Effect of BMPs on hematopoietic injury of acute radiation sickness in mice

Objective: To investigate the effect of bone morphogenetic proteins (BMPs) on hematopoietic injury of acute radiation sickness in mice. Methods: Mice were subjected to whole-body 60Co γ ray irradiation, then bpBMP was put into spatium intermusculare or rhBMP-2m, PBK/ hBMP-2 -NIH3T3 cells were injected into abdominal cavity. The effect of BMPs on hematopoiesis including some hematological parameters, the survival rate of 30 d and formation of bone marrow CFU-GM colony were detected at postradiation. Results: pbBMP (purified bovine bone morphogenetic protein) increased the formation of bone marrow CFU-GM colony (P<0. 05) on d 10 after irradiation. rhBMP-2m increased the survival rate of mice irradiated by 7. 5 Gys Mice in control group died in 30 days, while 10%, 15% and 35% mice survived when they were injected i. p. with 0. 5 mg, 1. 0 mg and 2. 0 mg of rhBMP-2m respectively. All hematological parameters of treated mice were significantly higher than those of control group (P<0. 01). PBK/ hBMP-2 -NIH3T3     

联合使用骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞6生长因子对成纤维细胞成骨表型的影响

目的 研究联合使用骨形态发生蛋白 (rhBMP 2)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对成纤维细胞成骨表型的影响.方法向培养的成纤维细胞 NIH3T3中加入不同浓度的 rhBMP 2和 bFGF, 观察成纤维细胞形态学变化、碱性磷酸酶 (ALP)活性与染色的情况和骨钙素表达的变化,同时观察细胞增殖周期的变化.结果在两种因子作用下,成纤维细胞由长梭形向多角形方向转化,细胞体积增大、细胞内颗粒增多 ; 成纤维细胞 ALP活性增高、骨钙素表达增多,细胞内 ALP染色加深 ; 细胞增殖周期缩短.结论联合使用 rhBMP 2和 bFGF可以促进成纤维细胞成骨表型表达并促进细胞增殖 .     

兔抗人BMP-2成熟肽抗血清的制备

目的利用在大肠杆菌中表达的人骨形成蛋白-2(hBMP-2)成熟肽,制备兔抗hBMP-2成熟肽抗血清.方法将含有hBMP-2成熟肽基因的表达载体pDH2m,转化大肠杆菌,热诱导表达hBMP-2成熟肽,经纯化、复性后,再用其免疫兔子,制备兔抗hBMP-2成熟肽抗血清.并以Western-blot和免疫组化方法对抗血清进行鉴定.结果Western-blot结果显示在对应于hBMP-2成熟肽位置有阳性条带,免疫组化结果显示人软骨细胞胞浆阳性着色.结论hBMP-2成熟肽在大肠杆菌中获得高表达,并成功制备了兔抗hBMP-2成熟肽抗血清.     

免抗人BMP—2成熟肽抗血清的制备

目的 利用在大肠杆菌中的人骨形成蛋白－2（hBMP－2）成熟肽,制备兔抗hBMP－2成熟肽抗血清。方法 将含有hBMP－2成熟肽基因的表达载体,pDH2m,转化大肠杆菌,热诱导表达hBMP－2成熟肽,经纯化、复性后,再用其免疫兔子,制备兔抗hBMP－2成熟肽抗血清。并以Western-blot和免疫组化方法对抗血清进行鉴定。结果 Western-blot结果显示在对应于hBMP－2成熟肽位置有阳性条带,免疫组化结果显示人软骨细胞浆阳性着色。结论 hBMP－2成熟肽在大肠杆菌中获得高表达,并成功制备了兔抗hBMP－2成熟肽抗血清。     

人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维细胞差异表达基因的批量克隆及其特征分析

目的：克隆人牙周膜成纤维细胞（ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｌｉｇａｍｅｎｔ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＰＤＬＦ）与牙龈成纤维细胞（ｇｉｎｇｉｖａｌ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ,ＧＦ）差异表达基因并初步分析其中已知基因的功能特征。方法：采用基于ＰＣＲ和消减杂交的基因克隆技术构建人ＰＤＬＦ与ＧＦ差异表达基因的扣除文库,克隆人ＰＤＬＦ与ＧＦ差异表达基因,对已知基因的功能特征进行分析。结果：成功克隆到１４个人ＰＤＬＦ与     

重组人骨形成蛋白-2成熟肽对小鼠辐射损伤的治疗作用及其机理的探讨

目的探讨重组人骨形成蛋白－２成熟肽（ｒｈＢＭＰ－２ｍ）对小鼠经６．５～７．５Ｇｙγ射线全身照射引起的放射损伤的治疗作用及其机理。方法小鼠照射后１～６天于腹腔内注射ｒｈＢＭＰ－２ｍ生理盐水溶液，每天一次，每次剂量为０．５～２．０ｍｇ。观察动物的３０天存活情况及几种造血指标。结果治疗组的３０天存活率，平均存活时间，ＣＦＵ－ＧＭ集落形成数，骨髓细胞ＤＮＡ含量，骨髓有核细胞数，脾结节形成数，脾体比及外周血白细胞数均较照射对照组增加，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）。结论ｒｈＢＭＰ－２ｍ对小鼠的放射损伤有治疗作用，其机理可能同诱导造血因子释放，改善造血微环境，促进造血功能恢复有关。     

腭部术后聚乳酸骨形成蛋白复合移植对上颌骨生长发育的影响

本研究以实验大白鼠为研究对象 ,制作腭部粘骨膜缺损模型 ,以生物吸收降解材料聚乳酸作为载体、重组人骨形成蛋白 - 2作为骨生成材料 ,复合移植以观察大白鼠头颅三维方向生长情况 ,结合局部组织学观察 ,探讨rhBMP - 2 /PLA复合移植于裸露骨面 ,对上颌骨生长发育的影响。1　材料与方法1 .1　选用 5周龄、体重 1 0 0～ 1 30g雄性实验Wistar大白鼠 4 8只 ,随机分组。人重组骨形成蛋白— 2 (Recombinanthumanbonemorphogeneticprotein - 2rhBMP - 2 )冻干粉 ,经大鼠股部大腿肌肉植入试验测试有成骨活力。分子量为 979D生物可降解性聚乳酸 (…     

BMP—2在成纤维细胞对BMP—3表达的调节作用

目的：观察在BMP－2作用下,成纤维细胞表达BMP－3的情况,探讨BMP－2促进成纤维细胞成骨表型表达的机制。方法：向培养的成纤维细胞内添加BMP－2,当细胞生长到60％时免疫组化观察正常与BMP－2作用下的成纤维细胞内表达BMP－3的情况。结果：下成纤维细胞内无BMP－3表达,在BMP－2作用下成纤维细胞出现BMP－3表达。结论：在成纤维细胞,BMP－2可促进BMP－3的表达。     

人牙周膜成纤维细胞与牙龈成纤维细胞差异表达基因扣除文库的构建

目的建立人牙周膜成纤维细胞(periodontalligamentfibroblast,PDLF) 与牙龈成纤维细胞(gin-givalfibroblast,GF)差异表达基因的扣除文库。方法体外培养人PDLC和GF,分别提取mRNA,采用基于PCR和消减杂交的基因克隆技术构建人PDLC与GF差异表达基因的扣除文库。结果成功构建了人PDLF与GF细胞差异表达基因的扣除文库,文库容量为4×l02。结论基于PCR和消减杂交的基因克隆技术是构建细胞间差异表达基因扣除文库的较为简洁而有效的方法。     

人骨形成蛋白-3成熟肽cDNA的克隆、测序及表达

目的：扩增、克隆人骨形成蛋白－３（ｈＢＭＰ－３）成熟肽ｃＤＮＡ基因，利用大肠杆菌表达ｈＢＭＰ－３成熟肽．方法：ＰＣＲ方法扩增ｈＢＭＰ－３成熟肽ｃＤＮＡ基因，双脱氧终止法测序正确后，克隆入大肠杆菌表达载体ｐＤＨ，受控于ＰＲＰＬ启动子，重组质粒ｐＤＨＢ－３ｍ以大肠杆菌ＤＨ５α为宿主菌在４２℃进行温度诱导．结果：扩增出ｈＢＭＰ－３成熟肽ｃＤＮＡ基因，序列测定完全正确；含重组质粒ｐＤＨ－Ｂ３ｍ的工程菌诱导后在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上出现一条新生蛋白带，分子质量为１４．５ｋｕ，与预期ｈＢＭＰ－３成熟肽分子量大小一致，约占菌体总蛋白的２８％．结论：成功扩增、克隆ｈＢＭＰ－３成熟肽ｃＤＮＡ基因，并可在大肠杆菌中得到高效表达