表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用

结直肠癌是威胁人类健康的常见肿瘤之一,目前缺乏敏感度、特异度高的早期诊断方法。蛋白质组学为结直肠癌许多研究领域拓开了新视野,表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)是蛋白质芯片和质谱技术的结合,主要由蛋白质芯片、芯片阅读器和生物信息学3大部分组成,可直接分析患者血清、淋巴液、脑脊液、尿液、细胞分泌液等样品而无需复杂的样品制备,具有快速、简便、易行高通量平行分析等特点,是蛋白质组学的主要技术平台之一,目前已经初步应用于结直肠癌早期诊断、术后随访及标志物鉴定等方面的研究。作者综述了SELDI-TOF-MS的基本原理、技术特点及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。     

ASPP蛋白家族成员在结直肠癌组织中的表达及其意义

目的研究p53凋亡刺激蛋白(apoptosis-stimulating protein of p53, ASPP)家族成员在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学方法和免疫荧光染色方法检测115例CRC组织中ASPP蛋白家族成员(ASPP1、ASPP2、iASPP)的表达,并应用统计学方法检验ASPP的表达与CRC临床病理特征之间的关系。结果 ASPP1在115例CRC组织中均无表达,ASPP2的表达率为91.3%(105/115),iASPP的表达率为22.6%(26/115)。ASPP2的表达在≥50岁与50岁组患者间差异具有统计学意义(P0.01);0+Ⅰ期CRC中的表达与Ⅲ期相比,差异具有统计学意义(P0.05);浸润深度上,Tis+T1组与T3组相比,差异具有统计学意义(P0.01);淋巴结转移分组,N0与N2组间差异具有统计学意义(P0.01)。iASPP在淋巴结转移分组N0组与N1组相比,差异具有统计学意义(P0.05)。ASPP2和iASPP的表达与CRC的其他临床病理特征均无相关性。结论 ASPP家族成员在CRC组织中的表达存在差异;ASPP2可用于判断CRC患者的预后。     

SELDI蛋白质芯片平台及其在结直肠癌蛋白质组学中的应用

结直肠癌是威胁人类健康的常见肿瘤之一，目前缺乏敏感度、特异度高的早期诊断方法。蛋白质组学为结直肠癌的许多研究领域开拓了新的视野，表面增强激光解吸／离子化飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption ionization-time of flight-mass spectroscopy，SELDI-TOF-MS）蛋白质芯片平台是蛋白质组学的主要技术平台之一，本文综述了SELDI蛋白质芯片平台的基本原理、技术特点及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。     

现代恐怖袭击致冲击伤的病征及防治

从俄克拉荷马城爆炸案、马德里连续轰炸案到2001-09-11世贸中心袭击事件,可以看出国内外恐怖事件是我们现代的不幸产物。近些年来,用于实施恐怖活动的武器包括爆炸性的常规武器、化学武器和生物武器。了解这些武器损伤的机制对救治有重要意义。此外,在此类损伤中,儿童是最大的受害者,因此,在发生大规模伤亡事件时,要求重点考虑对儿童的施救。本文综述了恐怖袭击中冲击伤的临床表现、病理生理机制及救治。     

应用SELDI-TOF-MS技术初步建立结直肠癌分类树模型

目的:分析结直肠癌期患者血清蛋白质组变化, 初步建立结直肠癌期分类树模型.方法:将335例血清样本(其中结直肠癌患者169例, 健康人166例)随机分为训练组和测试组, 将血清样本加至IMAC30-Cu2+蛋白芯片,利用SELDI-TOF-MS得到血清蛋白质谱, 利用Biomarker Wizard软件进行蛋白峰值鉴定和聚类. 利用Biomarker Pattern以训练组建立由1个差异蛋白组成的结直肠癌期分类树模型, 以测试组进行独立样本的双盲验证. 另外, 应用电化学发光免疫测定法检测测试组血清样本CEA.结果:软件识别了59个质峰, 其中由质荷比为5765的蛋白构成的分类树模型可以有效鉴别结直肠癌患者与正常人, 灵敏度和特异度分别是98.81%及100.00%, 经双盲验证其灵敏度,特异度及阳性预测值分别是97.65%, 98.80%及98.81%. CEA的灵敏度及特异度低于SELDI分类树模型( P<0.05).结论:SELDI-TOF-MS检测得到的血清蛋白质组分类树模型可以准确的鉴别结直肠癌患者与正常人, 对结直肠癌的筛查有重要的意义.     

淋巴结原发朗格汉斯细胞肉瘤一例并文献复习

目的 探讨原发于淋巴结的朗格汉斯细胞肉瘤（LCS）患者的临床病理特征、治疗及预后。方法 回顾性分析1例原发于淋巴结LCS患者的临床资料、组织病理学形态和免疫组织化学结果及治疗,并复习相关文献。结果 患者因左颈部包块1周入院,包块呈结节状,边界欠清,质硬伴压痛,与周围组织粘连,无红肿热痛。包块位于皮下,与周围组织粘连较重。镜下见淋巴结结构破坏,瘤细胞弥漫成片排列,细胞大小不等,体积较大者,形状不规则,胞质丰富、红染;核大,边缘不整,部分呈分叶状,核仁突出;可见巨核瘤细胞,病理性核分裂象多见。瘤细胞表达CD1a、波形蛋白和S-100,CD68部分阳性。诊断为淋巴结原发LCS,经放化疗后6个月死亡。结论 原发于淋巴结的LCS较为罕见,预后差,诊断主要依靠形态学及免疫组织化学染色。     

应用SELDI-TOF-MS技术初步建立结直肠癌Ⅰ期分类树模型

目的:分析结直肠癌Ⅰ期患者血清蛋白质组学变化,初步建立结直肠癌Ⅰ期分类树模型.方法:应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱仪(surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)和固相金属螯合(immobilized metal affinity capture,IMAC30-Cu2+)蛋白芯片检测血清样本得到质谱图,应用Biomarker Wizard 软件对结直肠散发性中分化腺癌Ⅰ期31例和非癌组35例(其中健康志愿者16例,结直肠良性疾病患者19例)进行蛋白峰值鉴定和聚类.应用Biomarker Pattern 软件分析得到分类树模型,在测试模式下行双盲验证.另外,应用电化学发光免疫测定法检测样本癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的表达.结果:软件识别了61个质峰,由质荷比为2 787、3 777、3 816、3 852、5 065、5 828、5 855和4 172等8个蛋白构成的分类树模型可以有效鉴别结直肠癌Ⅰ期与非癌组样本,在学习模式下敏感度、特异度分别是 93.55%和91.43%,在测试模式下敏感度、特异度和阳性预测值分别是70.97%、 82.86%和78.57%,明显优于CEA的检测,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:SELDI-TOF-MS检测得到的血清蛋白组分类树模型可以准确鉴别结直肠癌Ⅰ期与非癌组,对结直肠癌Ⅰ期的筛查有重要的意义.     

p53凋亡刺激蛋白家族成员在浸润性乳腺癌中的表达及其意义

目的研究p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族成员在浸润性乳腺癌中的表达,并探讨其与p53表达状态、乳腺癌分子分型及预后的关系。 方法收集2005年1月至2010年4月解放军第九八九医院收治的155例浸润性乳腺癌患者组织标本进行回顾性分析。采用免疫组织化学方法检测组织标本中ASPP1、ASPP2、P53凋亡刺激蛋白抑制因子(iASPP)、p53、ER、PR、HER-2和Ki67的表达,并用χ²检验分析ASPP家族成员表达与乳腺癌分子分型和p53状态的关系,采用Kaplan-Meier生存分析方法评价ASPP家族成员表达与患者预后的关系。 结果155例乳腺癌组织中,ASPP1阳性率为13.5%(21/155),ASPP2阳性率为97.4%(151/155),iASPP阳性率为61.3%(95/155)。表达野生型p53者33例,突变型p53者122例,p53的突变率为78.7%(122/155)。ASPP家族成员的表达在野生型p53组与突变型p53组间差异无统计学意义(ASPP1：χ²<0.001,P＝0.987; ASPP2：χ²＝1.110,P＝0.579; iASPP：χ²＝0.244,P＝0.621)。luminal A型44例,luminal B型66例,basal-like型18例,HER-2过表达型27例,ASPP家族成员的表达在不同分子分型乳腺癌组间差异无统计学意义(ASPP1：χ²＝2.325, P＝0.508; ASPP2：χ²＝1.657, P＝0.642; iASPP: χ²＝0.815,P＝0.846)。随访时间2～108个月,中位随访时间66个月,患者3年总生存率为84.5%(131/155),5年OS率为79.4%(123/155)。ASPP1、ASPP2和iASPP表达阳性组与阴性组相比,患者5年OS率的差异均无统计学意义(ASPP1：χ²＝3.790, P＝0.050;ASPP2：χ²＝0.040, P＝0.927;iASPP：χ²＝1.253, P＝0.263)。 结论ASPP家族成员在浸润性乳腺癌中的表达与P53突变、乳腺癌分子分型以及乳腺癌患者预后均无关。     

SELDI蛋白质芯片平台在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用

表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱（surface enhanced laser desorption ionization-time of flight-mass spectroscopy,SELDI-TOF-MS）蛋白质芯片平台是蛋白质组学的主要技术平台之一，笔者综述了SELDI蛋白质芯片平台的基本原理及其在结直肠癌蛋白质组学研究中的应用和展望。     

流式细胞术在临床肿瘤学中的应用

<正>流式细胞术(flow cytometry,FCM)是利用流式细胞仪对于处在快速直线流动状态中的单细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析,并可对特定群体加以分选的细胞分析技术,具有检测速度快、测量指标多、采集数据量大、分析全面、分选纯度高、方法灵活等特点。随着流式细胞分析技术与