高效液相色谱测定血清甘油三酯的研究——一种参考方法的建议

目的　建立特异、精密的血清总甘油和游离甘油测定方法 ,以便甘油三酯测定标准化。方法　以 1,2 ,4 丁三醇作内标 ,用柱前衍生高效液相色谱技术分析血清皂化前后的甘油含量 (两者分别代表血清游离甘油和总甘油浓度 )。结果　测定总甘油相对不精密度小于 2 % ,游离甘油小于 4% ;总甘油平均回收率 10 0 0 % ,游离甘油 99 7% ,与同位素稀释 /质谱法的相对偏差不大于± 2 %。结论方法特异、精密、简单 ,可望用作血清甘油三酯测定参考方法。     

同位素稀释气相色谱质谱法测定血清总胆固醇

目的建立一种新的同位素稀释-气相色谱-质谱（ID／GC／MS）测定人血清总胆固醇的方法。方法取一定量的血清样品与[3，4-^13 C2]-胆固醇内标溶液充分混匀，水解并提取溶液中的胆固醇后，用N，O-二-（甲基硅烷）三氟乙酰胺（BSTFA）衍生胆固醇为三甲基硅烷醚；气相色谱．四极杆质谱（GC/MS）选择检测目标离子。检测标准溶液和血清样品的m／z368和m／z370的离子强度并积分，校正标准溶液中天然同位素胆固醇对内标的影响，将校正后的胆固醇和内标的m／z368和m／z370面积比对胆固醇标准溶液浓度做线性回归。用拟合的回归方程定量血清样品胆固醇浓度。结果建立的ID／GC/MS测定胆固醇的方法平均批内变异系数0，04％～0．81％。分析美国国家标准物质与技术研究所（NIST）2个浓度水平的标准血清SRM1951a，相对偏差分别是0．19％和0．90％。结论建立的ID／GC/MS测定胆固醇的方法操作简单、精密，可以用做血清胆固醇的准确定量。     

高密度脂蛋白胆固醇测定匀相法试剂评价

目的 评价国内市场上常见的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)匀相法试剂的分析质量.方法 用超速离心-HPLC法作为比对方法,7种HDL-C试剂和校准物与Hitachi 7170A组合构成的7种分析系统为待评方法.用比对方法和常规方法同时测定40份新鲜人血清,考察匀相法的精密度、偏差和总误差等.结果 7种匀相法试剂均具有良好的精密度(CV<4%).与超速离心-HPLC法相比,方法A、B和D测定的平均百分偏差(1.33%,4.98%和4.78%)、在医学决定水平上的偏差(<5%)和总误差(-4.3%～7.8%,-3.2%～12.9%和-0.8%～11.5%)达到美国胆固醇教育计划(National Cholesterol Education Program,NCEP)的要求,具有较好的分析性能.方法 C虽然有较好的特异性,但测定结果存在显著负偏差(平均偏差-19.74%),提示校准物的定值偏低.方法 E、F和G与UC-HPLC的相关系数R2<0.975,40份样本测定的平均绝对百分偏差>5%,存在一定的准确性和特异性问题.除方法G以外其他6种方法测定的总误差均达到美国临床实验室改进修正案(CLLA88)的要求.结论 目前有些HDL-C匀相法试剂的分析质量还存在较大差异,临床实验室应重视HDL-C试剂的选择和评价.     

血清高、低密度脂蛋白胆固醇标准物质的研究

目的 研制与临床样品基质相似的冰冻人血清HDL-C和LDL-C标准物质.方法 按国家标准物质技术规范,选择身体健康、年龄和性别适当、无传染病的志愿者采取空腹静脉血,离心分离血清,以不同胆固醇水平分成3组,分别混合、除菌过滤和分装.检验血清HDL-C和LDL-C的均匀性和稳定性.分别用DCM法和UC/HPLC法为HDL-C和LDL-C定值.评估不确定度.应用不同分析系统测定三种血清的HDL-C和LDL-C.结果 ①三种血清HDL-C和LDL-C均匀性检验方差分析P值均＞0.05,说明均匀性良好.②稳定性研究结果显示血清HDL-C和LDL-C在-80℃保存至少可稳定1年.③三种血清HDL-C和LDL-C的定值±不确定度(mmol/L)分别为1.640±0.028,1.652±0.027,1.184±0.022和4.577±0.097,2.492±0.072,1.788±0.041.④16家临床实验室以各自分析系统测定3种冰冻血清与新鲜血清反应趋势基本一致,HDL-C和 LDL-C均值与定值偏差分别为3.24%,2.7%,4.63%和-2.64%,0.64%,1.08%.结论 3种冰冻人血清均匀、稳定,定值可靠,在常规分析系统中互通性良好,已被国家质量监督检验检疫总局批准为国家一级标准物质(GBW 09178,GBW 09179,GBW 09180).     

人脑转移癌组织裸小鼠脑内移植模型的建立

目的 建立人肺腺癌脑转移瘤的裸小鼠原位移植模型,并分析移植瘤的生物学特征.方法 取人肺腺癌脑转移瘤组织块,接种于裸小鼠右尾状核.致瘤后即用裸小鼠的瘤组织进行其原位传代接种,观察致瘤率及荷瘤鼠生存期;MRI观察移植瘤在鼠脑内的大体形态;HE染色分析各代移植瘤的组织学形态;免疫组化染色观察移植瘤中CEA的表达;Alcian blue/PAS特殊染色检测移植瘤中粘液的性质.结果 移植瘤组织在裸小鼠右尾状核已连续传至6代,共65只鼠.荷瘤鼠生存期原代为(47.6±1.8)d,2～3代有所缩短,4～6代稳定在(38.0±0.9)d;移植瘤MRI类圆形,瘤周无水肿.移植瘤病理为低分化腺癌,不向周围正常鼠脑组织浸润;移植瘤中CEA表达阳性,有酸性粘液存在.结论 人肺腺癌脑转移瘤组织块接种于鼠脑内建立的原位移植模型能更好地模拟临床原发肿瘤的病理学特征,本方法为研究人肺腺癌脑转移瘤的生物学特性及实验治疗提供了一个可靠的动物模型.     

诱导分化、化疗和免疫治疗在荷人脑胶质瘤动物体内序贯组合研究

目的：探讨胶质瘤诱导分化治疗方案和机制，为进一步临床研究打基础。方法：采用诱导分化剂苯丁酸钠（SPB）分别与化疗药卡氮芥（BCNU）、顺铂（CDDP）和活化的人外周血单个核细胞（PBMC）组合，对荷低分化人脑胶质瘤裸小鼠（NC）或严重联合免疫缺陷鼠（SCID）进行治疗。结果：先用BCNU，接着用SPB，最后用PBMC序贯组合治疗效果最佳，表现为肿瘤生长抑制；细胞异形性降低；G0/G1期比例、GFAP、MHC-1表达增加和c-myc表达下降。结论：胶质瘤的诱导分化治疗需与化疗和免疫治疗等组合方可提高疗效。     

胃肠道术中内镜检查16例分析

消化道手术,在剖腹探查术中,常遇开腹后找不到病灶,使手术难于进行。而在术中配合内镜检查则往往能解除这一窘境。现报告我院术中内镜检查的体会。资料与方法一、一般资料:本组16例,男13例,女3例;年龄9～68岁。检查原因为:(1)急性消化道出血,因病情不允许或其它原因,术前未行内镜检查,直接剖腹探查4例;(2)术前经内镜检查,无法确定出血病因和部位8例;(3)钡灌肠Ｘ线诊断为升结肠癌,术中未找到病灶1例;(4)内镜诊断大肠息肉,而术中未找到2例;(5)术中病灶位置与术前内镜检查不一致1例。二、检查方法:用ＧＩＦ-Ｑ20,ＣＦ-30型内镜,其中用胃镜检查9…     

miR-223-3p靶向RIPK3调控胶质瘤微环境中巨噬细胞恶性转化的实验研究

目的探讨miRNAs介导的胶质瘤肿瘤微环境(TME)中巨噬细胞(Mφ)的恶性转化及其机制。方法应用集落刺激因子诱导表达绿色荧光蛋白(GFP)的小鼠骨髓来源细胞(BMDCs)分化, 获得Mφ-GFP。将胶质瘤干细胞(GSCs)与Mφ-GFP体外共培养, 筛选具备无限增殖潜能的Mφ-GFP, 即恶变巨噬细胞(t-Mφ)。通过miRNAs芯片分析获取t-Mφ与正常Mφ的miRNAs差异表达谱。分别比较目标miRNA在中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)不同世界卫生组织(WHO)分级胶质瘤组织、来源于手术切除的10例胶质瘤组织与瘤旁组织、t-Mφ与正常Mφ中的表达水平, 并分析目标miRNA表达水平与患者生存期的相关性。采用流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹法(WB)及荧光素酶活性实验探讨目标miRNA调控TME中Mφ恶变的分子机制。结果通过建立双色荧光示踪共培养体系, 成功获得具备无限增殖潜能的单克隆GFP+细胞, 并表达Mφ标志物F4/80和CD11b。miRNAs芯片差异表达谱和qRT-PCR结果证实, 与正常Mφ相比, miR-223-3p在t-Mφ中的...     

糖化血红蛋白A1c与载脂蛋白A-1比值评估急性冠状动脉综合征患者预后的临床研究

目的探讨糖化血红蛋白A1c(HbA1c)与载脂蛋白A-1(ApoA-1)比值(HbA1c/ApoA-1)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者随访期间主要不良心血管事件(MACEs)的预测价值。方法本研究为回顾性队列研究, 连续入选2017年3月至2019年3月于北京医院住院并接受冠状动脉造影的ACS患者, 收集性别、年龄、既往史、Gensini评分、HbA1c和ApoA-1等基线资料。依据随访期间有无MACEs发生分为MACEs组和无MACEs组, 分析2组间HbA1c/ApoA-1的差异。按HbA1c/ApoA-1水平的三分位数将患者分为高、中、低HbA1c/ApoA-1组, 使用Cox比例风险模型评估3组间MACEs、全因死亡率等终点事件的差异。使用Kaplan-Meier生存分析比较各HbA1c/ApoA-l组间无MACEs生存率差异。使用Spearman秩相关分析评价HbA1c/ApoA-1与Gensini评分的相关性。结果共纳入ACS患者366例, 59例发生MACEs, 10例发生全因死亡。所有患者平均年龄为(65.9±10.3)岁, 随访(22.3±4.4)个月, 校正年龄...