转座子介导的肺炎链球菌耐药水平传播机制

目的 探索转座子介导的耐药基因水平转移在肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)耐药传播中的作用.方法 采用长片段聚合酶链反应(long and accurate PCR,LA-PCR)、DNA序列分析、Southern blot、脉冲场凝胶电泳(PFGE)等方法 分析3株不同遗传背景的Sp中转座子的种类、结构,用转化实验分析不同菌株之间耐药性转移方式.结果 (1)Sp中携带mefE的mega元件插入到接合转座子Tn916上形成复合转座子Tn2009-like,其序列与Tn2009具有99%同源性,染色体插入位点完全不同.(2)临床分离的多重耐药Sp(ET86)染色体184 kb和155 kb片段上同时携带Tn1545、Tn917和Tn2009-like,体现出携带耐药决定子的遗传元件集中分布的趋势.另外2株不同耐药表型的Sp分别携带1或2种转座子.(3)转座子上耐药基因可通过转化转移.结论 Sp染色体上转座子可捕获其他耐药元件形成复合转座子,且不同的转座子可在染色体上集中分布、协同作用,促进耐药性的传播和进化.     

Chrom ID ESBL显色平板对产ESBLs肠杆菌科细菌筛选作用的评估

目的评估新的产色培养基Chrom ID ESBL在检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌中的可靠性。方法用2组肠杆菌科细菌进行评估,一组为285株上海地区检出的临床分离株,这些菌株已用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的确证试验确认了是否产ESBLs,另一组28株产ESBLs肠杆菌科细菌,在以前的研究工作中已确认了这些菌株的产酶特性和ESBLs基因型别。结果Chrom ID ESBL能有效地检测产ESBLs的肠杆菌科细菌。结论Chrom ID ESBL是一种可靠的产ESBLs肠杆菌科细菌的筛选培养基。     

马耳他布鲁菌病一例报道

布鲁菌病是由布鲁菌（Brucella）引起的人畜共患传染性变态反应疾病。当前该病在我国流行区域甚广,发病率呈上升趋势,疫情与奶牛、羊只等的流动情况关系较大,新发患者主要分布在牧区和半农半牧区。布鲁菌病一年四季均可发病,但有明显的季节性,羊种布鲁菌（马耳他布鲁菌）病春季开始,夏季达高峰,秋季下降;牛种布鲁菌病以夏、秋季发病率较高。最近本实验室在非发病高峰期、非疫区的上海市一位女患者的血培养中分离出1株马耳他布鲁菌。     

2009年上海地区细菌耐药性监测

Soriano A,Marco F,Martinez JA,et al.Influence of vancomycin minimum inhibitory concentration on the treatment of methicillin-resistant Staphylococcus aureus bacteremia[J].Clin Infect Dis,2008,46(2):193-200.

Sun W,Chen H,Liu Y,et al,Prevalence and characterization of heterogeneous vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus isolates from 14 cities in China?[J].Antimicrob Agents Chemother,2009,53(9):3642-3649.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Eighth Informational Supplement,1998,M100-S8.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Sixteenth Informational Supplement,2006,M100-S16.

Lahey Clinic.Amino acid sequences for TEM,SHV and OXA extended-spectrum and inhibitor-resistant β-lactamases[EB/OL].URL:http://www.lahey.org/studies/webt.asp.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Twentieth Informational Supplement,2010,M100-S20.

沈继录,朱德妹,吴卫红,等.革兰阴性杆菌碳青霉烯酶产生与细菌耐药性关系的研究[J].中华检验医学杂志,2008,31(4):408-414.

Clinical and Laboratory Standads Institute.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing[S].Twentieth Informational Supplement(June 2010 Update),2010,M100-S20-U.

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革兰阴性杆菌中VEB-1型超广谱β-内酰胺酶的分布情况调查

目的　分析上海第二医科大学附属瑞金医院 (以下简称瑞金医院 )和上海交通大学附属第六人民医院(简称市六医院 )分离的 340株革兰阴性杆菌中VEB 1型超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)的分布 ,并分析瑞金医院灼伤科患者标本中分离的产VEB 1型ESBL铜绿假单胞菌是否有同源性。方法　用聚合酶链反应 (PCR)扩增细菌的veb 1基因 ,用PCR RFLP检测并分型整合子 ,以ERIC2为引物 ,采用随机引物扩增多态性DNA分型法(RAPD)对瑞金医院灼伤科分离到的 16株产VEB 1型ESBL的铜绿假单胞菌进行同源性分析。结果　市六医院分离的菌株中未检测到veb 1基因 ,瑞金医院仅在灼伤科来源的铜绿假单胞菌中检出VEB 1型ESBL ,且这些菌株用RAPD分析具有同源性。结论　瑞金医院灼伤科流行携带veb 1型ESBL基因的铜绿假单胞菌。     

影响卫校学生学习兴趣因素调查

我课题组就影响学生学习兴趣的诸多因素在全校范围内进行调查，并对调查结果进行详细分析研究，提出操作性强的对策。     

鲍氏不动杆菌耐药性与β-内酰胺酶基因型研究

目的了解鲍氏不动杆菌的耐药情况和β-内酰胺酶基因型分布。方法采用K-B纸片法对122株鲍氏不动杆菌临床分离株进行的药敏检测,并通过特异性的聚合酶链反应和DNA序列测定的方法,测定了这些菌株中的β-内酰胺酶相关基因分布。结果该菌除对亚胺培南和美罗培南的敏感率分别高达100.0%和88.5%;对含酶抑制剂的氨苄西林/舒巴坦和头孢哌酮/舒巴坦敏感率分别为52.5%和57.4%外,而对其他抗菌药物的敏感率均很低,对头孢三、四代药物的敏感率均<20.0%;122株鲍氏不动杆菌中,76株(62.3%)扩增到β-内酰胺酶基因,SHV、TEM、PER、CTX-M-1组、CTX-M-9组和VEB基因的检出率分别为19.7%、47.5%、13.9%、1.6%、4.1%和0.8%,未检测到CTX-M-2组、OXA-10和OXA-23基因;其中42.6%含单种基因,14.8%含两种基因,主要为SHV TEM基因(10株),其次为TEM CTX-M-9基因(3株)和TEM PER基因(3株);4.9%含3种基因,主要为SHV TEM PER基因;此外,序列测定结果显示各基因型分别为SHV-1b-Like、SHV-18-Like、TEM-1-Like、PER-1-Like、CTX-M-3-Like、CTX-M-14-Like、VEB-3-Like。结论临床分离的鲍氏不动杆菌多重耐药现象严重,并携带多种β-内酰胺酶相关基因。     

FoxM1基因表达与甲状腺乳头状癌TPC-1细胞活性及侵袭性关系的研究

目的 研究FoxM1基因表达水平对甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）细胞活性和侵袭性有无影响,探讨FoxM1与PTC疾病的相关性.方法 分别用hFoxM1-RNA干扰和硫链丝菌素处理PTC TPC-1细胞,观察处理后的癌细胞与未经处理的癌细胞在细胞活性、侵袭能力、迁移能力方面的变化,并使用Real-time PCR检测各组细胞中FoxM1基因的表达水平,观察硫链丝菌素对FoxM1基因表达水平的影响.结果 在TPC-1细胞中,使用hFoxM 1-RNA干扰和硫链丝菌素处理均能使细胞活性明显下降（P＜0.05）,用2种方法处理后,细胞侵袭能力分别降低了约29.2％及38.63％,细胞迁移能力分别降低了约46.0％及47.5％,且PCR结果表明,hFoxM1-RNA干扰和硫链丝菌素处理均明显抑制TPC-1细胞中FoxM1基因mRNA的表达,分别抑制55％及38％.结论 FoxM1能促进PTC细胞的侵袭转移,其作为潜在的肿瘤标志物值得关注,而硫链丝菌素能抑制肿瘤细胞中FoxM1的表达.     

VEB-3型与VEB-1型超广谱β-内酰胺酶生化特性的比较

目的研究VEB-3型超广谱p内酰胺酶（EsBL）的生化特性，并与VEB-1型ESBL进行比较。方法将blaVEB-3和blaveb-1。基因连接至pET28a载体上，并用重组质粒转化大肠埃希菌BL21进行克隆表达，分别挑选blaVEB-3或blaVEB-1阳性表达的菌落测定p内酰胺类抗生素对其最低抑菌浓度（MfC），同时提取酶蛋白进行等电点和酶动力学分析。结果VEB-3和VEB-1型ESBL具有基本一致MIC和相同的等电点（pI=7．45），但两者的酶动力学性质存在一定的差异：对头孢他啶和头孢噻肟，VEB-3较VEB-1表现出更高的亲和力，两者Km相差一倍左右；对头孢噻吩，VEB-1比VEB-3更具亲和力；而对阿莫西林，VEB-1型ESBL表现出很高的亲和力，而VEB-3仅有低的亲和力，两者Km相差20多倍。结论VEB-3和VEB．1型ESBL具有相同的等电点，不同的动力学参数，blaVEB-1基因中Leu56→Phe突变可能导致了两者酶动力学性质的差异。