携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒的减毒沙门菌对前列腺癌移植瘤的体内抑制作用

目的:探讨人减毒沙门菌携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒对人前列腺癌皮下移植瘤生长的抑制作用及相关机制。方法:复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型,通过腹腔注射携带共表达质粒的减毒沙门菌进行治疗,实时监测肿瘤体积;运用免疫组织化学染色法、RT-PCR法和TUNEL法检测携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒的减毒沙门菌对肿瘤抑制作用的相关机制。结果:与psi-survivin或pGRIM-19单基因治疗对照组比较,携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒减毒沙门菌组肿瘤体积明显缩小,其缩小率分别约为2.36和3.02倍;肿瘤组织内survivin mRNA及蛋白表达明显下降(P0.05),GRIM-19 mRNA及蛋白表达明显增高(P0.05),凋亡相关蛋白Bcl-xL、Stat3、cyclin D1和c-Myc的mRNA表达明显降低(P0.05),血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及Ki67蛋白表达降低而caspase-3 mRNA表达明显上调(P0.05),同时细胞凋亡明显。结论:携带pGRIM-19-si-survivin共表达质粒的减毒沙门菌明显抑制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤的生长,其发生机制与促进细胞凋亡及抑制肿瘤细胞增殖有关。     

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠缺血心肌的保护作用

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对大鼠缺血心肌的保护作用,并探讨其作用机制。方法:实验动物分为(1)假手术组(shamcontrolgroup);(2)缺血+生理盐水组(ischemia+salinegroup);(3)缺血+bFGF组(ischemia+bFGFgroup)。结扎大鼠左冠状动脉复制缺血性心肌损伤模型。术前注入bFGF或生理盐水,于结扎后2h、4h、8h观察大鼠缺血区心肌细胞内Bcl-2、Bax的表达和血清SOD、心肌酶活性变化。结果:(1)在急性心肌缺血2h、4h时,缺血+bFGF组心肌细胞Bcl-2蛋白表达明显高于缺血+生理盐水组(P＜0.01),而Bax蛋白表达显著低于缺血+生理盐水组(P＜0.05)。(2)在心肌缺血4h,缺血+bFGF组血清SOD活性明显高于缺血+生理盐水组(P＜0.01)。(3)缺血+bFGF组LDH、CK-MB、α-HBDH含量明显低于缺血+生理盐水组(P＜0.05)。结论:bFGF对大鼠缺血心肌细胞具有保护作用。     

柴胡注射液对家兔内生致热原性发热及其脑脊液cAMP含量变化的效应

本实验共分二部分进行。第一部分,观察柴胡注射液解热效应,第二部分,观察柴胡注射液解热时对脑脊液cAMP含量变化的影响。用家兔内生致热原复制发热模型,剂量(1×10~6 cells/ml)0.5ml/kg。目前认为:cAMP是一种重要的中枢性发热介质,脑脊液中cAMP含量与发热效应呈正相关。本研究结果表明,柴胡注射液(250mg/kg)对内生致热原性发热有明显抑制作用;同时,脑脊液中cAMP含量也明显低于发热对照组。作者推论:柴胡注射液可能通过某些环节减少体温调节中枢神经元cAMP合成和释放,从而抑制发热效应。     

survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达

目的:探讨survivin和GRIM-19在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化、RT-PCR和Western印迹法检测survivin和GRIM-19在正常前列腺(NP)组织、良性前列腺增生(BPH)组织和前列腺癌(PCa)组织中的表达情况。结果:免疫组化结果显示survivin在NP、BPH和PCa组织中的表达率分别为6.25%、18.18%和90.62%(P<0.01);GRIM-19的表达率分别为87.50%、81.82%和9.37%(P<0.01)。半定量RT-PCR结果显示,在NP和BPH组织未检测到survivinmRNA表达,而PCa组织可检测到survivinmRNA高表达。Western印迹结果证实,在NP和BPH组织中有微量的survivin蛋白表达;而PCa组织可检测到survivin蛋白高表达;在NP和BPH组织中GRIM-19蛋白表达强阳性,而PCa组织中只有微量表达,两者比较差异均有显著性(P<0.01)。结论:survivin和GRIM-19的表达可能与PCa的发生密切相关。     

siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒的构建及其对前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用

目的: 构建siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒pGRIM-19-si-survivin并鉴定,观察pGRIM-19-si-survivin质粒对人前列腺癌DU145细胞survivin和GRIM-19 mRNA表达水平及细胞增殖能力的影响。方法:根据前期工作,利用基因重组技术构建siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒,将成功构建的pGRIM-19-si-survivin质粒转染人前列腺癌DU145细胞株,应用半定量RT-PCR方法检测细胞内survivin和GRIM-19 mRNA表达水平,应用MTT法观察其对细胞增殖能力的影响。结果:(1)应用酶切及质粒测序法鉴定,证明成功构建siRNA-survivin与GRIM-19共表达质粒。(2)与mock组比较,psi-survivin、pGRIM-19及pGRIM-19-si-survivin组survivin mRNA表达水平分别为0.55±0.05、0.62±0.08和0.35±0.05,差异显著(P<0.01);与psi-survivin和pGRIM-19组比较,pGRIM-19-si-survivin的抑制survivin表达作用明显增强(P<0.05);psi-survivin、pGRIM-19和pGRIM-19-si-survivin组GRIM-19表达增强,分别为mock组的1.93±0.14、2.57±0.20 和4.12±0.21(P<0.01),与pGRIM-19组比较,pGRIM-19-si-survivin增强GRIM-19表达作用更明显(P<0.05)。(3)转染48 h后,与mock组比较,psi-survivin、pGRIM-19和pGRIM-19-si-survivin 3组细胞增殖率分别为58.0%±7.2%、62.1%±6.1%和50.2%±4.8%,差异显著(P<0.05);转染72 h后,与mock组比较,3组细胞增殖率分别为43.4%±4.3%、51.3%±6.7%和26.8%±7.1%,差异明显(P<0.05,P<0.01);与psi-survivin和pGRIM-19组比较,pGRIM-19-si-survivin抑制作用明显增强(P<0.05)。结论:成功构建siRNA-survivin和GRIM-19共表达质粒pGRIM-19-si-survivin;该质粒抑制survivin表达并增强GRIM-19表达,对前列腺癌DU145细胞具有协同增殖抑制效应。     

银杏叶注射液治疗不稳定性心绞痛临床观察

目的：观察银杏叶注射液对冠心病不稳定性心绞痛（UA）的治疗作用。方法：对56例UA患者随机分为银杏叶注射液治疗组（28例）和对照组（28例）。观察治疗前后心绞痛症状改善情况、患者血压和心率、心电图改善情况、血清总胆固醇（TC）和甘油三脂（TG）含量变化并计算收缩压与心率乘积。结果：心绞痛症状总有效率治疗组优于对照组，p〈0．05；血压、心率、收缩压与心率乘积两组均无差异，p〉0．05；治疗组治疗后TC含量降低，与治疗前相比较，p〈0．05。结论：银杏叶注射液对改善UA临床症状作用显著，不增加心肌耗氧量，并有调节血脂作用。     

Survivin-siRNA对前列腺癌DU145细胞的促凋亡作用

目的:探讨survivin-siRNA对前列腺癌细胞株DU145的促凋亡作用。方法:构建针对survivin的siRNA表达载体pSi-sur,与脂质体和scramble-siRNA(pSi-scrambled)对照组分别转染前列腺癌细胞DU145后,利用半定量RT-PCR和Western blotting分别检测细胞survivin mRNA及蛋白表达水平;吖啶橙染色、Annexin V-FITC流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:转染72 h后,实验组细胞的survivin mRNA水平是脂质体组的0.28±0.07(n=3),蛋白表达水平是脂质体组的0.34±0.05(n=3),与对照组比较,差异显著(P0.05);吖啶橙染色、Annexin V-FITC和TUNEL法均观察到实验组细胞呈现明显的凋亡现象。结论:利用survivin-siRNA可明显抑制前列腺癌细胞DU145 survivin基因和蛋白表达,并诱导细胞凋亡,结果为进一步进行动物体内研究奠定了基础。     

人参皂甙Rh2与DDP抗PC-3协同作用的实验研究

[目的]探讨Rh2抗PC-3(前列腺癌细胞株)以及Rh2与DDP抗PC-3细胞有无协同作用.[方法]采用MTT比色法观察药物对癌细胞的杀伤作用;免疫细胞化学技术观察Bcl-2在各组之间表达情况;流式细胞术分析细胞周期.[结果]不同浓度Rh2与PC-3共同孵育24 h后,Rh2对PC-3生长抑制率随剂量增加而升高,呈剂量依赖性.免疫细胞学染色结果显示,随Rh2剂量增加细胞中的Bcl-2基因表达下调.流式细胞术结果显示Rh2可以使PC-3细胞周期阻滞在G1期.[结论]Rh2和DDP显示了明显的协同作用,为前列腺癌化疗药的选择与组方提供了重要的参考.     

lLK与NOS在SACC中的表达及意义

目的：通过观察整合素连接激酶（Integrin-linked kinase, ILK）与一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）在涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma, SACC）中的定位及表达,探讨ILK与NOS在SACC中的作用。方法：对2006-2012年吉林医药学院附属医院病理科30例SACC存档蜡块,和25例非肿瘤疾病的正常涎腺组织（对照组）行免疫组化分析,观察ILK与NOS在SACC中的表达分布情况。利用SPSS13.0统计软件分析ILK与NOS的差异性及相关性。结果：在SACC中,ILK阳性率为76.67%,eNOS阳性率为63.33%,iNOS阳性率为80%。ILK实验组与对照组比较,P<0.05;eNOS实验组与对照组比较,P>0.05;iNOS实验组与对照组比较,P<0.05。 ILK与eNOS在SACC中的表达不存在相关性;ILK与iNOS在SACC中的表达存在正相关,r=0.512。结论：ILK与iNOS在SACC中的表达存在正性相关,可能通过iNOS信号转导途径启动VEGF的表达,促进肿瘤早期的血管发生和形成。     

地塞米松在大鼠AMI时对心肌细胞保护作用的实验研究

目的观察地塞米松在大鼠急性心肌梗死（AMI）时对心肌细胞的保护作用。方法将实验动物随机分为假手术组，生理盐水组和地塞米松组（n=8）。结扎大鼠左冠状动脉复制AMI模型。术前分别注入生理盐水及地塞米松。于结扎后2h、4h、8h处死动物，采用免疫组织化学方法检测大鼠心脏缺血区心肌细胞内Bcl-2、Bax的表达情况，免疫抑制法检测血清心肌酶水平。结果在AMI后第4h、8h，地塞米松纽Bcl-2蛋白表达的阳性心肌细胞数明显高于生理盐水组（P〈0．01），而Bax蛋白表达的阳性心肌细胞数明显低于生理盐水组（P〈0．01）。地塞米松组在2h、4h、8h血清CK-MB、α-HBDH含量显著低于生理盐水组（P〈0．05）。结论地塞米松可促进AMI时心肌细胞内Bcl-2的表达、抑制Bax的表达，减少心肌酶的漏出，对心肌细胞具有保护作用。