糖基化终末产物对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶-2活性的影响

目的:观察糖基化终末产物(AGEs)和氨基胍(AG)对大鼠肾皮质基质金属蛋白酶-2(MMP-2)活性的影响.方法:正常雄性Wistar大鼠23只,随机分为4组,AGE-修饰大鼠血清蛋白(AGE-RSP)组 (n=6)每日尾静脉注射AGE-RSP,AGEs+AG组(n=6)同时腹腔注射AG,天然血清组(n=6)注射天然大鼠血清蛋白,空白对照组(n=5)不施加处理,连续注射4周后,用ELISA法测定肾皮质AGEs含量,酶谱法检测肾皮质MMP-2活性.结果:与天然血清组及空白对照组比较,注射AGE-RSP的大鼠肾皮质AGEs含量明显增加,活性形式的MMP-2活性明显降低(P<0.05),而同时注射AG的大鼠MMP-2活性明显增加(P<0.05).结论:AGEs能降低大鼠肾皮质MMP-2活性,AG可抑制AGEs对MMP-2活性的影响,提示AGEs通过降低MMP-2活性减少肾小球细胞外基质(ECM)降解,可能是导致ECM积聚的原因之一.     

糖尿病大鼠肾皮质糖基化终产物含量与纤溶酶原激活物抑制物-1表达的关系

目的:研究链脲佐菌素诱发的糖尿病(DM)大鼠肾皮质糖基化终产物(AGEs)含量与纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)表达的关系及牛磺酸的调节作用.方法:DM大鼠用牛磺酸处理14周后,分别用荧光法、生物化学法和Northern杂交检测肾皮质AGEs含量、组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性、PAI-1活性和PAI-1 mRNA表达.结果:与对照大鼠相比,DM大鼠肾皮质AGEs含量、PAI-1活性和PAI-1 mRNA表达明显增加,而t-PA活性下降.AGEs含量与PAI-1生物活性及PAI-1 mRNA表达均呈正相关(P<0.01).DM大鼠给予牛磺酸处理后可改善上述参数的改变.结论:DM大鼠肾皮质AGEs含量增加能明显上调PAI-1基因表达,牛磺酸可抑制AGEs形成和PAI-1基因表达的上调.     

阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏损害的改善作用

目的观察阿魏酸钠(SF)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏损害的改善作用。方法将W istar大鼠48只随机分为假手术组、UUO组、苯那普利治疗组及阿魏酸钠治疗组,于给药2和4 w后分别检测各组大鼠肾脏指数、左右肾重比、尿NAG酶活性、尿液尿素氮、尿肌酐、血尿素氮、血肌酐及24 h尿蛋白排泄量等指标。结果给药2 w后,与模型组比较,阿魏酸钠组大鼠肾脏指数(0.64±0.10)、尿NAG酶活性〔(18.0±5.43)U/L〕、血尿素氮〔(7.3±1.1)mmol/L〕、血肌酐〔(35.2±8.4)μmol/L〕及24 h尿蛋白排泄量〔(9.8±4.4)mg/24 h〕均明显降低(P<0.05),苯那普利组与阿魏酸钠组结果相似;给药4 w后,阿魏酸钠组大鼠肾脏指数(0.57±0.23)、尿肌酐〔(551±196)μmol/L〕和血尿素氮〔(11.1±1.8)mmol/L〕均较模型组明显减低(P<0.05)。结论阿魏酸钠对UUO引起的大鼠肾损害具有明显改善作用。     

糖基化终产物对大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E尾加压素ⅡmRNA表达的影响

目的 探讨晚期糖基化终产物（AGEs）对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E尾加压素Ⅱ（urotensi n Ⅱ,UⅡ）mRNA表达及对细胞外基质（ECM）合成的影响.方法 在培养大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E中,分别加入不同浓度的糖化牛血清白蛋白（AGE-BSA）及其对照物牛血清白蛋白（BSA）进行刺激,ELISA法检测培养上清中纤连蛋白（FN）及Ⅳ型胶原 （Collagen Ⅳ）含量,RT-PCR检测细胞UⅡmRNA表达.结果 与加入BS A组比较,AGE-BSA组UⅡmRNA表达以时间和剂量依赖方式明显增加（P＜0.05）,培养上清中FN及Col Ⅳ含量也明显增加（P＜0.05）,与UⅡmRNA表达量呈正相关（r= 0 .92 2,0.878）.结论 AGEs能明显诱导大鼠肾小管上皮细胞UⅡmRNA表达 , 促进FN和Col Ⅳ分泌,提示UⅡ可能在AGEs引起的ECM合成增加中起一定作用,进而参与糖尿病肾病ECM积聚的病理过程.     

运用生物学原理对钢板固定胫骨骨折的回顾性分析

目的探讨生物学原理在胫骨骨折治疗中的运用。方法本组病例218例,男性165例,女性53例,年龄17～68岁。受伤时间6h～15d。结论运用生物学原理进行胫骨骨折钢板内固定,创伤小,对骨折瑞血液循环进行最大限度的保护。作为一种先进的内固定理念,应做为治疗胫骨骨折的良好方法。     

链脲佐菌素所致高血糖对大鼠缺血性脑损伤的影响

目的 研究链脲佐菌素所致糖尿病性高血糖（ＨＧ）对大鼠缺血性脑损伤的影响。方法 链脲佐菌素引起糖尿病４周的大鼠造成１０ｍｉｎ前脑缺血,观察缺血后脑组织的病理改变和癫痫发作情况。结果 在海马ＣＡ１区和下脚区,ＨＧ组与正常血糖（ＮＧ）组动物脑神经元损伤程度相似。然而,ＨＧ组动物有严重的顶叶皮质神经元坏死和“额外脑结构损伤”。ＨＧ组中４２．１％的动物脑缺血后出现癫痫发作,血浆葡萄糖浓度低于１２ｍｍｏｌ／Ｌ     

马兜铃酸作用下大鼠肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ含量的变化

目的研究马兜铃酸(AA)作用下大鼠肾小管上皮细胞尾加压素Ⅱ(UⅡ)含量的变化。方法采用机械分离和酶消化法获取大鼠肾小管上皮细胞并进行培养、鉴定;用RT-PCR和Western blot法分别测定不同浓度(0ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml)AA作用下大鼠肾小管上皮细胞中Ⅶ基因和蛋白表达情况。结果培养的细胞经Cytokeratin-18免疫细胞化学染色确定为肾小管上皮细胞。AA以剂量依赖的方式促进肾小管上皮细胞UIImRNA和蛋白表达,5ng/ml AA作用下肾小管上皮细胞UⅡ mRNA表达即显著增强(P<0.01),其蛋白表达在10ng/ml AA作用下明显增强(P<0.05)。结论AA作用下大鼠肾小管上皮细胞UⅡ含量明显增加,推测UⅡ在AA所致大鼠肾小管上皮细胞损伤中可能有一定作用。     

关木通致肾损伤大鼠血和尿中尾加压素Ⅱ含量的变化

目的：观察关木通引起大鼠肾损伤时血和尿中尾加压素Ⅱ（UⅡ）含量的变化。方法：雄性Wistar大鼠随机分为对照组（5只）和给药组（25只）。大鼠灌胃给予关木通水煎剂后0、3、7、15、25 d和停药10 d时采血并留取24 h尿液,分别检测血肌酐、尿素氮、24 h尿蛋白、尿视黄醇结合蛋白（RBP）、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（NAG）水平及血浆、尿UⅡ含量;观察上述时间点肾脏组织病理学改变。结果：①给予关木通后不同时间血肌酐、尿素氮及24 h尿蛋白含量与对照组比较无明显升高;与对照组比较,尿NAG于给药15 d后明显升高（P<0.05）,给药25 d后NAG及RBP含量均增加（P<0.01）,停药10 d两者含量与25 d时比较未见明显下降。②与对照组比较,血UⅡ含量在给予关木通15 d即明显升高（P<0.05）,25 d达峰值（P<0.01）,停药10 d仍持续在较高水平（P<0.01）;尿UⅡ含量于给药25 d时较对照组明显升高（P<0.05）,停药10 d时仍在较高水平（P<0.05）。③给药3 d后HE染色可见局部肾小管上皮细胞变性、坏死和崩解,并随给药时间的延长逐渐加重,停药10 d病变较25 d时有所减轻。结论：关木通所致肾损伤可引起血、尿UⅡ含量明显升高,提示UⅡ在关木通所致肾损伤的发生发展中可能有一定的作用。     

尾加压素Ⅱ对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用

目的：研究尾加压素Ⅱ（UⅡ）对大鼠肾小管上皮细胞的促丝裂作用。方法：采用机械分离和酶消化法获取肾小管上皮细胞进行培养、鉴定;用免疫细胞化学法定位溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）掺入到肾小管上皮细胞DNA内;用MTT和BrdU掺入法观察不同浓度UⅡ（0、10^-10、10^-9、10^-8、10^-7和10^-6mol•L^-1）对肾小管上皮细胞增殖和DNA合成的影响,以确定其促丝裂作用。结果：培养的细胞经Cytokeratin-18免疫细胞化学染色后,强度不一和不均匀分布的棕黄色颗粒定位于大部分细胞的胞核周围和胞浆内。培养的肾小管上皮细胞经BrdU掺入和免疫细胞化学显色后,细胞核内有棕黄色颗粒沉着。10^-10 mol •L^-1 UⅡ组的MTT值、 BrdU掺入量与对照组（0 mol•L^-1 UⅡ）比较差异无显著性（P>0.05）;10^-9和10^-8mol•L^-1 UⅡ组的MTT值、BrdU掺入量高于对照组（P<0.01或P<0.05）;与对照组比较,10^-7和10^-6 mol•L^-1 UⅡ组的MTT值明显增加（P<0.05）,但增加的幅度较10^-9 和10^-8mol•L^-1 UⅡ组低,而BrdU掺入量无明显改变。结论：UⅡ对体外培养的大鼠肾小管上皮细胞具有促丝裂作用。