干细胞贴膜治疗脊髓损伤

背景:目前人们较多采用的成体干细胞移植,移植方式多形成再次损伤,且体内神经元分化的效率不高.目的:在以往分步诱导分化高效获得神经元前体细胞的基础上,制成干细胞贴膜,观察其贴敷移植治疗脊髓损伤功能恢复的效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-05/10在郑州大学医学院实验中心完成.材料:酶、化学法制作膜样基质:分离培养、扩增羊膜间充质干细胞,BrdU标记,调整部分细胞浓度为1×1011L-1成细胞悬液备用.余分步诱导并制成干细胞贴膜.方法:健康成年雄性SD大鼠88只,体质量220～250 g,以自制打击器制作急性脊髓损伤模型.模型成功后6 h,抽签法随机分为4组,每组22只.干细胞贴膜组:在T11进行椎板切除术,打开硬膜充分显露损伤脊髓,止血,将干细胞贴膜贴敷在损伤脊髓表面,手术显微镜下固定于硬膜,分层缝合肌肉皮肤:细胞移植组:损伤脊髓头尾端移植1×1011L-1细胞悬液共5 μ L,余同上;基质组:贴敷膜样基质在损伤脊髓表面,余同上;对照组:仅行椎板切除术,并打开硬膜.主要观察指标:术后第1天及其后1周1次共10周,进行BBB评分和斜板实验等运动功能检测:术后2,4,6周观察移植细胞存活及形态学变化,免疫组织化学SP法检测胶质纤维酸性蛋白、突触素及神经元特异性烯醇化酶的表达.结果:①运动功能检测:各组BBB积分在4周及以后达到稳定,以10周时BBB评分12及以上为重要的恢复指标,则干细胞贴膜组为100%,细胞移植组为33%,基质组和对照组仅为17%.斜板实验的顺位实验,干细胞贴膜组第10周时的角度与第4周相比有显著改善(P=0.027),而同组同时间点的BBB分值间差异无显著性意义(P=0.286).②干细胞贴膜组和细胞移植组远端损伤边缘BrdU阳性细胞计数差异无显著性意义(P=0.089).干细胞贴膜组BrdU阳性细胞多呈神经元形态,细胞移植组BrdU阳性细胞多呈小胶质细胞形态.⑨各组突触素、胶质纤维酸性蛋白表达均逐渐增强,神经元特异性烯醇化酶表达则呈减少趋势.干细胞贴膜组各时间点的突触素、神经元特异性烯醇化酶表达高于其他各组(P<0.05);胶质纤维酸性蛋白表达则低于其他各组且保持稳定(P<0.05).细胞移植组、基质组和对照组不同时间点的胶质纤维酸性蛋白表达差异有显著性意义且逐渐增高(P<0.05).结论:干细胞贴膜上的神经元前体细胞可以在早期整合到损伤脊髓中,长期存活,并且具有高效的神经元分化特性;干细胞贴膜脊髓表面贴敷移植有助于脊髓损伤区突触素的表达、神经网络重建和神经功能恢复:干细胞贴膜移植较单纯干细胞移植史能有效促进神经功能恢复.     

胃癌腹膜转移与腹腔灌洗液中端料酶活性的关系

探讨胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性与胃癌腹膜转移的关系。方法：应端粒重复扩增（TRAP）－酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测46例胃 癌和14例胃溃疡患者腹腔灌洗液中的端粒酶活性,同时对46例胃癌患者行腹腔灌洗液脱落细胞学检测。结果：14例胃溃疡患者腹腔灌洗液中端粒酶活性均为阴性。胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性阳性率在PT3期胃癌为55．6％,在PT4期胃癌为99．3％;在浆膜未受累受、受累面积＜10cm^2组、10．120cm^2组和＞20cm^2组分别为5．3％、25．0％、76．9％和100．0％;在无肉眼可见腹膜转移灶（P0）组为42．9％,在肉眼可见腹膜转移灶（P1－3）组为100．0％,而腹腔灌洗液中脱落细胞学检测阳性率在PT3和PT4期胃癌分别为22．2％和61．5％;在浆膜末受累组、受累面积＜10cm^2组、10．1－20cm^2组和＞20cm^2组分别为0、0、38．5％和70．0％;在P0组为19．0％,在P1－3组为100．0％。TRAP－ELISA方法的阳性率比脱落细胞学检测显著增高（47．8％比26．1％,P＜0．05）。结论：腹腔灌洗液中的端粒酶活性与胃癌腹转移呈正相关,其活性可反映胃癌腹膜转移情况并成为早期诊断指标。     

脐血源神经干细胞治疗肌萎缩侧索硬化的免疫学改变及安全性评价

目的评价脐血源神经干细胞治疗肌萎缩侧索硬化症的疗效及安全性。方法对肌萎缩侧索硬化病人治疗前后进行血液肝肾功能、电解质、血清酶学、血糖、血脂、细胞及体液免疫测定,行Norris评分,观察症状体征改变。结果病人自身前后比较的结果显示,经治疗后血白细胞、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、T细胞、Th细胞、IgG以及Norris评分与治疗前比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。病人近期的病情有显著改善。结论脐血源神经干细胞移植后在近期内各项实验室化验结果显示,干细胞具有高安全性,有较明显的临床效果,但有待继续观察和随访。     

成年期追赶生长对大鼠胰岛素敏感性与应激水平的影响

目的 观察成年期追赶生长对大鼠胰岛素敏感性和应激水平的影响,并探讨其胰岛素抵抗形成的可能机制。方法 将7周龄雄性SD大鼠分为6组（共2个时间点）,即4周时间点2组：热卡限制4周组(R4),正常饮食4周组(NC4)作为R4组对照;8周时间点4组：正常饮食追赶生长组(RN4)、高脂饮食追赶生长组(RH4)、持续高脂饮食8周组（HF8）、持续正常饮食8周组(NC8)。通过先热卡限制后恢复饮食的方法建立追赶生长大鼠模型。检测大鼠高胰岛素-正糖钳夹试验过程中葡萄糖输注率和骨骼肌2-脱氧葡萄糖摄取、胰岛素刺激后的骨骼肌胰岛素信号通路、血皮质酮、骨骼肌11β-羟类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)表达水平。结果 热卡限制4周时,R4组大鼠血皮质酮和骨骼肌11β-HSD1 mRNA表达水平明显高于NC4组(P＜0.05),骨骼肌蛋白激酶B( Akt) Ser473磷酸化和糖摄取与NC4组相比差异无统计学意义。热卡限制后恢复饮食4周时,血皮质酮和骨骼肌11β-HSD1表达水平RN4组明显高于NC8组,RH4组明显高于NC8和HF8组,而骨骼肌Akt磷酸化和糖摄取RN4组明显低于NC8组,RH4组明显低于NC8组、HF8组和RN4组（均P＜0.05）。结论正常饮食和高脂饮食追赶生长大鼠均可导致整体和骨骼肌应激水平上调及胰岛素抵抗,尤以高脂饮食追赶生长大鼠更为明显。应激和饮食状况的交互作用可能是追赶生长胰岛素抵抗形成的重要原因。     

骨性Ⅱ类错 正畸正颌联合治疗前后软硬组织侧貌变化的线性相关分析

目的:通过对骨性Ⅱ类错 畸形患者正畸正颌联合治疗前后头颅定位侧位片指标的测量分析,探讨影响软组织侧貌的因素及贡献。 方法:选取40例骨性Ⅱ类错 畸形女性患者,对其正畸正颌联合治疗前后头颅定位侧位片进行测量分析,采用SPSS 24.0对治疗前后软硬组织的变化量进行线性回归分析。 结果:发现21组指标变化量间存在线性关系,其中软硬组织颏前点矢状向变化量呈极强相关性( r＝0.862, P<0.001),比率为0.935∶1;多元逐步后退回归分析显示上、下唇突点内收量分别与上、下中切牙内收量相关性更大等。 结论:骨性Ⅱ类错 畸形在正畸正颌联合治疗前后软组织移动量与硬组织移动量间存在着一定的线性比例关系,临床可根据患者诉求进行硬组织移动量的设计。     

追赶生长与高尿酸血症的相关性研究

目的:研究追赶生长人群代谢状况变化,探讨追赶生长是否与高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)相关以及是否为HUA的危险因素。方法:2014年于宜昌市夷陵区进行人群调查研究,共有6 685名居民参与。对所有研究对象进行体格检查和问卷调查,同时采集空腹及糖负荷后2 h静脉血,进行血糖、血脂、尿酸等指标检测。在剔除584名资料不全者后,对余下6 101名的数据进行分析。根据是否存在低营养后营养水平提升将受试者判定为追赶生长或非追赶生长,比较2组的代谢状况,Logistic回归分析追赶生长人群发生HUA的优势比(odds ratio, OR)。结果:与非追赶生长人群相比,追赶生长人群具有更高的体质量指数(body mass index,BMI)、收缩压、三酰甘油(triglyceride,TG)水平,更低的高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平;进一步亚组分析显示,在女性,追赶生长HUA患病比例和血尿酸水平明显高于非追赶生长(P0.001),而在男性,追赶生长与非追赶生长HUA患病比例和血尿酸水平差异无统计学意义(P0.1);经Logistic多元回归分析校正年龄、BMI、吸烟、饮酒、血压、空腹血糖、糖负荷后2 h血糖、TG等因素后,结果显示追赶生长女性发生HUA的风险较非追赶生长显著升高,OR值为1.415(P=0.022),95%可信区间(confidence interval, CI):1.272～2.795。结论:追赶生长人群较多出现代谢异常,且追赶生长与HUA相关,是HUA的独立危险因素。     

益口槟葛对金黄地鼠健康的影响研究

目的:研究连续嚼食基于葛根制备的槟榔风味咀嚼块益口槟葛4周对金黄地鼠的健康影响，评估益口槟葛的嚼食安全性。方法:将40只金黄地鼠随机分为4组，分别为空白对照组、葛根组、益口槟葛组和槟榔组，每组10只。空白组金黄地鼠用10%水合氯醛以3mL/kg剂量进行麻醉，以保证各组处理条件一致，其他实验组金黄地鼠在麻醉后将葛根、槟葛或槟榔(均切碎呈小颗粒状)塞至两颊，每2天1次，共持续给药4周。每两周用游标卡尺测金黄地鼠口腔开合度；第4周对各组金黄地鼠进行高架十字迷宫实验，评估葛根、益口槟葛和槟榔对金黄地鼠行为能力的影响；饲喂嚼食4周后，处死各组金黄地鼠，检测各主要脏器指数、肝转氨酶活性，评估其生理健康状况；取颊囊组织进行染色，并提取RNA,检测与口腔黏膜下纤维化有关的关键基因表达情况。结果:饲喂4周后，各实验组地鼠摄食量及体质量出现明显下降。槟榔组转氨酶显著升高，肾指数各组间无明显差异。各组地鼠颊囊无明显外观改变，开口度无明显差异，组织染色结果显示各咀嚼组出现一定的黏膜组织改变，槟榔组出现更明显的炎性细胞浸润。mRNA水平上的纤维化相关基因差异表达提示，槟榔咀嚼组出现一定的口腔黏膜下纤维化征兆，益...