多重耐药阴沟肠杆菌临床分离株ESBLs基因型别和分子流行病学分析

目的了解引起医院感染的阴沟肠杆菌临床菌株ESBLs的分布及流行情况,为控制ESBLs流行提供依据。方法连续收集了27株不重复的对头孢他啶或头孢噻肟耐药的阴沟肠杆菌临床菌株,采用系列ESBLs特异性引物进行PCR,并对PCR产物测序;同时采用ERIC2引物进行rep-PCR。结果对头孢他啶或头孢噻肟耐药的阴沟肠杆菌临床菌株中最为流行的ESBLs是CTX-M-3样(13株阳性,占48%);在我国首次发现肠杆菌科细菌中有VEB-1样β-内酰胺酶流行;产ESBLs阴沟肠杆菌大多具有克隆相关性,它们在流行过程中又分别获得了不同的ESBLs耐药基因。结论上海华山医院引起医院感染的阴沟肠杆菌ESBLs产生率高,是阴沟肠杆菌对β-内酰胺类药物耐药的重要原因。     

用纸片双抑制剂平行抑制试验分析阴沟肠杆菌AmpC酶

目的　建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。方法　分别以大肠埃希菌(ATCC25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC700603)、阴沟肠杆菌(029、029M和1194E)为β内酰胺酶阴性对照、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、普通型阴沟肠杆菌、持续高产型AmpC酶、高诱导型AmpC酶标准菌株,用纸片双抑制剂平行抑制试验(DDIST)对华山医院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行AmpC酶分析,用三维试验检测高产AmpC酶以验证DDIST。结果　三维试验法从58株阴沟肠杆菌中检出持续高产型AmpC酶产株21株,DDIST检出持续高产型AmpC酶产株18株、高诱导型AmpC酶产株6株。结论　DDIST是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌AmpC酶的方法。     

“间隙手术”在胃肠癌根治术中的应用（附26例报告）

目的探讨“间隙手术”在胃肠癌根治术中的应用。方法观察直肠癌Miles手术4例，Dixon手术5例，乙状结肠癌6例，右半结肠癌根治5例，胃窦部癌D。手术6例的手术时间，出血，术中游离结扎个数。结果Miles手术出血（97．50±12．58）mL，手术时间（135±12．91）min，结扎数（20±1．41）个；Dixon手术出血（51．67±13．29）mL。手术时间（115±8．37）min，结扎数（22．33±1．37）个；乙状结肠癌手术出血（48．33±9．83）mL，手术时间（103．33±12．11）min，结扎数（17．00±0．89）个；胃窦部癌D2手术出血（126．67±8．17）mL，手术时间（231．67±18．35）min，结扎数（27．83±6．24）个。结论“间隙手术”是一个重要的手术理念，尤其对于肿瘤外科医生。     

上海地区大环内酯类抗生素耐药肺炎链球菌的遗传学分析

目的 了解上海地区肺炎链球菌中大环内酯类抗生素高耐药菌株的同源性.方法 采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法对47株临床分离大环内酯类抗生素耐药肺炎链球菌(MRSP)进行同源性分析,并运用多位点序列分型(MIST)对其中6株多重耐药MRSP进行分子遗传学分析,结合血清分型推测其与国际流行克隆株的关系.结果 上海地区ermB和mefE基因阳性大环内酯类抗生素高耐肺炎链球菌中存在流行克隆A型(45%)、B型(17%).PFGE图谱A型的6株多重耐药MRSP菌株都属于亚洲流行克隆CC236(Taiwan19F-14 clone).上海地区发现一个新的MIST型别ST2116(15-16-19-15-6-20-125),推测其由CC236经基因水平交换进化而来.结论上海地区大环内酯类高耐肺炎链球菌的快速增加部分是由于耐药克隆株的播散所致.     

2010年中国CHINET细菌耐药性监测

目的 了解国内主要地区临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 国内主要地区14所教学医院(12所综合性医院、2所儿童医院)临床分离菌采用K-B法按统一方案进行细菌药敏试验.按CLSI 2010年版判断结果.结果 2010年1-12月收集各医院临床分离菌共47850株,其中革兰阳性菌13568株,占28.4%,革兰阴性菌34282株,占71.6%.金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中甲氧西林耐药株平均为51.7%和71.6%.葡萄球菌属中甲氧西林耐药株对β内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,MRSA中分别有73.9%,63.2%的菌株对磺胺甲噁唑-甲氧苄啶、磷霉素呈现敏感;MRCVS中分别有87.8%、68.7%的菌株对利福平、磷毒素敏感.未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株,但首次出现少数凝固酶阴性葡萄球菌对利奈唑胺中介株,主要为溶血葡萄球菌.肠球菌属中粪肠球菌对呋喃妥因、磷霉素、氨苄西林的耐药率低于屎肠球菌,两者中均有少数万古霉素耐药株,根据表型推测多数为VanA型耐药.肺炎链球菌非脑膜炎株成人组中PSSP较2009年略有降低,PRSP的检出率有所上升.部分大肠埃希菌、克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)中产ESBLs株分别平均为56.2%和43.6%.肠杆菌科细菌中产ESBLs株对所测试抗菌药物的耐药率均比非产ESBLs株高.肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,总耐药率<6%.不动杆菌属(鲍曼不动杆菌占86.8%)对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为57.1%和58.3%.与2009年相比肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌中的泛耐药株数显著增多.结论 细菌耐药性仍呈增长趋势,对临床构成严重威胁.加强感染控制措施是当务之急.     

仅黏菌素敏感的多重耐药铜绿假单胞菌分子流行病学研究

目的 从基因水平了解多重耐药铜绿假单胞菌中仅黏菌素敏感铜绿假单胞菌(COS-PA)的流行情况.方法 ①收集本院灼伤科2001年3月至2003年12月临床分离的铜绿假单胞菌52株,其中COS-PA 32株.②收集外科重症监护病房(SICU)2003年1月至2003年12月临床分离的铜绿假单胞菌57株,其中COS-PA 22株;收集SICU水池下水口非仅黏菌素敏感铜绿假单胞菌(non-COS-PA)1株.③采用多种引物随机扩增DNA多态性(RAPD)技术和统计学方法分析其流行情况.结果 ①灼伤科2001～2003这3年的COS-PA,经RAPD(引物ERIC2、325、272)分型均为同一型别(Burn-A型).②SICU 2003年收集的COS-PA,经RAPD(引物325)分型为同一型别(SICU-A型);在SICU收集的non-COS-PA也多数呈同一型别(SICU-B型),自SICU水池下水口收集到的1株non-COS-PA也属于此型.③灼伤科及SICU经RAPD(引物325)联合分析证实,两个科室的COS-PA为不同型别,无同源性.结论 灼伤科和SICU都存在科室内COS-PA流行,SICU还存在non-COS-PA流行.应严格消毒隔离措施,加强对铜绿假单胞菌在潮湿环境及患者中流行情况的严密监测.多种引物RAPD分析是判断铜绿假单胞菌流行情况的有利工具.     

老年糖尿病患者慢性并发症及影响因素分析

目的 总结老年糖尿病并发症的种类,探讨其与年龄、病程、血糖、血脂和体质量之间的关系。方法 选择六安市中医院2014年2月至2016年2月200例老年糖尿病并伴有并发症的患者,进行发病情况的统计,同时根据患者的病程、年龄、血糖控制情况、血脂和体质量进行分组对照分析,探寻之间的联系。结果 在200例糖尿病患者中同时存在多种并发症的患者63例,在众多并发症中,心血管系统并发症占72.0%,与血脂和血糖控制不良有明显关系。脑梗死的发病与患者的年龄存在联系。糖尿病三联病变的发病率仅次于心血管系统并发症,达38.0%,与患者的年龄、病程有关,与血脂、血糖和体质量也有一定相关性。糖尿病足主要与病程、血糖控制不良有关。结论 老年糖尿病并发症与年龄、病程、血糖、血脂和体质量存在相关性,通过有效控制血糖、血脂、体质量来预防和延缓并发症的发生有重要意义。     

老年糖尿病患者慢性并发症及影响因素分析

目的 总结老年糖尿病并发症的种类,探讨其与年龄、病程、血糖、血脂和体质量之间的关系.方法 选择六安市中医院2014年2月至2016年2月200例老年糖尿病并伴有并发症的患者,进行发病情况的统计,同时根据患者的病程、年龄、血糖控制情况、血脂和体质量进行分组对照分析,探寻之间的联系.结果 在200例糖尿病患者中同时存在多种并发症的患者63例,在众多并发症中,心血管系统并发症占72.0%,与血脂和血糖控制不良有明显关系.脑梗死的发病与患者的年龄存在联系.糖尿病三联病变的发病率仅次于心血管系统并发症,达38.0%,与患者的年龄、病程有关,与血脂、血糖和体质量也有一定相关性.糖尿病足主要与病程、血糖控制不良有关.结论 老年糖尿病并发症与年龄、病程、血糖、血脂和体质量存在相关性,通过有效控制血糖、血脂、体质量来预防和延缓并发症的发生有重要意义.     

同源重组构建表皮葡萄球菌附属基因调节子(agr)阴性突变株

目的　构建表皮葡萄球菌agr阴性突变株 ,以期得到除agr基因以外相同遗传背景的突变株与野生株。方法　首先构建同源重组质粒pBT2 △agr,后电转入金黄色葡萄球菌RN4 2 2 0 ,再转入表皮葡萄球菌 32 98。通过pBT2载体对温度敏感的特点 ,含重组质粒的表皮葡萄球菌 32 98在 4 0℃多次传代 ,最终筛选出agr阴性的突变株。结果　同源重组质粒pBT2 △agr通过酶切鉴定证明构建成功 ,表皮葡萄球菌 32 98接受来自金黄色葡萄球菌RN4 2 2 0的重组质粒 ,经酶切鉴定正确。 4 0℃多次传代后 ,经抗生素抗性筛选 ,并经斑点杂交及序列分析 ,证明获得表皮葡萄球菌 32 98 agr阴性突变株。结论　用同源重组的方法完成表皮葡萄球菌 32 98 agr阴性突变株的构建 ,使agr基因被大部分剔除掉。为今后研究表皮葡萄球菌agr基因在调节其生物膜形成的功能提供实验资料     

DRD2启动子低甲基化通过ERK通路调控乳腺癌细胞增殖

目的 研究肿瘤干细胞标志物多巴胺受体D2（dopamine receptor D2,DRD2）对乳腺癌细胞增殖的影响。方法 采用850K芯片对乳腺癌组织进行检测,并分析DRD2甲基化状态。采用基因筛选、基因敲除和甲基化抑制等技术和方法,进行体外和体内实验,筛选和验证可能存在的分子信号通路。结果 DRD2启动子区在乳腺癌组织中相较于正常组织表现为低甲基化。上调DRD2的表达后,乳腺癌细胞增殖增强,而下调DRD2的表达,乳腺癌细胞增殖显著降低。裸鼠实验发现,过表达DRD2可促进肿瘤生长和Ki67、CD31表达,下调DRD2可抑制肿瘤生长。体内外实验表明,细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinases,ERK）的表达受DRD2表达水平的影响,提示DRD2通过ERK信号通路发挥作用。甲基化抑制剂5-aza-2-脱氧胞苷（5-aza-2-deoxycytidine,5-AzadC）在小鼠体内部分逆转了DRD2表达的下调,失去了对肿瘤细胞增殖的抑制作用,提示抑制DRD2甲基化促进了肿瘤的发展。结论 乳腺癌中DRD2启动子区发生低甲基化。DRD2通过ERK通路在乳腺癌细胞的增殖和迁移中发挥作用。