视神经损伤后上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA表达的变化

目的 探讨大鼠视神经损伤后上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达变化.方法 采用单侧眼球摘除的视神经损伤动物模型,将大鼠分成正常对照组、眼球摘除后24 h、1周、2周、3周组,原位杂交检测对侧上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达变化,免疫组化检测MAP2和GFAP阳性细胞数量和形态的变化.结果 BMP4 mRNA在损伤后24 h显著升高(P＜0.01),1周组的表达较24 h降低;Noggin mRNA在损伤后各组的表达水平与正常对照组相比无明显变化(P＞0.05).GFAP阳性细胞在损伤后24 h即明显增加(P＜0.01),MAP2阳性细胞在损伤后1周数量减少(P＜0.01).结论 单侧眼球摘除后大鼠对侧上丘BMP4 mRNA与Noggin mRNA的表达水平可能是导致损伤后星形胶质细胞反应性增生和神经元退行性死亡的因素之一.     

侧脑室注射Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响

目的观察侧脑室给予Noggin对AD小鼠海马神经发生和学习记忆功能的影响。方法选取12月龄APP/PS1双转基因AD小鼠,实验组连续7d侧脑室注射Noggin,对照组向侧脑室注射等量生理盐水,Morris水迷宫检测其认知功能,免疫荧光检测海马齿回BrdU的表达。结果和生理盐水对照组相比,侧脑室注射Noggin组小鼠海马齿回BrdU阳性细胞数显著增加(P0.01),行为学检测显示逃逸潜伏期缩短、穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率增加(P0.05)。结论侧脑室注射Noggin可促进AD小鼠海马神经发生并改善其学习记忆能力。     

合并MAFLD的乙型肝炎肝硬化患者血清瘦素水平变化特点分析

目的 探讨合并代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)的乙型肝炎肝硬化患者血清瘦素(LP)水平变化特点.方法 在我院中法肝癌项目收集的标本库中,选择186例乙型肝炎肝硬化患者(Child-Pugh A级95例,B级51例和C级40例),在Child-Pugh A级患者中,合并MAFLD患者49例,未合并46例.采用ELISA法...     

大鼠海马和额叶皮层褪黑素限速酶N-乙酰基转移酶表达与年龄的关系

目的 观察从胚胎期到老年期大鼠海马和额叶皮层中褪黑素（Melatonin,MT）合成限速酶N－乙酰基转移酶（Arylalkylamine N-acetyltransferase,AANAT）表达的变化特点。方法 ①引物设计，②RT－PCR方法，③酶联法。结果 ①大鼠额叶皮层和海马中AANAT在胚胎和幼年期表达较高，成年后有一定下降。②在老年大鼠，海马中AANAT mRNA明显降低甚至消失。③大鼠额叶皮层和海马中褪黑素水平在胚胎和幼年期较高，老年大鼠海马中褪黑素水平降至最低。结论 胚胎期额叶皮层AANAT有较高的表达，生后3周－18月组降低，而老年大鼠海马中AANAT表达的降低和消失，可能是老化时中枢神经系统褪黑素水平下降的原因之一。     

N-甲基-D-天(门)冬氨酸致兴奋性毒性脑损伤大鼠海马内BMP4、BrdU与GFAP的表达

目的:观察N-甲基-D-天(门)冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)致兴奋性毒性脑损伤大鼠海马内BMP4mRNA、BrdU与GFAP的表达。方法:原位杂交检测BMP4的表达, 流式细胞仪检测NMDA致兴奋性毒性脑损伤后齿回内BrdU与GFAP阳性细胞的比例, 免疫荧光双标法检测BrdU标记细胞与GFAP蛋白的共存。结果:BMP4mRNA阳性细胞数在NMDA致兴奋性毒性损伤后1d与3d显著升高, 7d与15d组海马内BMP4mRNA阳性细胞数降低。流式细胞仪检测发现, NMDA致兴奋性毒性脑损伤使齿回内BrdU阳性细胞的比例降低, 而GFAP阳性细胞的比例显著升高, 并在7d与15d组表达最高。免疫荧光双标法检测BrdU标记细胞与GFAP蛋白的共存, 证实70％的BrdU标记细胞为GFAP免疫反应阳性细胞, 表明NMDA致兴奋性毒性损伤有明显的促胶质发生作用。结论:以上结果提示NMDA致兴奋性毒性损伤有明显的促胶质发生作用, 而该作用可能与海马内BMP4的过度表达相关。     

肝脏X受体β对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响

目的 观察肝脏X受体β(liver X receptor β,LXRβ)对围生期小鼠海马细胞增殖以及放射状胶质细胞纤维形成的影响.方法 在胚胎发育18.5 d(E18.5)和生后第2天(P2)行海马免疫组织化学方法检测,分别采用细胞增殖标记增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear ant...     

LXR激动剂TO901317对成年小鼠海马齿回星形胶质细胞的作用

目的 观察肝脏X受体(liverX receptor,LXR)激动剂TO901317对成年小鼠海马齿回(dentate gyrus,DG)星形胶质细胞数量以及海马齿回颗粒下区(dentate gyrus subgranular zone,DG-SGZ)星形胶质细胞放射状突起的作用.方法 3个月龄健康雄性C57B/L...     

神经前体细胞纹状体注入对帕金森病模型大鼠行为的影响

背景:胚胎干细胞经诱导产生神经前体细胞,再进行脑内移植,依旧具备增殖与分化的潜能,与宿主神经组织整合,使其有强的可塑性,这将有助于帕金森病的治疗效果观察。目的:观察小鼠胚胎干细胞分化为神经前体细胞,以及定点移植对改进型帕金森病大鼠模型行为学的影响。设计:随机对照动物实验。单位:解放军第三军医大学基础医学部生理学教研室和神经生物学教研室。材料:健康成年Wistar大鼠50只,随机分为实验组45只,对照组5只。方法:①实验组大鼠黑质致密部与中脑腹侧背盖区两点各注射6-羟基多巴5μL(2g/L)制备帕金森病大鼠模型,对照组注射生理盐水5μL/点,术后1周开始行为学检测,测定模型成功率,1次/周,连续7周。②选取成功帕金森病模型大鼠20只实施纹状体神经前体细胞移植,剂量为2μL[细胞悬液记数为(5～8)×106个/μL]。另取5只模型大鼠纹状体注射生理盐水2μL为生理盐水对照组。主要观察指标:①帕金森病模型成功率。②神经前体细胞移植对帕金森病模型大鼠旋转次数的影响。③移植的神经前体细胞在体分布,存活与分化情况。结果:①6周后实验组45只大鼠中共有33只(73%)达到成功帕金森病模型标准。②细菌培养皿上用无血清培养基培养形成胚胎体5d后,约85%胚胎干细胞分化为Nestin阳性的神经前体细胞。③神经前体细胞脑内移植后的帕金森病大鼠的旋转次数明显少于生理盐水对照组。多数移植的神经前体细胞存活,部分分化为TH阳性神经元。结论:小鼠胚胎干细胞诱导的神经前体细胞脑内移植后,分化为TH阳性神经元,帕金森病大鼠旋转次数明显减少。     

增强型绿色荧光蛋白基因转染小鼠胚胎干细胞及其无血清神经细胞诱导

目的构建表达绿色荧光蛋白的小鼠胚胎干细胞(MES)克隆,观察基因转染对MES细胞增殖和无血清诱导为nestin阳性神经前体细胞(NPCs)的影响。方法原代分离小鼠胚胎成纤维细胞并经丝裂霉素-C处理作为饲养层细胞。质粒的转化、抽提、纯化。电穿孔法基因转染,MES细胞克隆的NBT／BCIP染色,NPCs的nestin免疫组织化学染色。结果EGFP基因转染后可得到表达绿色荧光蛋白的MES细胞克隆,采用N2或ITSF无血清条件培养基可将其定向诱导为nestin阳性的并能发绿色荧光的NPCs。基因转染后的MES细胞增殖、神经前体细胞诱导率和未转染组相比均无明显下降,但NPCs绿色荧光的表达较诱导前明显下降。结论基因转染对ES细胞的增殖和神经分化无明显影响。     

男性慢性乙型肝炎患者肝细胞脂肪变危险因素分析

目的：比较男性慢性乙型肝炎（CHB）合并肝脂肪变患者与单纯 CHB 患者临床特征,寻找影响肝细胞脂肪变的危险因素。方法2010年3月～2013年3月期间,住院初治且有肝活检病理学检查的男性 CHB 患者209例,根据肝组织中有无脂质沉积分为 CHB 合并脂肪变组及单纯 CHB 组,比较两组患者血脂、血尿酸、血糖、饮酒、体质量指数和病毒载量情况,进行二元 Logistic 回归分析,了解肝脂肪变的危险因素。结果在209例男性 CHB 患者中,合并脂肪变121例（57.9%）,单纯 CHB 88例（42.1%）;CHB 合并脂肪变患者尿酸、低密度脂蛋白和甘油三酯分别为（352.5±87.1）mmol/L、（2.8±0.8）mmol/L 和（1.8±0.1）μmol/L,均显著高于单纯 CHB 患者[（310.3±69.1） mmol/L、（2.2±0.6） mmol/L 和（1.2±0.7）μmol/L,P〈0.01）];体质量指数和低密度脂蛋白水平升高是男性 CHB 患者合并肝脂肪变的危险因素（P〈0.05）。结论肥胖、血脂紊乱等代谢综合征相关表现是男性 CHB 患者肝组织脂肪变的危险因素,而饮酒或病毒载量可能不是肝脂肪变的危险因素。