IKKi在肝硬化相关肝细胞癌中的表达

目的:研究核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)信号通路中IKKi蛋白在肝硬化相关肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达水平及其临床病理意义.方法:采用免疫组织化学方法检测66例肝硬化相关HCC IKKi蛋白表达,同一病例癌旁肝硬化组织作为对照,收集患者临床病理资料,分析HCC IKKi蛋白表达水平以及与临床病理参数的关系.结果:(1)IKKi在HCC与癌旁肝硬化组织表达水平有明显差异性(P=0.016),IKKi在癌周肝硬化组织表达强度明显强于HCC;(2)IKKi在HCC中的表达水平与肿瘤分化程度呈正相关,即IKKi表达水平越低,HCC分化程度越低(P=0.019,r=0.278);与肿瘤直径呈负相关,即IKKi表达水平越低,肿瘤体积越大(P=0.011,r=-0.311);(3)IKKi在HCC中的表达水平与年龄(P=0.034,r=0.261)、Child-Pugh分级(P=0.046,r=0.246)、乙型肝炎家族史(P=0.017,r=0.292)呈正相关.结论:IKKi在HCC表达下调提示IKKi在乙型肝炎病毒感染-病毒性肝炎-肝硬化-HCC的发生中可能起抑制肿瘤形成的作用.     

我院10年住院病人医疗指标完成情况分析

应用数据判断医院的工作质量，是医院管理科学化的重要标志。现根据我院卫生统计资料，将1981年至1990年十年间住院病人医疗指标完成情况整理分析如下：     

Smad 6和Smad 7基因治疗对肾小管间质纤维化进程的影响

目的 观察腺相关病毒(rAAV)介导的Smad6和Smad7基因治疗对单侧输尿管梗阻性(LIUO)肾小管间质纤维化进程的影响。方法 构建产生表达Smad6和Smad7基因的无辅毒腺相关病毒载体，再将此病毒颗粒通过肾动脉途径转移到UUO模型。30只Wistar大鼠随机分为假手术组、梗阻组、LacZ AAV转染组、Smad6 AAV转染组和Smad7 AAV转染组(n=6)，于术后第3周处死大鼠。采用β-半乳糖苷酶染色和免疫组化观察外源基因的定位，Western印迹法观察外源基因、胞内磷酸化Smad2、PAI-1和α-SMA的表达；底物酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性，分光光度法测定肾组织羟脯氨酸含量。结果 Smad6和Smad7成功地转染到外髓的肾小管间质区，定位在肾小管和集合管细胞，而血管细胞、肾小球或间质细胞均未见有AAV转移基因的表达。Smad7基因治疗可显著降低肾组织PAI-1、α-SMA的表达和肾组织羟脯氨酸含量，增加MMP-2和MMP-9活性，这些作用与Smad7阻断Smad2磷酸化有关。相反，Smad6没有这样的治疗作用。结论 Smad7基因转移能有效缓解单侧输尿管梗阻肾小管间质纤维化，AAV介导的Smad7基因转移有望成为治疗肾小管间质纤维化的方法之一。     

高原低氧对胎鼠海马神经元N－甲基－D－天冬氨酸受体发育的影响

目的：观察高原低氧环境对胎鼠海马神经元N-甲基-D-天(门)冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate receptor,NMDAR)数目和通道特性的影响，为防治高原低氧引起的脑损伤提供依据。方法：将孕10d SD大鼠置于低压氧舱内，采用原位杂交和膜片钳观察其所生子鼠海马NMDA受体的数量和功能。结果：胎鼠高原低氧后，NMDA受体数量减少，通道开放概率由0.150降为0．012，通道开放时间常数61由0．040&;#177;0．010降为0．020&;#177;0．007(t=33．21，P&;lt;0．05)，62由0．75&;#177;0．23降为0．49&;#177;0．23(t=25．31．P&;lt;0．05)，通道关闭时间常数61由0．14&;#177;0．07升高为14．25&;#177;3．5(t=12．74，P&;lt;0．01)，62由2．67&;#177;1．12升高为4832&;#177;1809(t=8．44．P&;lt;0．01)。结论：高原低氧影响到胎鼠NMDA受体的发育，提示高原低氧环境下大鼠的学习记忆可能受到影响。     

小鼠胚胎干细胞诱导的神经前体细胞大脑皮层移植对AD大鼠的治疗作用

目的与方法：将小鼠胚胎干细胞无血清诱导为神经前体细胞后移植到叠氮钠所致的阿尔茨海默氏病（AD）大鼠额叶皮层，采用免疫组化观察移植细胞的存活、分化以及细胞移植对AD大鼠Morris水迷宫记忆功能的作用。结果： 胚胎干细胞形成的胚胎样体经N2选择性培养基选择生长5 d后，85％以上的小鼠胚胎干细胞分化为nestin阳性的神经前体细胞。移植到AD 大鼠额叶皮层后4-6周，神经前体细胞存活良好，大部分移植细胞保持为未分化的nestin阳性的神经前体细胞并呈克隆生长，部分细胞发出类似于神经元的长突起。移植后4周，AD大鼠的空间记忆能力明显提高。结论： 胚胎干细胞来源的神经前体细胞移植到AD大鼠额叶皮层后能存活并分化为神经元，能改善AD大鼠的记忆功能障碍。     

肝硬化并门静脉血栓脂代谢相关差异蛋白的研究

目的筛选肝硬化合并门静脉血栓(Portal vein thrombosis,PVT)患者的血清差异表达蛋白,对脂代谢相关差异表达蛋白进行分析。方法收集2015年11月至2016年11月在新疆医科大学第一附属医院感染疾病中心诊治的肝硬化合并PVT患者的血清标本22份,肝硬化未合并PVT患者的血清标本23份。采用相对和绝对同位素定量标记(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)联合色谱质谱技术筛选两组间的血清差异表达蛋白,对脂代谢相关差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果两组间共检测出800个蛋白,与脂肪代谢相关的蛋白共有17个,其中7个蛋白在两组间有差异,3个差异表达蛋白(APOA1,FABP1,APOB)在脂肪消化和吸收通路中显著富集。结论 APOA1、FABP1、APOB可能为肝硬化发生PVT的潜在生物标志物,值得进一步研究。     

大鼠海马与前皮质N4 mRNA神经元的发育--原位杂交与RT-PCR研究

目的 研究大鼠N4 mRNA神经元在前皮质与海马的时空表达模式。方法 地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学和逆转录PCR技术。结果 E13-E16：原位杂交方法最早检测到N4 mRNA神经元，在海马与前皮质呈强阳性信号。P0～P2：N4 mRNA阳性信号在海马开始减弱，在前皮质仍维持较高的水平。P7：N4 mRNA阳性信号在海马明显减弱，仅在海马的齿状回见部分阳性神经元，在前皮质的水平轻度减低。P14：N4 mRNA神经元数目增多，主要位于海马齿状回的颗粒细胞层；P21-P28：N4 mRNA在海马的齿回呈强阳性信号，在CA3区呈中等程度的阳性信号，CA1区、CA2区及下托可见部分阳性神经元，前皮质可见Ⅱ／Ⅲ层的锥体细胞层呈强阳性信号。P90～P150：在海马的齿状回、CA3区，CA1区、CA2区及下托见中等强度的N4 mRNA阳性信号。P300：N4 mRNA神经元在海马与皮层的表达明显减少，仅见部分散在的阳性神经元。逆转录PCR检测结果与原位杂交所得结果基本相符，在胚胎期N4 mRNA表达最强，生后减弱，P7降至最低，P21～P28为生后的表达高峰，随之下降，P300表达弱。N4基因在不同发育时期皮层的表达，在胚胎期信号最强，生后略微减弱，组间差异不明显。结论 N4基因特异的表达于海马，并在海马的形成期表达最高，可能对海马的传入通路的发育有重要作用。     

纤维连接蛋白在小鼠胚胎干细胞诱导为神经前体细胞中的作用

目的 观察采用ITSF和N2无血清培养基诱导小鼠胚胎干细胞为神经前体细胞的作用及纤维连接蛋白对神经诱导的影响。方法 小鼠胚胎干细胞的培养和无血清诱导为神经有体细胞，NBT／BCIP染色，Nestin免疫组化染色。结果 细菌培养皿法或悬滴法培养胚体，ITSF或N2无血清培养基均能将小鼠胚胎干细胞诱导为神经前体细胞。纤维连接蛋白预处理培养皿法表面，对胚体的贴壁情况影响不大，但能使无血清培养后存活的细胞增多。结论 小鼠胚胎干细胞在ITSF和N2培养基均能分化为神经前体细胞，在N2培养基中加入纤维连接有使存活的神经前体细胞数量增多。     

神经生物学实验内容安排与教学手段的探索

为提高神经生物学实验教学质量。根据神经生物学课程的自身特点，在实验内容安排上综合考虑神经组织学、神经行为学、神经形态学、神经电生理学四方面的内容，在教学过程中运用多媒体技术等教学手段，充分调动学生的积极性与主动性。并在教学实施过程中发现这对提高实验教学质量起到了积极作用。     

雌激素对福尔马林致痛后小鼠脊髓背角c-Fos和P物质的影响

目的观察雌激素对福尔马林致痛后小鼠痛觉评分及脊髓背角c-Fos和P物质(SP)表达的影响。方法选用雌性C57/BL6小鼠15只,分成对照组(control)、去卵巢手术组(OVX+V)、去卵巢手术加雌激素组(OVX+E),每组5只。采用痛觉评分分析雌激素对小鼠福尔马林足底注射后痛行为的影响,结合c-Fos及SP免疫组化,观察雌激素对脊髓L3～L5节段背角浅层神经元激活及痛觉传入的影响。结果小鼠福尔马林致痛后control组、OVX+V组和OVX+E组在第一时相的痛觉评分组间无统计学差异(P>0.05);间歇期及第二时相早期的痛觉评分OVX+V组明显高于control组和OVX+E组(P<0.05)。卵巢摘除增加福尔马林致痛后引起的脊髓背角FLIN数(P<0.01)和SP免疫阳性反应物,而雌激素能有效抑制福尔马林引起的注射侧背角FLIN数的升高(P<0.01)以及SP免疫阳性反应物显著降低。结论雌激素通过调节脊髓背角浅层感觉神经元的活动及痛觉纤维的传入参与对小鼠福尔马林致痛的镇痛作用。