化小室实验分别检测沉默CCR5对MDA-MB-231细胞黏附和迁移能力的影响。结果表明,沉默CCR5可以抑制MDA-MB-231细胞的黏附能力,同时显著降低MDA-MB-231细胞的迁移和趋化。     

肿瘤相关脂肪微环境与肿瘤的恶性发展

肿瘤周围脂肪组织可通过激素、脂肪因子及脂肪酸等生物活性分子与肿瘤细胞产生复杂“对话”,并在肿瘤增殖、侵袭及转移等恶性事件中扮演重要角色。伴随肿瘤发展演化,肿瘤周围脂肪组织在原有结构及功能基础上,发生了丰富而复杂的变化。本文新提出“肿瘤相关脂肪微环境”的概念,并对肿瘤相关脂肪微环境的构成、特点及成因进行分析,进一步探讨其在不同肿瘤恶性进程中的可能作用,以期为靶向肿瘤相关脂肪微环境抗肿瘤药物的开发及临床应用提供理论支持。     

新型表位基因疫苗的构建及对小鼠黑色素瘤的影响

目的：构建以MAGE-1（161—169）为表位的癌症基因疫苗并检测其抗小鼠黑色素瘤效果。方法：构建基因疫苗pcDNA—HSP70-MAGE—l（161-169）,并免疫C57BL／6小鼠。最后一次免疫后第2周,接种小鼠黑色素瘤细胞。于肿瘤细胞接种后14d,处死全部动物,称量肿瘤的重量。采用ELISA法对小鼠血清中抗MAGE-1-IgG类抗体及小鼠原代脾淋巴细胞IFN-7释放水平进行检测。结果：pcDNA-HSP70-MAGE-1（161—169）表位基因疫苗能够成功地诱发机体产生抗MAGE-1的特异性抗体,并能在体内起到抗小鼠黑色素瘤作用,抑瘤率为40．7％。同时还能提高约3．05倍的小鼠原代脾淋巴细胞IFN-7释放量。结论：pcDNA-HSP70-MAGE-1（161-169）有望成为有效的抗小鼠黑色素瘤基因疫苗。     

内皮细胞三维培养芽生模型的构建

构建内皮细胞三维芽生模型,为调控肿瘤血管生成药物的药效研究提供一种更为准确的检测手段。通过倒挂悬滴式的培养方法使脐静脉内皮细胞形成致密的细胞团,再将细胞团分别放入Matrigel,鼠尾胶及纤维胶3种基质中进行三维培养。结果显示内皮细胞团在纤维胶中形成了明显的相互连接的毛状管腔样结构,即芽生。经验证,内皮细胞团在纤维胶中能形成明显的管腔样结构,且该方法能够成为一种体外观察研究管腔形成的有效方法。